| 번호 | 청구항 |
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| 1 | pCold-GST 벡터에서 N-말단 히스티딘 태그가 제거되어 있고, N-말단에 제1 제한효소부위, 시스테인 프로테아제 절단부위, C-말단에 제2 제한효소부위, 히스티딘 태그 및 정지코돈이 도입되어 있으며, 상기 제1 및 제2 제한효소로 절단된 목적단백질의 유전자가 삽입되어 있는 목적단백질 발현벡터. |
| 2 | 제1항에 있어서,상기 N-말단의 히스티딘 태그는 서열번호 1과 2의 프라이머를 이용한 site directed 돌연변이를 통해 제거된 것임을 특징으로 하는 발현벡터. |
| 3 | 제1항에 있어서,상기 제1 제한효소는 BamHI이고, 상기 제2 제한효소는 HindⅢ인 것을 특징으로 하는 발현벡터. |
| 4 | 제1항에 있어서, 상기 N-말단에 제1 제한효소부위, 시스테인 프로테아제 절단부위, C-말단에 제2 제한효소부위, 히스티딘 태그 및 정지코돈의 도입은 서열번호 3과 4의 프라이머를 이용한 PCR을 통해 도입된 것임을 특징으로 하는 발현벡터. |
| 5 | 제1항에 있어서, 상기 목적단백질은 IP₃K-A인 것을 특징으로 하는 발현벡터. |
| 6 | 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항의 발현벡터가 도입되어 있는 목적단백질 발현능을 가지는 재조합미생물. |
| 7 | 제6항에 있어서, 대장균인 것을 특징으로 하는 재조합미생물. |
| 8 | 제6항의 재조합미생물을 배양하여 목적단백질을 발현시키는 단계; 및 상기 발현된 목적단백질을 회수하는 단계를 포함하는 목적단백질의 제조방법. |
| 9 | 제8항에 있어서,상기 목적단백질은 IP₃K-A인 것을 특징으로 하는 목적단백질의 제조방법. |
| 10 | 제8항에 있어서, 상기 회수 단계는 히스티딘 친화성 이온수지를 이용하는 것을 특징으로 하는 목적단백질의 제조방법. |
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