오일을 이용한 조직재생용 탈세포 지지체의 제조방법 및 조직 탈세포 처리 조성물
Method of decellularized scaffold for tissue regeneration using oil and composition of tissue decellularization
특허 요약
본 발명은 오일을 이용한 조직재생용 탈세포 지지체의 제조방법 및 조직 탈세포 처리 조성물에 관한 것으로, 구체적으로 본 발명은 (a) 탈세포 대상의 조직을 준비하는 단계; (b) 아크릴아마이드(acrylamide), 비스-아크릴아마이드(bis-acrylamide), 아조-개시제(azo-initiator) 및 PBS(Phosphate-buffered saline)로 구성된 고정액에 상기 탈세포 대상 조직을 첨가하여, 상기 조직에 고정액을 침투시키는 단계; (c) 상기 고정액이 침투된 조직에 오일을 첨가하고 진공 상태에서 37℃~45℃ 온도로 3~4시간 동안 중합 반응시켜 조직 중합체(polymerization)를 제조하는 단계; 및 (d) 상기 (c) 단계에서 제조된 조직 중합체를 계면활성제 용액에 첨가하고 전기영동 또는 물리적 교반을 수행하는 단계를 포함하는 조직재생용 탈세포 지지체의 제조방법 및 조직의 탈세포화를 위한 조직 탈세포 처리 조성물에 관한 것이다.
청구항
번호청구항
1

(a) 탈세포 대상의 조직을 준비하는 단계;(b) 아크릴아마이드(acrylamide), 비스-아크릴아마이드(bis-acrylamide), 아조-개시제(azo-initiator) 및 PBS(Phosphate-buffered saline)로 구성된 고정액에 상기 탈세포 대상 조직을 첨가하여, 상기 조직에 고정액을 침투시키는 단계;(c) 상기 고정액이 침투된 조직을 오일 내에 잠기게 위치시키고 진공 상태에서 37℃45℃ 온도로 34시간 동안 중합 반응시켜 조직 중합체(polymerization)를 제조하는 단계; 및(d) 상기 (c) 단계에서 제조된 조직 중합체를 계면활성제 용액에 첨가하고 전기영동 또는 물리적 교반을 수행하는 단계를 포함하고,상기 고정액에는 812 wt%의 아크릴아마이드(acrylamide), 0.10.2wt%의 비스-아크릴아마이드(bis-acrylamide) 및 0.2~0.3 wt%의 아조-개시제(azo-initiator)가 함유되어 있는 것을 특징으로 하는, 오일을 이용하여 조직 손상 없이 조직재생용 탈세포 지지체를 제조하는 방법.

2

제1항에 있어서,상기 조직은 뇌조직 또는 췌장 조직인 것을 특징으로 하는 방법.

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4

제1항에 있어서,상기 (b) 단계에서 조직에 고정액을 침투시키는 것은 상기 고정액에 조직을 첨가하고 46℃의 온도에서 1014시간 동안 교반하여 수행하는 것을 특징으로 하는 방법.

5

제1항에 있어서,상기 (c) 단계에서 오일은 옥수수유, 올리브유 또는 미네랄 오일인 것을 특징으로 하는 방법.

6

제1항에 있어서,상기 (c) 단계에서 오일은 조직 중량 1g당 8~12ml의 양으로 사용하는 것을 특징으로 하는 방법.

7

제1항에 있어서,상기 (d) 단계에서 계면활성제 용액은 3~5wt%의 SDS(sodium dodecyl sulfate) 용액인 것을 특징으로 하는 방법.

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제1항에 있어서, 상기 (d) 단계에서 상기 전기영동은 1.5Å으로 1014시간 동안 전기영동을 수행하는 것이고, 상기 물리적 교반은 37℃에서 200300rpm으로 2~3일 동안 교반기로 교반하는 것을 특징으로 하는 방법.

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