신속한 핵산 검출을 위한 가닥 치환 기반의 정량중합효소 연쇄반응방법
Method of strand displacement-based fast quantitative polymerase chain reaction for rapid nucleic acid detection
특허 요약
본 발명은 신속한 핵산 검출을 위한 가닥 치환 기반의 정량중합효소 연쇄반응방법에 관한 것으로, 구체적으로 본 발명은 SD 중합효소(SD polymerase)를 이용하며 변성 단계 및 결합과 연장의 동시반응 단계를 1주기로 하여 50회 반복수행하는 단계를 포함하는 신속한 가닥 치환 기반의 정량중합효소 연쇄반응방법; 및 증폭 또는 검출대상의 핵산에 특이적으로 결합할 수 있으며 용융온도(melting temperature)가 65~72℃가 되도록 디자인된 프라이머 및 SD 중합효소(SD polymerase)를 이용하여, 변성 단계 및 결합과 연장의 동시반응 단계를 1주기로 하여 50회 반복수행하는 단계를 포함하는 가닥 치환 기반의 정량중합효소 연쇄반응방법을 이용한 목적 핵산의 신속 검출방법에 관한 것이다.
청구항
번호청구항
7

제1항에 있어서,상기 방법은 10 카피수 이하의 핵산을 검출할 수 있는 것을 특징으로 하는, 신속한 가닥 치환 기반의 정량중합효소 연쇄반응방법.

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SD 중합효소(SD polymerase)를 이용하며,변성 단계 및 결합과 연장의 동시반응 단계를 1주기로 하여 반복수행하는 단계를 포함하는,신속한 가닥 치환 기반의 정량중합효소 연쇄반응방법.

2

제1항에 있어서,상기 변성 단계 전에, 92℃에서 2분간 예비변성을 수행하는 것을 특징으로 하는, 신속한 가닥 치환 기반의 정량중합효소 연쇄반응방법.

3

제1항에 있어서,상기 변성 단계는 87℃에서 1초간 수행하는 것을 특징으로 하는, 신속한 가닥 치환 기반의 정량중합효소 연쇄반응방법.

4

제1항에 있어서,상기 결합과 연장의 동시반응 단계는 72℃에서 1초간 수행하는 것을 특징으로 하는, 신속한 가닥 치환 기반의 정량중합효소 연쇄반응방법.

5

제1항에 있어서,상기 방법은 증폭 또는 검출대상의 핵산에 특이적으로 결합할 수 있으며, 용융온도(melting temperature)가 65~72℃가 되도록 디자인된 프라이머를 이용하여 수행하는 것을 특징으로 하는, 신속한 가닥 치환 기반의 정량중합효소 연쇄반응방법.

6

제5항에 있어서,상기 프라이머는 용융온도(melting temperature)가 70℃가 되도록 디자인된 것을 특징으로 하는, 신속한 가닥 치환 기반의 정량중합효소 연쇄반응방법.

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증폭 또는 검출대상의 핵산에 특이적으로 결합할 수 있으며 용융온도(melting temperature)가 65~72℃가 되도록 디자인된 프라이머 및 SD 중합효소(SD polymerase)를 이용하여, 변성 단계 및 결합과 연장의 동시반응 단계를 1주기로 하여 반복수행하는 단계를 포함하는,가닥 치환 기반의 정량중합효소 연쇄반응방법을 이용한 목적 핵산의 신속 검출방법.

9

제8항에 있어서,상기 변성 단계 전에, 92℃에서 2분간 예비변성을 수행하는 것을 특징으로 하는, 가닥 치환 기반의 정량중합효소 연쇄반응방법을 이용한 목적 핵산의 신속 검출방법.

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제8항에 있어서,상기 변성 단계는 87℃에서 1초간 수행하는 것을 특징으로 하는, 가닥 치환 기반의 정량중합효소 연쇄반응방법을 이용한 목적 핵산의 신속 검출방법.

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제8항에 있어서,상기 결합과 연장의 동시반응 단계는 72℃에서 1초간 수행하는 것을 특징으로 하는, 가닥 치환 기반의 정량중합효소 연쇄반응방법을 이용한 목적 핵산의 신속 검출방법.

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제8항에 있어서,상기 방법은 10 카피수 이하의 핵산을 검출할 수 있는 것을 특징으로 하는, 가닥 치환 기반의 정량중합효소 연쇄반응방법을 이용한 목적 핵산의 신속 검출방법.

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제8항에 있어서,상기 핵산은 DNA 또는 RNA인 것을 특징으로 하는, 가닥 치환 기반의 정량중합효소 연쇄반응방법을 이용한 목적 핵산의 신속 검출방법.

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제13항에 있어서,상기 핵산이 RNA인 경우, 역전사 정량중합효소연쇄반응을 먼저 수행한 후, 가닥 치환 기반의 정량중합효소 연쇄반응방법을 수행하는 것을 특징으로 하는, 가닥 치환 기반의 정량중합효소 연쇄반응방법을 이용한 목적 핵산의 신속 검출방법.