SCOTIN 단백질 조절을 통한 세포외소포 분비능 증진 방법
Methods for Enhancement of Extracellular Vesicles Secretion by Regulation of SCOTIN Protein
특허 요약
본 발명은 진핵세포에서 SCOTIN 단백질 발현/활성 억제와 세포외소포 분비 증진 간의 상관관계에 관한 것으로, 구체적으로 SCOTIN 단백질 발현 또는 활성 억제를 통한 세포외소포 분비능 증진 방법, 이를 통해 수득되는 세포, 상기 세포를 포함하는 세포외소포 생산용 조성물, 상기 세포 배양을 통한 세포외소포 생산 방법 및 이를 통해 수득된 세포외소포를 제공한다. 또한, 본 발명은 세포외소포 분비 증진용 SCOTIN 단백질 발현 또는 활성 억제제 및 이의 스크리닝 방법을 제공한다.
청구항
번호청구항
1

SCOTIN 유전자 녹아웃(knock-out)을 통해 SCOTIN 단백질 발현을 억제하는 단계를 포함하는, 진핵세포의 세포외소포(extracellular vesicle) 분비능 증진 방법.

2

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3

제1항에 있어서, SCOTIN 단백질 발현 억제는 진핵세포 내 ER(Endoplasmic reticulum) 및 엔도솜(endosome) 접촉 감소를 유도하는 것인 방법.

4

제1항에 있어서, 세포외소포 분비능 증진은 세포에서 분비되는 세포외소포의 개수 증가인 방법.

5

제1항에 있어서, 세포외소포는 엑소좀(exosome)인 방법.

6

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7

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8

SCOTIN 유전자 녹아웃(knock-out)을 통해 SCOTIN 단백질 발현이 억제된 진핵세포를 포함하는 세포외소포 생산용 조성물.

9

SCOTIN 유전자 녹아웃(knock-out)을 통해 SCOTIN 단백질 발현이 억제된 진핵세포를 배양하는 단계; 및 배양액에서 세포외소포를 수득하는 단계를 포함하는, 세포외소포 생산 방법.

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표면에 SCOTIN 단백질의 프롤린 풍부 도메인(proline-rich domain; PRD)이 위치하는 제1 및 제2 리포좀이 포함된 체외 반응 시스템을 준비하는 단계;상기 반응 시스템에 시험 물질을 처리하는 단계;제1 및 제2 리포좀 간 형성된 클러스터 수준을 측정하는 단계; 및시험 물질이 처리되지 않은 반응 시스템과 비교하여, 클러스터 수준이 감소된 시험 물질을 선별하는 단계를 포함하는, 진핵세포의 세포외소포 분비 증진제 스크리닝 방법.

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13

제11항에 있어서, 제1 및 제2 리포좀은 각각 평균 직경 500 nm 이상 및 30 nm 이상의 리포좀인, 진핵세포의 세포외소포 분비 증진제 스크리닝 방법.

14

SCOTIN 유전자를 녹아웃(knock-out)하기 위한 CRISPR-Cas9 시스템을 포함하는 진핵세포의 세포외소포 분비 증진용 조성물.