장 상피세포에서 8-케토-트리코테센의 염증 작용을 예측하는 세포 기반 생체 분석 시스템
Enterocyte-based Quantitative Combination of Proinflammatory Sentinels Specific to 8-keto-Trichothecene
특허 요약
본 발명은 장 상피세포에서 8-케토-트리코테센의 염증 작용을 예측하는 세포 기반 생체 분석 시스템에 관한 것으로서, 8-케토-트리코테센이 인간 장 상피세포에서 p65 프로모터 활성을 억제하면서 EGR-1을 유도한다는 점에 근거한, 인간 장 상피세포에서 8-케토-트리코테센의 염증 작용을 예측하는 세포 기반 생체 분석 시스템에 대한 것이다. 본 발명에 따른 장 상피세포에서의 분자 기반 이중 바이오모니터링 시스템은 식품 매트릭스 내 8-케토-트리코테센에 반응하여, 전형적인 분자 염증 경로를 검출하기 위한 유용한 보조 도구로 활용될 수 있다.
청구항
번호청구항
1

EGR-1 결합 사이트 유전자 및 루시퍼라제(luciferase; LUC) 리포터 유전자를 포함하는 제1 리포터 재조합벡터; 및p65 프로모터 유전자 및 분비 알카라인 포스파타아제(secreted alkaline phosphatase; SEAP) 리포터 유전자를 포함하는 제2 리포터 재조합벡터를 포함하는 프로테아좀 서브유닛 알파 타입-3(proteasome subunit alpha type-3; PSMA3)-결핍 장 상피세포(intestinal epithelial cells; IECs) 기반 8-케토-트리코테센(8-keto-trichothecene) 검출 시스템.

2

제1항에 있어서, 상기 EGR-1 결합 사이트 유전자는 서열번호 1로 표시되는 것을 특징으로 하는 PSMA3-결핍 장 상피세포 기반 8-케토-트리코테센 검출 시스템.

3

삭제

4

삭제

5

제1항에 있어서, 상기 8-케토-트리코테센은 데옥시니발레놀(deoxynivalenol; DON), 15-아세틸 데옥시니발레놀(15-acetyl deoxynivalenol; 15-acDON), 3-아세틸 데옥시니발레놀(3-acetyl deoxynivalenol; 3-acDON), 푸사레논-X(fusarenon-X; Fu-X), 니발레놀(nivalenol; NIV), T-2 독소, 아플라톡신 B1(aflatoxin B1) 및 오크라톡신 A(ochratoxin A)으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는 PSMA3-결핍 장 상피세포 기반 8-케토-트리코테센 검출 시스템.

6

제1항에 있어서, 상기 검출 시스템은 8-케토-트리코테센에 대한 염증 반응을 측정하는 것을 특징으로 하는 PSMA3-결핍 장 상피세포 기반 8-케토-트리코테센 검출 시스템.

7
  1. EGR-1 결합 사이트 유전자 및 루시퍼라제(luciferase; LUC) 리포터 유전자를 포함하는 제1 리포터 재조합벡터; 및 p65 프로모터 유전자 및 분비 알카라인 포스파타아제(secreted alkaline phosphatase; SEAP) 리포터 유전자를 포함하는 제2 리포터 재조합벡터로 PSMA3-결핍 장 상피세포를 형질감염시키는 단계;2) 상기 형질감염된 PSMA3-결핍 장 상피세포에 시료를 처리하는 단계; 및3) 상기 시료가 처리된 PSMA3-결핍 장 상피세포에서 LUC 활성 및 SEAP 활성을 측정하는 단계를 포함하는 PSMA3-결핍 장 상피세포 기반 8-케토-트리코테센 검출 방법.
8

제7항에 있어서, 상기 EGR-1 결합 사이트 유전자는 서열번호 1로 표시되는 것을 특징으로 하는 PSMA3-결핍 장 상피세포 기반 8-케토-트리코테센 검출 방법.

9

삭제

10

제7항에 있어서, 상기 3) 단계에서 시료를 처리하지 않은 대조군에 비해 LUC 활성이 증가되고, SEAP 활성은 감소되는 것으로 측정된 시료의 경우, 8-케토-트리코테센이 함유된 것으로 판단하는 것을 특징으로 하는 PSMA3-결핍 장 상피세포 기반 8-케토-트리코테센 검출 방법.

11

제7항에 있어서, 상기 8-케토-트리코테센은 데옥시니발레놀(deoxynivalenol; DON), 15-아세틸 데옥시니발레놀(15-acetyl deoxynivalenol; 15-acDON), 3-아세틸 데옥시니발레놀(3-acetyl deoxynivalenol; 3-acDON), 푸사레논-X(fusarenon-X; Fu-X), 니발레놀(nivalenol; NIV), T-2 독소, 아플라톡신 B1(aflatoxin B1) 및 오크라톡신 A(ochratoxin A)으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는 PSMA3-결핍 장 상피세포 기반 8-케토-트리코테센 검출 방법.