줄기세포 분화 효율 촉진 방법
Method of promoting stem cell differentiation efficiency
특허 요약
본 발명은 줄기세포 분화 효율 촉진 방법에 관한 것으로서, 보다 구체적으로 본 발명은 줄기세포 내에서 EF1α프로모터를 이용하여 Rad51, Rad52, 및 Rad54 유전자를 과발현시켜 줄기세포의 분화속도 및 분화효율을 촉진시키는 것으로 확인되었으며, PEI를 이용하여 상기 유전자를 포함하는 플라스미드의 세포 내의 도입 효율을 높여 본 발명의 분화된 세포를 확보하는 시간과 비용을 절감시킬 수 있는 장점이 있다. 또한, 본 발명의 상기 플라스미드에 의해 과발현되는 유전자는 DNA 수선과 유전자 재조합에 관여하는 것으로 배아줄기세포의 분화유도 과정에서의 유전체 안정성 유지 및 확보가 가능하고, 이에 따라 돌연변이율이 낮은 정상적으로 분화된 세포 개체 수를 효율적으로 높일 수 있는 장점이 있다.
청구항
번호청구항
1

하기 단계를 포함하는 생쥐배아줄기세포 분화 효율 촉진 방법으로서,상기 분화는 내배엽세포, 중배엽세포, 외배엽세포, 및 영양외배엽세포로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 배엽세포로 분화되는 것인, 방법:(가) Rad51 유전자를 포함하는 플라스미드, Rad52 유전자를 포함하는 플라스미드, 및 Rad54 유전자를 포함하는 플라스미드를 제조하는 단계; 및(나) 상기 3개의 플라스미드를 생쥐배아줄기세포에 처리하는 단계.

2

제1항에 있어서, 상기 Rad 51 유전자는 서열번호 1의 염기서열로 이루어지는 것을 특징으로 하는, 생쥐배아줄기세포 분화 효율 촉진 방법.

3

제1항에 있어서, 상기 Rad 52 유전자는 서열번호 2의 염기서열로 이루어지는 것을 특징으로 하는, 생쥐배아줄기세포 분화 효율 촉진 방법.

4

제1항에 있어서, 상기 Rad 54 유전자는 서열번호 3의 염기서열로 이루어지는 것을 특징으로 하는, 생쥐배아줄기세포 분화 효율 촉진 방법.

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제1항에 있어서,상기 3개의 플라스미드는 각각 신장인자1알파(EF1α) 프로모터를 포함하는 것을 특징으로 하는, 생쥐배아줄기세포 분화 효율 촉진 방법.

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제5항에 있어서, 상기 신장인자1알파(EF1α) 프로모터는 서열번호 4의 염기서열로 이루어지는 것을 특징으로 하는, 생쥐배아줄기세포 분화 효율 촉진 방법.

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제1항에 있어서, 상기 생쥐배아줄기세포 분화 효율 촉진 방법은 (가)단계 이후 폴리에틸렌이민(polyethyleneimine), 폴리에틸렌아민(polyethyleneamine), 폴리-L-라이신(PLL), 및 키토산으로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나와 상기 3개의 플라스미드를 결합시키는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는, 생쥐배아줄기세포 분화 효율 촉진 방법.

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