유연성 막 기반의 세포 시트를 이용한 세포 전사 방법
Method for Transferring Cells with Flexible Film-Based Cell Sheet
특허 요약
본 발명은 (a) 유연성 막 상에 세포를 포함하는 세포 시트를 준비하는 단계; (b) 전사(transfer) 대상체에 상기 유연성 막 상의 세포가 접촉되도록 상기 세포 시트를 상기 전사 대상체 상에 배치하는 단계; 및 (c) 상기 전사 대상체 상의 상기 세포 시트로부터 상기 유연성 막을 분리하는 단계를 포함하는, 세포의 전사 방법에 관한 것이다. 본 발명에 따른 세포 전사 방법은 세포 제작시 널리 사용되는 온도감응성 폴리머를 사용하지 않고 세포층만 따로 수확하지 않으므로 세포시트 수확에서 발생하는 세포에 해로운 저온 환경 유지 시간이나 세포의 수축으로 인한 형태 변형 문제를 해결할 수 있다. 또한, 본 발명은 유연 막을 이용한 전사 기술을 이용하므로 세포시트 조작의 난이도를 낮출 수 있어서 입체 구조 및 곡면으로의 세포시트 이동을 용이하게 할 수 있고, 이에 따라 조직공학적으로 3차원 인공 조직 제작에도 응용될 수 있다.
청구항
번호청구항
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제1항에 있어서, 상기 유연성 막은 두께가 1 내지 10 ㎛ 인 것을 특징으로 하는 방법.

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제1항에 있어서, 상기 세포시트에서 세포는 섬유아세포, 혈관내피세포, 상피세포, 멜라닌형성세포, 또는 피부표피세포인 것을 특징으로 하는 방법.

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제1항에 있어서,상기 세포 시트에서 세포는 연속적인 단일층으로 존재하거나 또는 상기 단일층이 1개 이상의 그룹으로 분리된 형태로 존재하는 것을 특징으로 하는 방법.

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제1항에 있어서, 상기 전사 대상체는 세포외 기질로부터의 성분을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.

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(a) 유연성 막 상에 세포를 포함하는 세포 시트를 준비하는 단계; (b) 전사(transfer) 대상체에 상기 유연성 막 상의 세포가 접촉되도록 상기 세포 시트를 상기 전사 대상체 상에 배치하는 단계; 및(c) 상기 전사 대상체 상의 상기 세포 시트로부터 상기 유연성 막을 분리하는 단계를 포함하고,상기 전사 대상체가 상기 유연성 막보다 상기 세포 시트의 세포에 대한 부착 에너지가 더 큰 것인,세포의 전사 방법.

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제1항에 있어서, (a) 단계에서 세포 시트의 유연성 막은 기판 상에 있고 (b) 단계는 기판으로부터 세포 시트를 분리하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.

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제1항에 있어서,(b) 단계와 (c) 단계 사이에, 세포 시트를 전사 대상체 상에 방치하여 세포 시트의 세포가 전사 대상체에 부착되도록 하는 단계를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.

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제1항에 있어서,상기 유연성 막은 합성 또는 생체 고분자 박막, 생체 고분자 멤브레인, 화학증착에 의해 형성된 박막, 또는 전기방사에 의해 방사된 섬유로 형성된 박막인 것을 특징으로 하는 방법.

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제4항에 있어서, 상기 유연성 막은 파릴렌(parylene), 폴리에틸렌 테레프탈레이트(PET), 폴리스티렌(PS), 폴리프로필렌(PP), 폴리에틸렌(PE), 폴리아미드(PA), 폴리이미드(PI), 폴리에틸렌나프탈레이트(PEN), 폴리우레탄(PU), 폴리디메틸실록산(PDMS), 실리콘, 폴리락트산(PLA), 폴리(락트산-코-글라이콜산), 및 폴리카프로락톤으로 이루어진 군에서 선택되는 적어도 1종을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.

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제5항에 있어서, 상기 유연성 막은 파릴렌을 기판 상에 화학적 기상 증착을 통해 수득한 박막인 것을 특징으로 하는 방법.

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제1항에 있어서, 상기 전사 대상체는 인테그린, 라미닌, 피브로넥틴, 피브리노겐, 비트로넥틴, 엘라스틴, 및 아르기닌-글리신-아스파르트산 펩타이드로 이루어진 군에서 선택되는 적어도 1종을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.

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제1항에 있어서, 상기 전사 대상체는 하이드로겔, 금속, 플라스틱, 또는 생체 조직인 것을 특징으로 하는 방법.

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제1항에 기재된 세포의 전사 방법을 사용하여 인공 조직 구조물을 제조하는 방법.