핵수송 신호 펩타이드가 접합된 핵산 전달용 2세대 폴리아미도아민 덴드리머 고분자 유도체
Polyamidoamine generation 2 dendrimers polymer derivative conjugated with nuclear localization signal peptide for nucleic acid delivery
특허 요약
본 발명에서는 인간유두종 바이러스 11형 E2 단백질, SV40 바이러스, NOSTRINβ의 핵 수송 신호 펩타이드(nuclear localization signal peptide)를 최적화한 RKRAR, KKRK 펩티드를 2세대의 PAMAM 덴드리머 (PAMAM G2)에 적용하여 하이브리드 고분자 형태의 비바이러스성 핵산 전달체를 제조하였다. 한편, 핵산 전달체 제조 시 비바이러스성 벡터의 과량의 아민기에 의해 야기되는 세포독성을 낮추기 위해 세포독성을 낮추는 것으로 알려진 히스티딘을 함께 접합하여 최종적으로 RKRARH, KKRKH 펩티드를 PAMAM G2에 적용함으로써, PAMAM G2 고분자나 기존의 PAMAM G2 고분자-단백질 접합체와 비교하여 현저하게 증가된 유전자 전달 효율을 가지면서도 PAMAM G2 고분자의 세포 안정성을 그대로 유지한 핵산 전달체의 제조가 가능하였다.
청구항
| 번호 | 청구항 |
|---|---|
| 6 | 제1항에 있어서, 상기 복합체는 300nm 미만의 크기를 갖는 것을 특징으로 하는 세포 내 핵산 전달용 복합체. |
| 7 | 제1항의 복합체를 이용하여 핵산을 세포 내로 전달하는 방법. |
| 8 | 제7항에 있어서, 핵산이 전달되는 세포 내 장소는 세포질(cytoplasm) 및 핵(nucleus)인 것을 특징으로 하는 방법. |
| 1 | i) 서열번호 3의 RKRARH 펩타이드 또는 서열번호 4의 KKRKH 펩타이드; 및, ii) 1차 아민 말단기를 갖는 덴드라이트형(dendrite)의 덴드리머(dendrimer)의 2세대(generation) 폴리아미도아민(PAMAM);으로 이루어진 핵산 전달용 PAMAM 유도체;를 포함하는 복합체로서,상기 복합체는,상기 PAMAM 유도체, 및, 핵산이 결합되어 형성된 세포 내 핵산 전달용 복합체로서,상기 복합체가 20~35 mV의 제타 포텐셜 값을 갖는 것을 특징으로 하는 세포 내 핵산 전달용 복합체. |
| 2 | 제1항에 있어서, 상기 핵산은 DNA, RNA 또는 pDNA인 것을 특징으로 하는 세포 내 핵산 전달용 복합체. |
| 3 | 삭제 |
| 4 | 삭제 |
| 5 | 제1항에 있어서, 상기 복합체는 PAMAM 유도체의 질소/pDNA의 인산 비율(N/P 비율)이 1:1 내지 16:1인 것을 특징으로 하는 세포 내 핵산 전달용 복합체. |
