휘발성 유기 화합물의 인체 노출 여부 확인용 특이적 바이오마커 및 이를 이용한 휘발성 유기 화합물의 노출 여부 확인 방법
Specific biomarker for identification of exposure to volatile organic compounds and the method of identification using thereof
특허 요약
본 발명은 휘발성 유기 화합물(Volatile organic compounds, VOCs)의 인체 노출 여부 확인용 특이적 바이오마커 및 이를 이용한 휘발성 유기 화합물의 노출 여부 확인 방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 휘발성 유기 화합물의 대표적인 화학물질인 톨루엔(Toluene) 또는 자일렌(Xylene)에 대해 단독 또는 복합적으로 노출된 여부에 따라 특이적으로 유전자 발현이 증가 또는 감소하는 바이오마커 및 이를 이용한 톨루엔 또는 자일렌에 대한 단독 노출 또는 복합 노출 여부를 확인하는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 휘발성 유기 화합물의 인체 노출 여부 확인용 특이적 바이오마커 및 이를 이용한 휘발성 유기 화합물의 노출 여부 확인 방법은, DNA 마이크로어레이 칩을 통하여 선별된 반응 유전자들을 바이오마커로 이용하여 휘발성 유기 화합물 중에 특이적으로 톨루엔 또는 자일렌의 단독 노출 또는 복합 노출 여부를 조기에 모니터링할 수 있고, 인체 위해성을 판정하는데 유용하게 사용될 수 있다. 뿐만 아니라, 톨루엔 및/또는 자일렌에 의해 야기되는 독성 작용 기작을 규명하는 도구로도 유용하게 이용할 수 있다.
청구항
번호청구항
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하기의 군으로부터 하나 이상 선택되는 유전자 서열의 전체 또는 일부를 포함하는 올리고뉴클레오티드 또는 그의 상보적인 올리고뉴클레오티드가 집적된 톨루엔(tolune) 및 자일렌(xylene) 복합 노출 여부 확인용 DNA 마이크로어레이 칩:유전자 등록번호(Genbank): BC020881(TLN1, talin 1);유전자 등록번호(Genbank): NM_001206541(CAPZB, capping protein (actin filament) muscle Z-line, beta);유전자 등록번호(Genbank): NM_000603(NOS3, nitric oxide synthase 3);유전자 등록번호(Genbank): NM_006775(QKI, K Homology(KH) domain containing, RNA binding); 및유전자 등록번호(Genbank): NM_003286(TOP1, topoisomerase (DNA) I).

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  1. 톨루엔 및 자일렌 복합 노출 가능성이 있는 개체로부터 수득된 실험군 혈액 시료 및, 톨루엔 및 자일렌이 노출되지 않은 개체로부터 수득된 대조군 혈액으로부터 RNA를 분리하는 단계;2) 단계 1)의 실험군과 대조군의 RNA를 증폭하여 실험군과 대조군을 형광물질로 표지하는 단계;3) 단계 2)의 형광물질로 표지된 aRNA(amplified RNA)를 제13항의 DNA 마이크로어레이 칩과 혼성화시키는 단계;4) 단계 3)의 반응한 DNA 마이크로어레이 칩을 분석하는 단계; 및5) 단계 4)의 분석한 데이터에서 제13항의 DNA 마이크로어레이 칩에 집적된 유전자의 발현 정도를 대조군과 비교하여 확인하는 단계를 포함하는, 톨루엔 및 자일렌 복합 노출 여부를 확인하기 위한 정보를 제공하는 방법.
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제14항에 있어서, 단계 3)의 형광물질은 Cy3, Cy5, FITC(poly L-lysine-fluorescein isothiocyanate), RITC(rhodamine-B-isothiocyanate) 및 로다민(rhodamine)으로 이루어진 군으로부터 선택하여 사용하는 것을 특징으로 하는, 톨루엔 및 자일렌 복합 노출 여부를 확인하기 위한 정보를 제공하는 방법.

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제13항의 DNA 마이크로어레이 칩을 포함하는 것을 특징으로 하는 톨루엔 및 자일렌 복합 노출 여부 확인용 키트.

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제16항에 있어서, 음성 대조군 및 양성 대조군의 인간 혈액시료를 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 톨루엔 및 자일렌 복합 노출 여부 확인용 키트.

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제13항에 기재된 유전자 군으로부터 하나 이상 선택되는 유전자를 증폭시키는 프라이머 세트를 포함하는 톨루엔 및 자일렌 복합 노출 여부 확인용 키트.