Wnt 활성 측정용 재조합 벡터가 형질전환 된 세포주 및 이를 이용한 고효율의 스크리닝 방법
Cell line which is transfected with Wnt active measurement vector and High-Throughput Screening method of selective ligands by using it
특허 요약
본 발명은 Wnt 활성 측정용 재조합 벡터가 형질전환 된 세포주 및 이를 이용한 고효율의 스크리닝 방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 Wnt 활성 측정용 재조합 벡터, 상기 벡터로 형질전환 된 세포주 및 이를 이용한 Wnt 단백질 활성과 관련된 물질의 검색방법으로, 본 발명의 재조합 벡터 및 이를 포함하는 형질전환 세포주는 Wnt 단백질의 활성과 관련된 물질을 효율적으로 탐색함으로써 골다공증 치료제, 골다공증 치료 보조제 및 골 대사질환의 치료제 개발에 효과적으로 사용될 수 있을 것이다.
청구항
번호청구항
1

(1) Tcf 결합부분(T cell factor binding site)을 포함하는, Wnt 활성 측정용 재조합 벡터로 형질전환 세포주를 웰 플레이트에서 배양하는 단계;(2) 상기 플레이트의 각 웰에 검색하고자 하는 시료를 첨가하고 배양하는 단계; 및(3) 이로부터 융합단백질 형태로 발현된 루시페라아제 활성을 측정하는 단계;를 포함하는, Wnt 단백질 활성에 관여하는 물질의 검색방법.

2

제 1항에 있어서,상기 벡터는 5’에서 3’방향으로, Tcf 결합부분, TA 바이럴 프로모터(TA viral promoter), 루시페라아제(luciferase) 리포터 유전자, 네오마이신(neomycin) 내성 유전자를 포함하는 것을 특징으로 하는 Wnt 단백질 활성에 관여하는 물질의 검색방법.

3

제 1항 또는 제 2항에 있어서,상기 벡터는 Tcf 결합부분을 8개의 카피 수를 가지는 것을 특징으로 하는 Wnt 단백질 활성에 관여하는 물질의 검색방법.

4

삭제

5

제 1항에 있어서,상기 세포는 Chinese Hamster Ovary(CHO) 세포인 것을 특징으로 하는 Wnt 단백질 활성에 관여하는 물질의 검색방법.

6

삭제

7

제 1항에 있어서,상기 (2) 단계에서 형질전환 세포주의 배양액에 검색하고자 하는 시료를 처리함으로써 Wnt 단백질의 양을 증가시키는 시료를 검색하는 것을 특징으로 하는 Wnt 단백질 활성에 관여하는 물질의 검색방법.

8

제 7항에 있어서,상기 물질은 하기 화합물 1 또는 화합물 2인 것을 특징으로 하는 Wnt 단백질 활성에 관여하는 물질의 검색방법.

9

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