향상된 ＦＩＳＨ 수행을 위한 신규한 45Ｓ ｒＤＮＡ용 핵산 프로브 및 이를 이용한 신규한 ＦＩＳＨ법
Novel 45S rDNA Nucleic Acid Probes for Advansed FISH and Novel FISH method Using the Same
특허 요약
본 발명은 FISH 수행을 위한 신규한 45S rDNA 검출용 핵산 프로브 및 이를 이용한 향상된 FISH 수행법에 대한 것으로, 보다 상세하게는 혼성화 효율이 우수하여 재현성이 높고 항내성이 있으며 비용적, 시간적, 인적 효율성을 가져오는 45S rDNA 검출용 핵산 프로브 및 이의 조합체와 이를 이용한 45S rDNA 검출을 위한 FISH 방법에 대한 것이다. 본 발명의 핵산 프로브는 식물계에서 동물계에 이르기까지 다양한 종의 45S rDNA loci를 검출할 수 있는 보편적 프로브로서, 다른 프로브들과 동시에 FISH를 수행하여서도 minor loci에 대해서도 선명한 시그널을 제공하고 노이즈 없는 백그라운드 결과를 제공한다. 아울러, 본 발명의 FISH 방법은 기존의 장시간 소요되는 FISH 혼성화 시간을 실온에서 5분까지 단축하며 전문 훈련된 연구인력의 지속적 투입을 요하지 않는바 광범위한 유전체 분석에 또한 유용하다.
청구항
번호청구항
1

서열번호 1 내지 12로 표시되는 핵산서열을 포함하고, 상기 서열번호 1 내지 12로 표시되는 핵산서열은 속씨식물, 겉씨식물 또는 동물의 45S rDNA에 특이적으로 결합할 수 있는,속씨식물, 겉씨식물 또는 동물의 45S rDNA검출용 핵산 프로브 조합체.

2

제1항에 있어서, 서열번호 1 내지 8로 표시되는 핵산서열로 구성된 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 핵산서열은 45S rDNA 내 18S rDNA 영역을 검출하는 것을 특징으로 하는 핵산 프로브 조합체.

3

제1항에 있어서, 서열번호 9 내지 12로 표시되는 핵산서열로 구성된 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 핵산서열은 45S rDNA 내 5.8S rDNA 영역을 검출하는 것을 특징으로 하는 핵산 프로브 조합체.

4

제1항에 있어서, 형광물질로 표지되어 있는 것을 특징으로 하는 핵산 프로 브 조합체.

5

제4항에 있어서, 상기 핵산 프로브는 FISH(Fluorescene in situ hybridization)를 수행하기 위한 것임을 특징으로 하는 핵산 프로브 조합체.

6

제1항 내지 제5항 중 어느 한 항의 핵산 프로브 조합체를 함유하는 속씨식물, 겉씨식물 또는 동물의 45S rDNA 검출용 조성물.

7

제1항 내지 제5항 중 어느 한 항의 핵산 프로브 조합체를 함유하는 속씨식물, 겉씨식물 또는 동물의 45S rDNA 검출용 키트.

8

제7항에 있어서, 상기 45S rDNA 검출용 키트는 FISH를 수행하기 위한 것임을 특징으로 하는 키트.

9

다음의 단계를 포함하는 속씨식물, 겉씨식물 또는 동물의 45S rDNA 검출 방법:(a) 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항의 핵산 프로브 조합체를 45S rDNA를 포함하는 시료와 혼합하여 혼성화시키는 단계; 및(b) 상기 핵산 프로브의 혼성화 여부를 검출하는 단계.

10

다음의 단계를 포함하는 속씨식물, 겉씨식물 또는 동물의 45S rDNA 검출을 위한 FISH 방법:(a) 제4항 또는 제5항의 핵산 프로브 조합체를 45S rDNA를 포함하는 시료와 혼합하여 혼성화시키는 단계; 및(b) 상기 핵산 프로브의 형광물질을 확인하여 45S rDNA의 위치를 검출하는 단계.

11

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