세포질 칼슘과 리소좀 내 산성도를 동시에 검출할 수 있는 이광자 형광 프로브
Two-photon fluorescent probes for simultaneously detecting cytosolic calcium ions and lysosomal protons
특허 요약
본 발명은 세포내 소기관 특이적 이광자 형광 프로브에 관한 것으로, 보다 상세하게는 세포 내 소기관 중에서도 세포질을 타겟하여 형광신호를 통해 칼슘 이온(Ca 2+ )을 선택적으로 검출할 수 있는 청색 발광 이광자 프로브와 리소좀을 타겟하여 형광신호를 통해 수소 이온(H + )을 선택적으로 검출할 수 있는 녹색 발광 이광자 프로브, 이들 이광자 프로브의 제조방법 및 상기 두 이광자 프로브를 이용하여 세포질 내 칼슘 이온 및 리소좀 내 수소 이온을 각각 또는 동시에 이미징하는 방법에 관한 것이다.
청구항
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하기 화학식 1로 표시되는 화합물 및 화학식 2로 표시되는 화합물을 포함하는, 칼슘 이온 및 수소 이온 동시 검출용 이광자 형광 프로브 조성물:[화학식 1][화학식 2]상기 화학식 1에서 Y는 K, CH3 또는 CH2OC(O)CH3 이고,상기 화학식 2에서 W는 NH(CH2)2N(CH3)2 또는 OCH3 이다.

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제12항에 있어서,상기 화학식 1에서 Y는 K 또는 CH2OC(O)CH3 이고,상기 화학식 2에서 W는 NH(CH2)2N(CH3)2 인 것인, 칼슘 이온 및 수소 이온 동시 검출용 이광자 형광 프로브 조성물.

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제12항에 있어서,상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 세포질을 타겟하여 세포질 내 칼슘 이온을 선택적으로 이미징하는 것이고, 화학식 2로 표시되는 화합물은 리소좀을 타겟하여 리소좀 내 수소 이온을 선택적으로 이미징하는 것인, 칼슘 이온 및 수소 이온 동시 검출용 이광자 형광 프로브 조성물.

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하기 화학식 1로 표시되는 이광자 형광 프로브 화합물 및 화학식 2로 표시되는 이광자 형광 프로브 화합물을 생체로부터 분리된 세포 또는 조직에 주입하는 단계;상기 생체로부터 분리된 세포 또는 조직에 여기원(excitation source)을 조사하는 단계; 및이광자 현미경으로 상기 두 이광자 형광 프로브 화합물로부터 발생하는 형광을 관측하는 단계;를 포함하는, 칼슘 이온 및 수소 이온을 동시에 이미징하는 방법:[화학식 1][화학식 2]상기 화학식 1에서 Y는 K, CH3 또는 CH2OC(O)CH3 이고,상기 화학식 2에서 W는 NH(CH2)2N(CH3)2 또는 OCH3 이다.

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제15항에 있어서,상기 화학식 1의 화합물은 세포질을 타겟하여 세포질 내 칼슘 이온을 선택적으로 이미징하는 것이고, 화학식 2의 화합물은 리소좀을 타겟하여 리소좀 내 수소 이온을 선택적으로 이미징하는 것인, 칼슘 이온 및 수소 이온을 동시에 이미징하는 방법.

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제15항에 있어서,상기 이미징은 세포질의 칼슘 이온 분포 및 리소좀의 산성도(pH)의 변화를 동시에 이미징하는 것인, 칼슘 이온 및 수소 이온을 동시에 이미징하는 방법.