말초혈액단핵구 유래 자연 살해세포의 유도 및 증식 방법
Method for enrichment and expansion of natural killer cells derived from peripheral blood mononuclear cells
특허 요약
본 발명은 사이토카인의 존재 하에서 방사선 조사된 Jurkat 세포 및 방사선 조사된 EBV-LCL 세포(Epstein-Barr virus transformed lymphocyte continuous line)를 영양세포로서 말초혈액단핵구와 공배양하는 것을 포함하는 말초혈액단핵구 유래 자연 살해세포의 유도 및 증식 방법에 관한 것이다. 본 발명에 따르면, 고가의 장비나 고가의 다양한 사이토카인을 사용하지 않으면서도 적은 양의 말초혈액단핵구으로부터 다량의 자연 살해세포를 유도 및 증식시킬 수 있으므로 자연 살해세포를 이용한 암의 예방 및 치료의 효율 및 효능을 획기적으로 증진시킬 수 있다.
청구항
번호청구항
1

사이토카인의 존재 하에서 방사선 조사된 Jurkat 세포 및 방사선 조사된 EBV-LCL 세포(Epstein-Barr virus transformed lymphocyte continuous line)를 영양세포로서 말초혈액단핵구와 공배양하는 것을 포함하는 말초혈액단핵구 유래 자연 살해세포의 유도 및 증식 방법.

2

제1항에 있어서, 말초혈액단핵구는 정상인, 암의 위험성을 갖는 환자 또는 암 환자로부터 얻은 것인 말초혈액단핵구 유래 자연 살해세포의 유도 및 증식 방법.

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제1항에 있어서, 방사선 조사된 Jurkat 세포 또는 방사선 조사된 EBV-LCL 세포는 각각 100 내지 500 Gy 방사선을 처리하여 수득된 것인 말초혈액단핵구 유래 자연 살해세포의 유도 및 증식 방법.

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제1항에 있어서, 상기 사이토카인은 IL-2, IL-15, IL-21, Flt3-L, SCF, IL-7, IL-12, IL18 또는 이들 중 2종 이상인 말초혈액단핵구 유래 자연 살해세포의 유도 및 증식 방법.

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제1항에 있어서, 상기 사이토카인은 50U/ml 내지 1,000 U/ml의 농도로 사용되는 말초혈액단핵구 유래 자연 살해세포의 유도 및 증식 방법.

6

제1항에 있어서, 상기 공배양은 7일 내지 30일 동안 수행되는 것인 말초혈액단핵구 유래 자연 살해세포의 유도 및 증식 방법.

7

제1항에 있어서, 상기 말초혈액단핵구와 영양세포의 공배양시 혼합 비율은 1:5 내지 2:1인 말초혈액단핵구 유래 자연 살해세포의 유도 및 증식 방법.

8

제1항에 있어서, 상기 말초혈액단핵구 유래 자연 살해세포의 유도 및 증식 후 NK 세포의 유지를 위한 후배양시 배양 1일 내지 15일째에 방사선 조사된 Jurkat 세포, 방사선 조사된 EBV-LCL 세포 및 사이토카인을 추가하는 것을 더 포함하는 말초혈액단핵구 유래 자연 살해세포의 유도 및 증식 방법.

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