면역화학적 분석에서 신호증폭과 항체의 표면 고정을 담당하는 범용성 재조합 2차 항체 유사체
Recombinant Secondary Antibody Mimic as a Target-specific Signal Amplifier and an Antibody Immobilizer in Immunoassays
특허 요약
본 발명은 면역화학적 분석에서 신호증폭과 항체의 표면 고정을 담당하는 범용성 재조합 2차 항체 유사체에 관한 것으로서, 글루타치온-S-트랜스퍼레이즈(glutathione-S-transferase; GST) 단백질 및 1차 항체의 Fc 부위에 결합하는 항체 결합 도메인(antibody-binding domain, ABD) 단백질이 융합된 GST-ABD 재조합 2차 항체 유사체; 또는 겨자무 퍼옥시다아제(horseradish peroxidase; HRP) 단백질, 글루타치온-S-트랜스퍼레이즈(glutathione-S-transferase; GST) 단백질 및 1차 항체의 Fc 부위에 결합하는 항체 결합 도메인(antibody-binding domain, ABD) 단백질이 융합된 HRP-GST-ABD 재조합 2차 항체 유사체를 제공한다. 본 발명의 범용성 재조합 2차 항체 유사체는 값싸고 대량생산이 가능하며, 면역화학적 분석에서 2차 항체를 대체할 수 있으므로, 그 활용도가 매우 높을 것으로 예상된다.
청구항
번호청구항
1

글루타치온-S-트랜스퍼레이즈(glutathione-S-transferase; GST) 단백질 및 1차 항체의 Fc 부위에 결합하는 항체 결합 도메인(antibody-binding domain, ABD) 단백질이 융합된 GST-ABD 재조합 2차 항체 유사체.

2

제1항에 있어서, 상기 GST 단백질은 서열번호 1의 아미노산 서열로 표시되는 것을 특징으로 하는 GST-ABD 재조합 2차 항체 유사체.

3

제1항에 있어서, 상기 ABD 단백질은 서열번호 2의 아미노산 서열로 표시되는 것을 특징으로 하는 GST-ABD 재조합 2차 항체 유사체.

4

GST 단백질을 코딩하는 유전자 및 ABD 단백질을 코딩하는 유전자를 포함하는 재조합 발현벡터.

5

제4항에 있어서, 상기 GST 단백질을 코딩하는 유전자는 서열번호 3의 염기서열로 표시되고, 상기 ABD 단백질을 코딩하는 유전자는 서열번호 4의 염기서열로 표시되는 것을 특징으로 하는 재조합 발현벡터.

6

제4항 또는 제5항에 따른 재조합 발현벡터로 형질전환된 재조합 미생물.

7

제6항에 있어서, 상기 미생물은 대장균인 것을 특징으로 하는 재조합 미생물.

8

제6항에 따른 재조합 미생물을 배양하여 GST-ABD 재조합 단백질을 발현시키는 단계; 및 상기 GST-ABD 재조합 단백질을 분리하는 단계를 포함하는 GST-ABD 재조합 2차 항체 유사체 생산방법.

9

제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 따른 GST-ABD 재조합 2차 항체 유사체를 항원-포획 항체(antigen-capturing antibodies)의 고정 매개체(anchoring adaptor)로 사용하는 샌드위치-타입 간접 ELISA(Sandwich-type indirect ELISA) 면역화학적 분석방법.

10

겨자무 퍼옥시다아제(horseradish peroxidase; HRP) 단백질, 글루타치온-S-트랜스퍼레이즈(glutathione-S-transferase; GST) 단백질 및 1차 항체의 Fc 부위에 결합하는 항체 결합 도메인(antibody-binding domain, ABD) 단백질이 융합된 HRP-GST-ABD 재조합 2차 항체 유사체.

11

제6항에 따른 재조합 미생물을 배양하여 GST-ABD 재조합 단백질을 발현시키는 단계; 상기 GST-ABD 재조합 단백질을 분리하는 단계; 및상기 분리된 GST-ABD 재조합 단백질에 HRP 단백질을 화학적으로 결합하는 단계를 포함하는 HRP-GST-ABD 재조합 2차 항체 유사체 생산방법.

12

제10항에 따른 HRP-GST-ABD 재조합 2차 항체 유사체에 1차 항체를 특이적으로 결합시키는 단계; 및 상기 1차 항체에 특이적인 항원을 처리하여 항원-항체 특이적 결합을 검출하는 단계를 포함하는 면역화학적 분석방법.

13

제12항에 있어서, 상기 면역화학적 분석방법은 단순 간접 ELISA(Simple indirect ELISA) 또는 티라미드 신호 증폭(Tyramide signal amplification; TSA) 면역염색법인 것을 특징으로 하는 면역화학적 분석방법.