세포막에서 칼슘을 표지할 수 있는 이광자 청색 표지자
Blue-emitting two-photon probes for calcium ions in plasma membrane
특허 요약
본 발명은 세포내 소기관 특이적 이광자 형광 프로브에 관한 것으로, 보다 상세하게는 세포 내 소기관 중에서도 세포막(원형질막)을 타겟하여 형광신호를 통해 칼슘 이온(Ca 2+ )을 선택적으로 검출할 수 있는 청색 발광 이광자 프로브, 이의 제조방법과 상기 이광자 프로브를 이용하여 세포막에 위치한 칼슘 이온을 이미징하는 방법 및 칼슘 이온의 분포 또는 농도의 변화를 모니터링하는 방법에 관한 것이다.
청구항
번호청구항
1

하기 화학식 1로 표시되는 이광자 형광 프로브 화합물:[화학식 1]상기 화학식 1에서 Y는 K, CH3 또는 CH2OC(O)CH3 이고,X는 H, OH 또는 O(CH2)5CH3 이다.

2

제1항에 있어서, 상기 이광자 형광 프로브 화합물은 칼슘 이온(Ca2+)에 특이적으로 결합하는 것인, 이광자 형광 프로브 화합물.

3

제1항에 있어서, 상기 이광자 형광 프로브 화합물은 세포막(plasma membrane) 내 칼슘 이온을 선택적으로 이미징하기 위한 것인, 이광자 형광 프로브 화합물.

4

제1항에 있어서, 상기 이광자 형광 프로브 화합물은 칼슘 이온에 대한 형광 반응으로 청색 형광을 방출하는 것인, 이광자 형광 프로브 화합물.

5

제1항에 따른 이광자 형광 프로브 화합물을 포함하는 생체 세포 또는 조직의 칼슘 이온 검출용 이광자 형광 프로브 조성물.

6

제5항에 있어서, 상기 조성물은 세포막 내 칼슘 이온을 선택적으로 이미징하는 것인, 칼슘 이온 검출용 이광자 형광 프로브 조성물.

7

제6항에 있어서, 상기 이미징의 깊이는 90-140㎛인 것인, 칼슘 이온 검출용 이광자 형광 프로브 조성물.

8

제1항에 따른 이광자 형광 프로브 화합물을 생체로부터 분리된 세포 또는 조직에 주입하는 단계;상기 생체로부터 분리된 세포 또는 조직에 여기원(excitation source)을 조사하는 단계; 및이광자 현미경으로 상기 이광자 형광 프로브 화합물로부터 발생하는 형광을 관측하는 단계;를 포함하는, 칼슘 이온을 이미징하는 방법.

9

제8항에 있어서,세포막을 타겟하여 세포막 내 칼슘 이온을 선택적으로 이미징하는 것인, 칼슘 이온을 이미징하는 방법.

10

하기 화학식 2로 표시되는 화합물과 하기 화학식 3으로 표시되는 화합물을 반응시키는 단계를 포함하는, 하기 화학식 1로 표시되는 이광자 형광 프로브 화합물의 제조방법:[화학식 1][화학식 2][화학식 3]상기 화학식 1, 2 또는 3에서 각각 Y는 K, CH3 또는 CH2OC(O)CH3 이고, X는 H, OH 또는 O(CH2)5CH3 이고,R1은 CO2C(CH3)3 또는 CO2H 이고,L은 H 또는 NH2 이다.

11

제10항에 있어서, 상기 화학식 1에서 Y는 K 또는 CH3 이고, X는 O(CH2)5CH3 또는 H 이고, 화학식 2에서 X는 H 또는 OH 이고, R1은 CO2H 이고, 화학식 3에서 Y는 CH3 이고, L은 NH2 인 것인, 화학식 1로 표시되는 이광자 형광 프로브 화합물의 제조방법.

12

제10항에 있어서, 상기 화학식 2에서 X가 OH인 경우, 상기 OH를 O(CH2)5CH3 로 치환하는 단계를 더 포함하는 것인, 화학식 1로 표시되는 이광자 형광 프로브 화합물의 제조방법.

13

제10항에 있어서, 상기 화학식 3에서 Y가 CH3 인 경우, 상기 CH3 를 K 또는 CH2OC(O)CH3 로 치환하는 단계를 더 포함하는 것인, 화학식 1로 표시되는 이광자 형광 프로브 화합물의 제조방법.