면역관문단백질을 과발현하는 생체물질의 고감도 선별, 검출 및 분리를 위한 초분기 고분자-펩타이드 화합물이 수식된 미체유체시스템
Microfluidic system functionalized with hyperbranched polymer-peptide conjugates for the high-sensitive isolation, detection, and separation of biomolecules overexpressing immune checkpoint proteins
특허 요약
본 발명은 면역관문단백질을 과발현하는 생체물질의 고감도 선별, 검출 및 분리를 위한 초분기 고분자-펩타이드 화합물이 수식된 미세유체시스템에 관한 것으로, 보다 구체적으로 초분기 고분자, 링커 및 면역관문단백질의 타깃 펩타이드를 포함하는 복합체와 상기 복합체를 포함하는 생체물질 검출시스템을 제공하고, 상기 복합체는 표적 단백질에 대해 높은 결합 활성도를 가지고, 기존의 항체 대비 우수한 민감도 및 특이도를 가짐을 확인함으로써 면역항암치료 효과의 예측 및 고기능성 줄기세포치료제 선별에 유용하게 사용될 수 있다. 본 발명의 과제정보는 다음과 같다. 과제번호: 2023-012-006 부처명: (재)강원테크노파크 과제관리(전문)기관명: (재)강원테크노파크 연구사업명: 일자리 창출형 첨단산업 육성사업 연구과제명: 맞춤 진단 치료용 정밀유전자분석(NGS)을 위한 혈중암세포 및 세포유리핵산 선별 분리 전처리 시스템 개발 과제수행기관명: 인하대학교 산학협력단(공동기관) 연구기간: 2023.04.01-2024.12.31
청구항
번호청구항
2

제1항에 있어서, 상기 초분기 고분자는 덴드리머 또는 덴드론을 포함하는 것을 특징으로 하는, 미세유체시스템.

1

초분기 고분자, 링커 및 면역관문단백질의 타깃 펩타이드를 포함하는 복합체가 수식된, 면역관문단백질 과발현 생체물질의 선별, 검출 및 분리용 미세유체시스템.

3

제1항에 있어서,상기 초분기 고분자는 폴리에스터(polyesters), 폴리에스터아미드(polyesteramides), 폴리에터(polyethers), 폴리아미드(polyamides), 폴리에틸렌이민(polyethyleneimines), 폴리글리세롤(polyglycerols), 폴리글리콜라이드(polyglycolides), 폴리락타이드(polylactides), 폴리락타이드-코-글리콜라이드(polylactide-co-glycolides), 폴리타트레이트(polytartrates) 또는 폴리사카라이드(polysaccharides)를 포함하는 것을 특징으로 하는, 미세유체시스템.

4

제2항에 있어서,상기 덴드리머는 폴리(아미도-아민) (poly(amido-amine); PAMAM), 폴리(에틸렌이민) (poly(ethyleneimine); PEI), 폴리프로필렌이민 (polypropyleneimine; PPI), 디아미노부탄 아민 폴리프로필렌이민 테트라민 (diaminobutane amine polypropylenimine tetramine; DAB-Am-4), 폴리프로필아민 (polypropylamine: POPAM), 폴리리신 (polylysine), 폴리에스터 (polyester), 입티센 (iptycene), 지방족 폴리 (에터) (aliphatic poly(ether)) 또는 방향족 폴리에터 (aromatic polyether) 덴드리머를 포함하는 것을 특징으로 하는, 미세유체시스템.

5

제1항에 있어서,상기 링커는 폴리에틸렌글리콜 (Polyethylene Glycol; PEG), 폴리프로필렌글리콜 (Polypropylene Glycol; PPG), 에틸렌 글리콜-프로필렌 글리콜 공중합체 (Ethylene Glycol-Propylene Glycol Copolymer), 폴리옥시에틸화폴리올 (Polyoxyethylene-Polyol), 폴리비닐알콜 (Polyvinyl Alcohol; PVA) 또는 폴리비닐에틸에테르 (Polyvinyl Ether; PVE)를 포함하는 것을 특징으로 하는, 미세유체시스템.

6

제1항에 있어서,상기 링커는 3,3'-디티오비스(설포숙시니미딜프로피오네이트) (3,3'-dithiobis(sulfosuccinimidyl propionate); DTSSP), 또는 비스(설포숙시니미딜) 수베레이트(bis(sulfosuccinimidyl) suberate)를 포함하는 것을 특징으로 하는, 미세유체시스템.

7

제1항에 있어서,상기 면역관문단백질의 타깃 펩타이드는 CD25, PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA-4, 면역글로불린 수용체 (KIR), LAG-3, TIM-3, 4-1BB, 4-1BBL, GITR, CD40, CD40L, OX40, OX40L, CXCR2, B7-H3, B7-H4, BTLA, HVEM, CD28, A2aR, CD27, CD70, TCR ICOS, CD80, CD86, ICOS-L, CD70, Gal-9, VISTA, CD-137, CD155, CD266, PVR, PVR-2, CD47, CD160, NT5E, CD96, 또는 TNFRSF18에 특이적으로 결합하는 것을 특징으로 하는, 미세유체시스템.

8

제1항의 미세유체시스템을 포함하는, 액체생검을 통해 추출한 바이오마커 검출시스템.

9

제8항에 있어서,상기 바이오마커는 혈중암세포(circulating tumor cells; CTCs)의 면역관문단백질 또는 엑소좀(exosome)의 면역관문단백질을 포함하는 것을 특징으로 하는, 검출시스템.

10

제1항의 미세유체시스템을 포함하는, 면역관문단백질을 과발현하는 줄기세포의 선별 및 분리시스템.

11

i) 초분기 고분자를 글라스(glass)에 부착시키는 단계; 및ii) 링커 및 면역관문단백질의 타깃 펩타이드를 순차적으로 부착시키는 단계를 포함하는, 복합체의 제조방법.

12

제11항에 있어서,상기 글라스는 에폭시(epoxy) 코팅된 글라스, 폴리우레탄(polyurethane) 코팅된 글라스, 에틸 실리콘(ethyl silicone) 코팅된 글라스, 아크릴 폴리머(acryl polymer) 코팅된 글라스 또는 플루오로폴리머(fluoropolymer) 코팅된 글라스를 포함하는 것을 특징으로 하는, 복합체의 제조방법.

도면대표도면