면역 바이오센서, 이를 포함하는 면역 바이오 키트, 상기 면역 바이오 센서의 분자 인식층 제조방법 및 상기 면역 바이오센서의 재생방법
An immune biosensor, an immune bio kit including the same, a method of manufacturing a molecular recognition layer of the immune biosensor and a method of regenerating the immune biosensor.
특허 요약
본 발명의 면역 바이오센서는 분자 인식층을 포함하고, 분자 인식층은 생체 물질에 특이적으로 결합하는 배향제어된 항체가 공유결합으로 고정되어 있는 것을 특징으로 한다.
청구항
번호청구항
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분자 인식층을 포함하고,상기 분자 인식층은 생체 물질에 특이적으로 결합하는 배향제어된 항체가 공유결합으로 고정되어 있고, 상기 배향제어된 항체는 31μM 농도의 디숙신이미딜 글루타레이트(disuccinimidyl glutarate, DSG), 500μM 농도의 디숙신이미딜 수베레이트 (disuccinimidyl suberate, DSS) 및 125μM 농도의 폴리(에틸렌 글리콜)일화 비스(설포숙신이미딜)수베레이트 (poly(ethylene glycol)ylated bis(sulfosuccinimidyl)suberate, BS(PEG)5) 중 적어도 어느 하나에 의해 공유결합으로 고정되는 것을 특징으로 하는, 면역 바이오센서.

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제1항에 있어서,상기 분자 인식층은 세 번 이내 반복사용이 가능한 것을 특징으로 하는,면역 바이오센서.

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제1항에 있어서상기 분자 인식층은 세번 반복사용 시, 450 nm의 파장에서 TMB 반응의 광학 밀도(OD) 값이 최초 면역반응 시 OD 값의 70% 이상으로 나타나는 것을 특징으로 하는 면역 바이오센서.

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제1항에 있어서,상기 분자 인식층은 Z-도메인이 자가 표지된(autodisplaying) 대장균의 외부 세포막(outer membrane)을 포함하는 것을 특징으로 하는면역 바이오센서.

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제1항에 있어서,상기 생체 물질은 항원, 항체, 펩타이드, 단백질, 박테리아, 바이러스, 및 진균으로 이루어진 군 중에서 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는면역 바이오센서.

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제1항에 있어서,상기 면역 바이오센서는 SPR(SURFACE PLASMON RESONANCE) 바이오센서, QCM (QUARTZ CRYSTAL MICROBALANCE) 바 이오센서, SAW(SURFACE ACOUSTIC WAVE) 바이오센서 및 FPW(FLEXURAL PLATE WAVE) 바이오센서로 이루어진 군 중에서 선택되는 것을 특징으로 하는,면역 바이오센서.

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분자인식층을 포함하고, 상기 분자인식층은 생체 물질에 특이적으로 결합하는 배향제어된 항체가 공유결합으로 고정되어 있는 것을 특징으로 하는 면역 바이오센서; 및트윈-20(tween-20) 및 글리신 용액이 함유된 면역 바이오센서 재생용 버퍼를 포함하고, 상기 배향제어된 항체는 31μM 농도의 디숙신이미딜 글루타레이트(disuccinimidyl glutarate, DSG), 500μM 농도의 디숙신이미딜 수베레이트 (disuccinimidyl suberate, DSS) 및 125μM 농도의 폴리(에틸렌 글리콜)일화 비스(설포숙신이미딜)수베레이트 (poly(ethylene glycol)ylated bis(sulfosuccinimidyl)suberate, BS(PEG)5) 중 적어도 어느 하나에 의해 공유결합으로 고정되는 것을 특징으로 하는, 생체 물질 검출용 키트.

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제7항에 있어서,상기 면역 바이오센서 재생용 버퍼는상기 버퍼의 총 함량을 기준으로 2%의 트윈-20(tween-20) 및 0.1M 글리신이 함유된 것을 특징으로 하는.생체 물질 검출용 키트.

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항체를 배향제어 하는 항체 배향제어단계;상기 배향제어된 항체를 Disccinimidly(디숙신이미딜) 기반의 Disccinimidly(디숙신이미딜) 기반의 31μM 농도의 디숙신이미딜 글루타레이트(disuccinimidyl glutarate, DSG), 500μM 농도의 디숙신이미딜 수베레이트 (disuccinimidyl suberate, DSS) 및 125μM 농도의 폴리(에틸렌 글리콜)일화 비스(설포숙신이미딜)수베레이트 (poly(ethylene glycol)ylated bis(sulfosuccinimidyl)suberate, BS(PEG)5) 중 적어도 어느 하나의 가교제로 처리하여 고체 지지체 표면에 공유결합 시키는 화학적 고정단계를 포함하는,면역 바이오센서용 분자 인식층 제조 방법.

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제9항에 있어서,상기 항체 배향제어단계는Z-도메인이 자가 표지된 대장균의 외부 세포막을 고체 지지체 표면에 코팅하는 단계; 및상기 코팅된 고체 지지체 표면에 항체를 처리하는 단계를 포함하는,면역 바이오센서용 분자 인식층 제조 방법.

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분자인식층을 포함하고, 상기 분자인식층은 생체 물질에 특이적으로 결합하는 배향제어된 항체가 공유결합으로 고정되어 있는 것을 특징으로 하는 면역 바이오센서를 이용하여 면역 반응을 수행한 후, 트윈-20(tween-20) 및 0.1M 글리신이 함유된 면역 바이오센서 재생용 버퍼로 상기 면역 바이오센서를 세척하는 단계를 포함하고,상기 배향제어된 항체는 31μM 농도의 디숙신이미딜 글루타레이트(disuccinimidyl glutarate, DSG), 500μM 농도의 디숙신이미딜 수베레이트 (disuccinimidyl suberate, DSS) 및 125μM 농도의 폴리(에틸렌 글리콜)일화 비스(설포숙신이미딜)수베레이트 (poly(ethylene glycol)ylated bis(sulfosuccinimidyl)suberate, BS(PEG)5) 중 적어도 어느 하나에 의해 공유결합으로 고정되는 것을 특징으로 하는,면역 바이오센서의 재생방법.