2'-푸코실락토오스 및 디푸코실락토오스의 생산을 위한 재조합 벡터 및 이를 이용한 생산 방법
RECOMBINANT VECTOR FOR PRODUCTION OF 2'-FUCOSYLLACTOSE AND DIFUCOSYLLACTOSE AND PRODUCTION METHOD USING THE SAME
특허 요약
본 발명은 2'-푸코실락토오스 및 디푸코실락토오스의 생산을 위한 재조합 벡터에 관한 것으로, 더욱 상세하게는, 포스포라이페이스 A 2 의 n 말단에 연결되는 신호 펩티드 PelB 또는 CelA의 절단된 돌연변이 1 의 n 말단에 연결되는 신호 펩티드 DsbA를 코딩하는 유전자를 포함하여, 숙주 세포의 세포 외 2'-푸코실락토오스 및 디푸코실락토오스 생산을 촉진하는 재조합 벡터를 제공한다.
청구항
번호청구항
1

포스포라이페이스 A2(phospholipase A2)를 코딩하는 유전자 서열; 및상기 포스포라이페이스 A2의 n 말단에 연결되는 신호 펩티드를 코딩하는 유전자 서열을 포함하고,상기 신호 펩티드는 PelB 신호 펩티드인, 2'-푸코실락토오스(2'-fucosyllactose) 및 디푸코실락토오스 생산용 재조합 벡터.

2

제1 항에 있어서,CelA의 절단된 돌연변이 1 (truncational mutant 1)를 코딩하는 유전자 서열; 및상기 CelA의 절단된 돌연변이 1 의 n 말단에 연결되는 신호 펩티드 DsbA을 코딩하는 유전자 서열을 더 포함하는, 재조합 벡터.

3

제1 항에 있어서,상기 포스포라이페이스 A2(phospholipase A2)를 코딩하는 유전자 서열은 서열번호 1로 표시되는 것인, 재조합 벡터.

4

제1 항에 있어서,상기 PelB 신호 펩티드를 코딩하는 유전자 서열은 서열번호 2로 표시되는 것인, 재조합 벡터.

5

제2 항에 있어서,상기 CelA의 절단된 돌연변이 1 (truncational mutant 1)를 코딩하는 유전자 서열은 서열번호 5로 표시되는 것인, 재조합 벡터.

6

제2 항에 있어서,상기 DsbA 단백질을 코딩하는 유전자 서열은 서열번호 6으로 표시되는 것인, 재조합 벡터.

7

제1 항 내지 제6 항 중 어느 한 항의 재조합 벡터로 형질 전환된, 숙주세포.

8

제7 항에 있어서,상기 재조합 벡터로 형질 전환된 숙주세포는 대장균인, 숙주세포.

9

제7 항의 숙주세포를 배양하는 단계를 포함하는, 2'-푸코실락토오스(2'-fucosyllactose) 및 디푸코실락토오스의 생산방법.

10

포스포라이페이스 A2 및 포스포라이페이스 A2의 n 말단에 연결되는 PelB 신호 펩티드를 코딩하는 유전자 서열을 포함하는 제1 플라스미드 벡터; 및,CelA의 절단된 돌연변이 1 (truncational mutant 1) 및 CelA의 절단된 돌연변이 1 의 n 말단에 연결되는 DsbA 단백질을 코딩하는 유전자 서열을 포함하는 제2 플라스미드 벡터;를 포함하는, 2'-푸코실락토오스(2'-fucosyllactose) 및 디푸코실락토오스 생산용 유전자 전달 복합체.

11

(a) 서열번호 3의 유전자 서열 및 서열번호 7의 유전자 서열을 포함하는 재조합 벡터를 제조하는 단계;(b) 상기 재조합된 발현 벡터로 숙주세포를 형질전환하는 단계;(c) 상기 형질전환된 숙주세포를 배양하는 단계; 및(d) 상기 (c) 단계의 배양액으로부터 2'-푸코실락토오스(2'-fucosyllactose) 또는 디푸코실락토오스를 분리 및 정제하는 단계를 포함하는, 2'-푸코실락토오스(2'-fucosyllactose) 및 디푸코실락토오스의 생산방법.

12

제11 항에 있어서,상기 숙주세포는 대장균인, 2'-푸코실락토오스(2'-fucosyllactose) 및 디푸코실락토오스의 생산방법.