소포체 스트레스 유발물질 검출 방법
A method for detecting agent inducing endoplasmic reticulum stress
특허 요약
본 발명은 분비형 알카라인 포스파타아제 (pSEAP) 발현 벡터, SEAP발현 상피세포주 및 SEAP 발현 상피 세포주를 이용한 소포체 스트레스 유발 물질 검출 방법에 관한 것이다. 보다 구체적으로, 본 발명은 인체 소장 상피세포에서 곰팡이 독소인 8-케토 트리코테센이 소포체 스트레스를 일으킨다는 점과 곰팡이 독소 농도의존적으로 SEAP 발현이 감소된다는 점을 밝혀내고, SEAP를 항시 발현하는 상피세포주를 포함하는 소포체 스트레스 유발 물질 검출용 조성물 및 이를 이용한 소포체 스트레스 유발물질 검출 방법에 관한 것이다.
청구항
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SV40 프로모터, 하이그로마이신 (hygromycin) 유전자 및 알칼리 포스파타아제 (alkaline phosphatase) 유전자로 구성된 분비형 알칼리 포스파타아제 발현 벡터;가 도입된, 분비형 알칼리 포스파타아제 (SEAP)를 항시 발현하는 인간 상피 세포주;를 포함하는, 식품, 곡류 및 사료로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 시료 내의 8-케토 트리코테센 검출용 조성물.

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제 6항에 있어서, 상기 8-케토 트리코테센은 데옥시니발레놀 (Deoxynivalenol, DON), 3-아세틸 DON, 15-아세틸 DON, 니발레놀 및 4-아세틸 니발레놀으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인 것을 특징으로 하는, 8-케토 트리코테센 검출용 조성물.

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제 6항에 있어서, 상기 조성물은 키트 또는 마이크로어레이 형태로 사용되는 것을 특징으로 하는, 8-케토 트리코테센 검출용 조성물.

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(a) SV40 프로모터, 하이그로마이신 (hygromycin) 유전자 및 알칼리 포스파타아제 (alkaline phosphatase) 유전자로 구성된 분비형 알칼리 포스파타아제 발현 벡터;가 도입된, 분비형 알칼리 포스파타아제 (SEAP)를 항시 발현하는 인간 상피 세포주;에 검사하고자 하는 식품, 곡류 및 사료로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 시료를 첨가하여 반응시키는 단계; 및(b) 상기 (a) 단계의 인간 상피 세포주에서 분비형 알칼리 포스파타아제 (SEAP)의 분비가 억제되는지 여부를 관찰하는 단계;를 포함하는 8-케토 트리코테센의 검출 방법.

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제 10항에 있어서, (c) 상기 (b) 단계에서 SEAP의 분비가 억제되면 시료가 8-케토 트리코테센에 오염되었다고 판단하는 단계;가 더 포함되는 것을 특징으로 하는, 8-케토 트리코테센의 검출 방법.

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제 10항에 있어서, 상기 8-케토 트리코테센은 데옥시니발레놀 (Deoxynivalenol, DON), 3-아세틸 DON, 15-아세틸 DON, 니발레놀 및 4-아세틸 니발레놀으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인 것을 특징으로 하는, 8-케토 트리코테센의 검출 방법.

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