| 번호 | 청구항 |
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| 1 | 신선 배과피를 용매로 추출하여 얻어진 추출물을 농축한 것으로서, 상기 신선 배과피 15000중량부 당 베툴린 알데하이드 0.00339중량부 이상, 루페올 0.00340중량부 이상, 베타-시토스테롤0.00270중량부 이상, 3-O-시스-카페오일 베툴린산 0.00164중량부 이상, 3-O-트랜스-카페오일 베툴린산 0.530중량부 이상, 카페오일 올레아놀산0.00285중량부이상, 및 베툴린산 0.00184중량부 이상 포함하는 것을 특징으로 하는 트리터페노이드계화합물 및 그 카페오일유도체 함유 배과피농축물. |
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| 4 | 제 1 항에 있어서,상기 용매는 메탄올인 것을 특징으로 하는 트리터페노이드계화합물 및 그 카페오일유도체 함유 배과피농축물. |
| 5 | 배과피농축물을 준비하는 단계;상기 배과피농축물을 1차 용매분획하는 단계; 상기 1차 용매분획의 용매층을 완충액으로 2차 용매분획하는 단계;상기 2차 용매분획의 용매층을 완충액으로 3차 용매분획하는 단계; 상기 3차 용매분획의 수용액층을 4차용매분획하는 단계; 상기 4차 용매분획의 용매층을 1차 정제하는 단계; 상기 1차 정제단계에서 얻어진 특정획분을 대상으로 2차 정제하는 단계; 및상기 2차 정제단계에서 얻어진 특정획분을 대상으로 3차 정제하는 단계;를 포함하는데, 상기 3차 정제단계는 상기 2차 정제단계에서 얻어진 특정획분에 대해 ODS 칼럼 크로마토그래피 또는 분취용 고속액체크로마토그래피가 더 수행되며,상기 ODS 칼럼 크로마토그래피가 수행된 후 얻어진 획분을 대상으로 TLC 분석을 더 수행하여 베툴린 알데하이드(betulin aldehyde), 루페올(lupeol), 베타-시토스테롤(β-sitosterol)가 정제되고, 상기 고속액체크로마토그래피는 옥타데실실란 컬럼이 연결된 시스템에서 유속 9.9 mL/min, 254 nm 파장인 조건으로 tR 19.2 분에 용출된 피크분인 정제된 3-O-시스-카페오일 베툴린산(3-O-cis-caffeoyl betulinic acid)을 얻도록 수행되거나, tR 20.9 분에 용출된 피크분인 정제된 3-O-트랜스-카페오일 베툴린산(3-O-trans-caffeoyl betulinic acid)을 얻도록 수행되거나, tR 24.4 분에 용출된 피크분인 정제된 카페오일 올레아놀산(caffeoyl oleanolic acid)을 얻도록 수행되거나, tR 32.8 분에 용출된 피크분인 정제된 베툴린산(betulinic acid)을 얻도록 수행되는 것을 특징으로 하는 배과피를 이용한 트리터페노이드계화합물 및 그 카페오일유도체 정제방법. |
| 6 | 제 5 항에 있어서,상기 배과피농축물은 배과피와 알코올을 균질하게 섞은 후 흡입 여과하여 얻어진 여과액을 진공농축하여 얻어지는 것을 특징으로 하는 배과피를 이용한 트리터페노이드계화합물 및 그 카페오일유도체 정제방법. |
| 7 | 제 6 항에 있어서,상기 알코올은 메탄올인 것을 특징으로 하는 배과피를 이용한 트리터페노이드계화합물 및 그 카페오일유도체 정제방법. |
| 8 | 제 5 항에 있어서,상기 1차 용매분획단계는 상기 배과피농축물을 산성 완충용액으로 현탁액을 조제하는 단계와 상기 현탁액을 용매로 복수 회 용매분획하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 배과피를 이용한 트리터페노이드계화합물 및 그 카페오일유도체 정제방법. |
| 9 | 제 5 항에 있어서,상기 2차 용매분획단계는 약염기성 완충용액으로 복수 회 용매분획하는 단계가 수행되는 것을 특징으로 하는 배과피를 이용한 트리터페노이드계화합물 및 그 카페오일유도체 정제방법. |
| 10 | 제 5 항에 있어서,상기 3차 용매분획단계는 강염기성 완충용액으로 복수 회 용매분획하는 단계가 수행되는 것을 특징으로 하는 배과피를 이용한 트리터페노이드계화합물 및 그 카페오일유도체 정제방법. |
| 11 | 제 5 항에 있어서,상기 4차 용매분획단계는 상기 3차 용매분획에서 얻어진 수용액의 pH를 약산성으로 조절하는 단계와 상기 pH조절된 수용액층을 복수 회 용매분획하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 배과피를 이용한 트리터페노이드계화합물 및 그 카페오일유도체 정제방법. |
| 12 | 제 5 항에 있어서,상기 1차 정제단계는 충진제로 silica gel을 사용하고, n-hexane, 에틸아세테이트 및 알코올 중 하나 이상이 포함된 혼합용액을 용출용매로 사용하는 컬럼크로마토그래피에 의해 이루어지는 것을 특징으로 하는 배과피를 이용한 트리터페노이드계화합물 및 그 카페오일유도체 정제방법. |
| 13 | 제 5 항에 있어서,상기 2차 정제단계는 충진제로 Sephadex LH-20을 사용하고, 알코올수용액을 용출용매로 사용하는 컬럼크로마토그래피에 의해 이루어지는 것을 특징으로 하는 배과피를 이용한 트리터페노이드계화합물 및 그 카페오일유도체 정제방법. |
| 14 | 제 13 항에 있어서,상기 알코올수용액은 농도가 70 내지 95%인 메탄올수용액인 것을 특징으로 하는 배과피를 이용한 트리터페노이드계화합물 및 그 카페오일유도체 정제방법. |
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| 20 | 제 5 항에 있어서,상기 고속액체크로마토그래피는 일정용매조성용출법 또는 농도가 낮은 용매로 시작하여 일정시간 후에 농도가 높은 용매가 되도록 구배용출법에 의해 용출시킨 후 농도가 높은 용매의 용출을 유지시켜 수행되는 것을 특징으로 하는 배과피를 이용한 트리터페노이드계화합물 및 그 카페오일유도체 정제방법. |
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| 23 | 제 5 항 내지 제 14 항, 제 20 항 중 어느 한 항에 있어서,상기 용매는 에틸아세테이트인 것을 특징으로 하는 배과피를 이용한 트리터페노이드계화합물 및 그 카페오일유도체 정제방법. |
