| 번호 | 청구항 |
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| 18 | 적어도 2종 이상의 검출대상 miRNA를 검출 칩(chip)에 고정하는 단계;상기 적어도 2종 이상의 검출대상 miRNA 중 1종을 검출하기 위한, 제1항, 제3항 내지 제7항, 및 제9항 내지 제11항 중 어느 한 항의 miRNA 검출용 조성물을 상기 검출 칩과 접촉시켜 발생하는 FRET (Fluorescence Resonance Energy Transfer) 신호를 측정하는 단계;상기 검출 칩을 씻어내는 단계; 및상기 적어도 2종 이상의 검출대상 miRNA 중 또 다른 1종을 검출하기 위한, 제1항, 제3항 내지 제7항, 및 제9항 내지 제11항 중 어느 한 항의 miRNA 검출용 조성물을 상기 검출 칩과 접촉시켜 발생하는 FRET (Fluorescence Resonance Energy Transfer) 신호를 측정하는 단계를 포함하는, miRNA의 검출 방법. |
| 1 | 검출대상 miRNA의 제 1 표적 핵산부위와 상보적인 핵산 서열을 포함하고 주개 (donor) 형광물질로 표지된 주개 핵산분자, 및상기 검출대상 miRNA의 제 2 표적 핵산부위와 상보적인 핵산 서열을 포함하고 받개(acceptor) 형광물질로 표지된 받개 핵산분자를 포함하며,상기 제 1 표적 핵산부위 및 상기 제 2 표적 핵산부위는 상기 검출대상 miRNA의 서로 다른 부위이고, 상기 제 1 표적 핵산부위 및 상기 제 2 표적 핵산부위의 간격은 3개 내지 5개인 뉴클레오타이드인,miRNA 검출용 조성물로서,상기 조성물은 상기 miRNA의 단일 염기 다형성 (Single Nucleotide Polymorphism, SNP)을 검출 가능한 것인, 조성물. |
| 2 | 삭제 |
| 3 | 제1항에 있어서, 서로 다른 2종 이상의 받개 핵산분자를 포함하는, 조성물. |
| 4 | 제3항에 있어서, 상기 서로 다른 2종 이상의 받개 핵산분자는, 서로 다른 받개 형광물질로 표지된 것인, 조성물. |
| 5 | 제1항에 있어서, 상기 받개 형광물질의 흡수 에너지 준위는, 상기 주개 형광물질의 방출 빛띠와 중첩되는, 조성물. |
| 6 | 제1항에 있어서, 상기 주개 형광물질 및 상기 받개 형광물질은 Alexa Fluor 405, Alexa Fluor 488, Cy3, Cy3.5, Cy5, Cy5.5-Allophycocyanin, Cy7, 및 Alexa Fluor 790로 이루어지는 군에서 선택된 1종 이상이며,상기 받개 형광물질의 흡수 에너지 준위는, 상기 주개 형광물질의 방출 빛띠와 중첩되는, 조성물. |
| 7 | 제1항에 있어서, 상기 검출대상 miRNA는 말단에 폴리뉴클레오타이드 꼬리를 가져 검출 칩(chip)에 고정되는 것인, 조성물. |
| 8 | 삭제 |
| 9 | 제1항에 있어서, 상기 주개 핵산분자 및 상기 받개 핵산분자는, 5 내지 15개의 뉴클레오타이드로 이루어지는 것인, 조성물. |
| 10 | 제1항에 있어서, 상기 제 1 표적 핵산부위 및 상기 제 2 표적 핵산부위는, 상기 검출 대상 miRNA 내의 연속하는 5 내지 15개의 뉴클레오타이드를 포함하는 것인, 조성물. |
| 11 | 제3항에 있어서, 상기 받개 핵산분자를 서로 다른 2종 포함하고, 상기 제 1 표적 핵산부위 및 상기 제 2 표적 핵산부위는, 상기 검출 대상 miRNA 내의 연속하는 6 내지 8개의 뉴클레오타이드를 포함하는 것인, 조성물 |
| 12 | 제1항, 제3항 내지 제7항, 및 제9항 내지 제11항 중 어느 한 항의 miRNA 검출용 조성물을 생물학적 시료와 접촉시켜 발생하는 FRET (Fluorescence Resonance Energy Transfer) 신호를 측정하는 단계를 포함하는, miRNA의 검출 방법. |
| 13 | 삭제 |
| 14 | 제12항에 있어서, 상기 검출 대상 miRNA는 말단에 폴리뉴클레오타이드 꼬리를 가져 검출 칩(chip)에 고정되는 것인, 방법. |
| 15 | 제12항에 있어서, 상기 생물학적 시료는, 상기 검출 대상 miRNA와 염기 상동성이 90% 이상인 miRNA를 포함하는 것인, 방법. |
| 16 | 제12항에 있어서, 상기 생물학적 시료는, 검출 대상 miRNA를 포함하는, 분리된 세포, 세포 용해물, 세포 추출물, 세포 파쇄물, 분리된 DNA 또는 분리된 RNA인, 방법. |
| 17 | 제12항에 있어서, FRET 신호 측정결과 유효 시그널 이상의 sm-FRET 신호가 최소 검출 횟수 이상 검출될 경우, 상기 검출대상 miRNA인 것으로 판단하는 단계를 추가로 포함하며,상기 유효 시그널 이상의 sm-FRET 신호는, 상기 검출 대상 miRNA가 아닌 임의의 miRNA에 대해, 상기 검출 대상 miRNA의 표적 핵산 부위와 상보적인 핵산 서열을 가지는 임의의 주개 핵산분자 및 받개 핵산분자가 결합되었을 때 발생하는 sm-FRET 신호의 시그널 길이 중 최대값을 기준으로, 상기 최대값 이상의 길이를 가지는 sm-FRET 신호이며,상기 최소 검출 횟수는, 상기 검출 대상 miRNA가 아닌 임의의 miRNA에 대해, 상기 검출 대상 miRNA의 표적 핵산 부위와 상보적인 핵산 서열을 가지는 임의의 주개 핵산분자 및 받개 핵산분자가 결합되었을 때 발생하는 상기 유효 시그널 이상의 sm-FRET 신호의 최대 출현 횟수인, 방법. |
| 19 | 제1항, 제3항 내지 제7항, 및 제9항 내지 제11항 중 어느 한 항의 miRNA 검출용 조성물을 생물학적 시료와 접촉시켜 발생하는 FRET (Fluorescence Resonance Energy Transfer) 신호를 측정하는 단계를 포함하는, miRNA의 단일 염기 다형성(Single Nucleotide polymorphism, SNP) 검출 방법. |