리보스위치를 이용한 라이신 고생산균 스크리닝 방법
Method for Screening Microorganism with High Lysine Productivity Using Riboswitch
특허 요약
본 발명은 리보스위치를 이용한 라이신 고생산균 스크리닝 방법에 관한 것으로서, 보다 구체적으로 라이신 리보스위치(riboswitch) 및 TetA 유전자를 포함하는 라이신 고생산 균주 스크리닝용 벡터 및 이를 이용한 스크리닝 방법 등에 관한 것이다. 본 발명의 리보스위치 및 이를 이용하여 라이신(Lysine) 고생산균을 스크리닝하는 방법은 라이신을 고농도로 생산하는 균주를 비교적 빠르고 쉽게 선별할 수 있으며, 이를 이용하여 미생물을 이용한 트립토판 생산의 가격경쟁력을 높일 수 있다.
청구항
번호청구항
1

라이신 리보스위치(riboswitch) 및 TetA 유전자를 포함하는, 라이신 고생산 균주 스크리닝용 벡터로서, 상기 라이신 리보스위치 유전자는 서열번호 1의 염기서열로 이루어지는 것을 특징으로 하는, 라이신 고생산 균주 스크리닝용 벡터.

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3

제 1 항에 있어서,상기 TetA 유전자는 서열번호 31로 기재된 염기서열을 포함하는 것인, 라이신 고생산 균주 스크리닝용 벡터.

4

제 1 항에 있어서,상기 라이신 고생산 균주 스크리닝용 벡터는 서열번호 11로 기재된 염기서열을 포함하는 것인, 라이신 고생산 균주 스크리닝용 벡터.

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제 1 항의 벡터로 형질전환 된, 대장균(Escherichia coli) KCTC12184BP.

6

균주 라이브러리에 라이신 리보스위치(riboswitch) 및 TetA 유전자를 포함하는 벡터를 형질전환 하는 단계; 및 상기 형질전환된 균주를 테트라마이신이 포함된 배지에서 배양하는 단계를 포함하는 라이신 고생산 균주를 스크리닝하는 방법으로서, 상기 라이신 리보스위치유전자는 서열번호 1의 염기서열로 이루어지는 것을 특징으로 하는, 라이신 고생산 균주를 스크리닝하는 방법.

7

균주 라이브러리에 라이신 리보스위치(riboswitch) 및 TetA 유전자를 포함하는 벡터를 형질전환 하는 단계; 및상기 형질전환된 균주를 니켈이 포함된 배지에서 배양하는 단계를 포함하는 라이신 저생산 균주를 스크리닝하는 방법.

8

서열번호 30의 염기서열로 이루어지는 프로모터 및 포스포에놀피루브산카르복실화효소(Phosphoenolpyruvate carboxylase, ppc) 유전자를 포함하는, 라이신 고생산용 벡터.

9

제 8 항에 있어서,상기 포스포에놀피루브산카르복실화효소 유전자는 서열번호 33의 염기서열로 이루어지는 것을 특징으로 하는, 라이신 고생산용 벡터.