체외 소형 난소 형성 방법
Method for generation of miniaturized ovaries in vitro
특허 요약
본 발명은 체외 소형 난소 형성 기술에 관한 것으로서, 효소 및 소정 크기의 메쉬를 이용해 균일한 크기의 난소 및 난자를 형성하는 방법을 제공한다.
청구항
번호청구항
1

(a) 분리된 암컷의 생식선(gonad)을 10 내지 20개의 세포 덩어리로 분리하는 단계;(b) 상기 세포 덩어리를 70 내지 100 ㎛의 구멍 크기를 가지는 메쉬로 거르는 필터링 단계; 및(c) 상기 메쉬를 통과하지 않은 세포 덩어리를 배양하는 단계를 포함하는 체외 소형 난소를 형성하는 방법으로서,상기 단계 (a)에서 콜라게나아제 IV 효소를 사용하며,상기 단계 (c)에서 전반에 aMEM-체외 분화 배양액을 사용하고 후반에 StemPro-체외 분화 배양액을 사용하는 것을 특징으로 하는 체외 소형 난소를 형성하는 방법.

2

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3

제1항에 있어서,단계 (a)에서 물리적인 방법을 함께 사용하는 것을 특징으로 하는 체외 소형 난소를 형성하는 방법.

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(a) 분리된 암컷의 생식선(gonad)을 콜라게나아제 IV 효소를 사용하여 10 내지 20개의 세포 덩어리로 분리하는 단계;(b) 상기 세포 덩어리를 70 내지 100 ㎛의 구멍 크기를 가지는 메쉬로 거르는 필터링 단계; 및(c) 상기 메쉬를 통과하지 않은 세포 덩어리를 체외 분화 배양액에서 배양하는 단계를 포함하는 체외 난포를 형성하는 방법.

5

(a) 분리된 암컷의 생식선(gonad)을 콜라게나아제 IV 효소를 사용하여 10 내지 20개의 세포 덩어리로 분리하는 단계;(b) 상기 세포 덩어리를 70 내지 100 ㎛의 구멍 크기를 가지는 메쉬로 거르는 필터링 단계; (c) 상기 메쉬를 통과하지 않은 세포 덩어리를 체외 분화 배양액에서 배양하는 단계를 포함하는 체외 난포를 형성하는 단계; 및(d) 형성된 체외 난포를 난포 발달 및 난자 성숙 배양액을 사용하여 배양하는 단계를 포함하는 체외 난자 형성 방법.

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제1항 또는 제3항의 방법을 포함하는 방법으로 제조되는 체외 소형 난소.

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분리된 암컷의 생식선(gonad)으로부터 체외 소형 난소, 체외 난포 또는 체외 난자를 제조하기 위한 키트로서, 생식선, 난포, 난소 또는 난자의 배양액, 세포간의 결합을 절단하기 위한 효소, 70 내지 100 ㎛의 구멍 크기를 가지는 메쉬로 구성된 군으로부터 선택되는 하나 이상을 포함하는 키트.

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제4항의 방법으로 제조되는 체외 난포.

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제5항의 방법으로 제조되는 체외 난자.