REC8 유전자의 과발현을 통한 배아줄기세포 분화 효율 증진 기술
Technology for enhancing efficiency of embryonic stem cell differentiation through ectopic expression of REC8 gene
특허 요약
본 발명은 REC8 단백질을 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하는, 배아줄기세포로부터 배엽세포로의 인 비트로(in vitro) 분화 효율 및 속도 증진용 조성물, 이를 유효성분으로 포함하는 키트, 및 배아줄기세포로부터 배엽세포로의 인 비트로(in vitro) 분화 효율 및 속도 증진 방법을 제공한다. 본 발명의 배아줄기세포로부터 배엽세포로의 인 비트로(in vitro) 분화 효율 및 속도 증진용 조성물을 이용하는 경우, 배아줄기세포에서 REC8 유전자는 지속적으로 과발현되고, 줄기세포성 마커인 Oct4 유전자의 단백질 발현은 빠르고 유의하게 감소되며, 계통 마커인 Nestin 및 Gata4 유전자의 RNA 수준은 빠르고 유의하게 증가되므로, 배아줄기세포의 배엽세포로의 분화 효율 및 속도를 증진시킬 수 있어, 배아줄기세포를 배양하고 유지하는 데에 드는 시간을 단축하고 비용을 절감할 수 있으며, 새로운 줄기세포 치료제를 확보하는 데 유용하게 사용될 수 있다.
청구항
번호청구항
10

제7항에 있어서, 상기 벡터 또는 플라스미드는 서열번호 1 또는 서열번호 3으로 표시되는 뉴클레오타이드 서열을 포함하는 것인, 조성물.

1

REC8 단백질을 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드를 포함하는, 배아줄기세포로부터 배엽세포로의 인 비트로(in vitro) 분화 효율 및 속도 증진용 조성물.

2

제1항에 있어서, 상기 REC8 단백질은 서열번호 2로 표시된 아미노산 서열을 포함하는 것인, 조성물.

3

제1항에 있어서, 상기 REC8 단백질을 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 1로 표시된 뉴클레오타이드 서열을 포함하는 것인, 조성물.

4

제1항에 있어서, 레티노산을 추가적으로 포함하는, 조성물.

5

제1항에 있어서, 폴리에틸렌이민 (Polyethylenimine), 폴리에틸렌아민 (polyethyleneamine), 폴리-L-리신 (Poly-L-Lysine), 키토산 (chitosan) 및 DEAE-덱스트란 (DEAE-dextran)으로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 하나를 추가로 포함하는, 조성물.

6

제1항에 있어서, 상기 REC8 단백질을 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드는 네이키드 DNA (naked DNA)이거나, 또는 유전자 운반체에 포함되어 있는 것인, 조성물.

7

제6항에 있어서, 상기 유전자 운반체는 벡터 또는 플라스미드인 것인, 조성물.

8

제7항에 있어서, 상기 벡터 또는 플라스미드는 EF1α 프로모터 (elongation factor 1 alpha promoter)를 추가로 포함하는 것인, 조성물.

9

제7항에 있어서, 상기 벡터 또는 플라스미드는 서열번호 2 또는 서열번호 4로 표시되는 아미노산 서열을 인코딩하는 것인, 조성물.

11

제1항에 있어서, 상기 배엽세포는 외배엽세포, 중배엽세포, 내배엽세포 및 영양외배엽세포로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 하나인 것인, 조성물.

12

제1항에 있어서, 상기 조성물은 i) Oct4 유전자의 발현을 감소시키거나, 또는 ii) Nestin 및 Gata4로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 하나의 계통 마커 유전자의 발현을 증가시키는, 조성물.

13

제1항 내지 제12항 중 어느 한 항의 조성물을 유효성분으로 포함하는, 배아줄기세포로부터 배엽세포로의 인 비트로(in vitro) 분화 효율 및 속도 증진용 키트.

14

배아줄기세포에 REC8 유전자를 과발현시키는 단계를 포함하는 배아줄기세포로부터 배엽세포로의 인 비트로(in vitro) 분화 효율 및 속도 증진 방법.

15

제14항에 있어서, 상기 REC8 유전자를 과발현시키는 단계 이전, 상기 REC8 유전자를 과발현시키는 단계와 동시에, 또는 상기 REC8 유전자를 과발현시키는 단계 이후에, 배아줄기세포에 레티노산을 처리하는 단계를 추가로 포함하는, 방법.

16

제14항에 있어서, 상기 배엽세포는 외배엽세포, 중배엽세포, 내배엽세포 및 영양외배엽세포로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 하나인 것인, 방법.

17

제14항에 있어서, 상기 배아줄기세포에 REC8 유전자를 과발현시키는 단계는 인 비트로에서 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항의 조성물을 배아줄기세포에 처리하는 것인, 방법.