저산소 조건을 이용한 면역세포의 증식 배양 방법
Method of expansion of immune cell under hypoxic culture condition
특허 요약
본 발명은 저산소 조건을 이용한 면역세포의 증식 배양 방법에 관한 것으로, 말초혈액 단핵구와 영양세포를 사이토카인 하에서 정상산소 조건에서 공배양하여 유도된 NK 세포를 저산소 조건으로 옮겨 증식 배양할 경우 정상산소 조건에서만 연속 배양된 NK 세포에 비해 세포 증식이 높고, 세포사가 완화되며, 암세포 살상능이 증가하며, 노화가 감소되어 암 예방 또는 치료를 위한 우수한 입양 면역 세포치료제로 사용할 수 있다.
청구항
| 번호 | 청구항 |
|---|---|
| 1 | 사이토카인 하에서 말초혈액 단핵구 및 영양세포(feeder cell)를 공배양하여 자연살해세포(NK 세포)를 유도 및 증식하는 단계를 포함하고,상기 공배양은 산소 분압이 20% 내지 22%인 정상산소 조건에서 3일 내지 13일 동안 배양한 다음, 산소 분압이 1% 내지 5%인 저산소 조건에서 5일 내지 30일 동안 추가 배양하는 것인, NK 세포의 유도 및 증식 배양 방법. |
| 2 | 제1항에 있어서,말초혈액 단핵구는 정상 또는 암환자의 말초혈액에서 유래된 것인, NK 세포의 유도 및 증식 배양 방법. |
| 3 | 제1항에 있어서,영양세포는 방사선 조사된 Jurkat 세포 및 방사선 조사된 EBV-LCL 세포를 포함하는, NK 세포의 유도 및 증식 배양 방법. |
| 4 | 제1항에 있어서,사이토카인은 인터루킨-2(IL-2)를 포함하는, NK 세포의 유도 및 증식 배양 방법. |
| 5 | 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 따른 NK 세포의 유도 및 증식 배양 방법에 의해 제조된 NK 세포를 포함하고,상기 NK 세포는 산소 분압이 20% 내지 22%인 정상산소 조건에서 배양된 말초혈액 단핵구 유래의 NK 세포에 비해 암세포 살상능이 향상되며, CD107a, NKp44, 퍼포린(perforin) 및 그랜자임 B(Granzyme B)의 발현은 증가하고, IFN-gamma의 분비가 증가되며, 및 p16의 발현은 감소한 것인, 암의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물. |
