바이러스 검출용 나노 프로브 및 이를 이용한 바이러스 검출법
Nanoprobe for virus detection and virus detection method using the same
특허 요약
본 발명은 소수성 분율이 조절된 양친성 고분자를 합성하고 자가 조립 유도로 고분자 소수성 막 부위에 형광 분자 담지하며, 표면이 항체로 개질되어 타겟 바이러스와 항원-항체 결합되고, 형광 분자 특정 수 이상일 때 자기 소광이 유도되어 신호를 증폭시킬 수 있으며 특히, �처나 효소 없이 자체 소광 효과를 갖는 바이러스 검출용 나노 프로브에 관한 것이다. 또한, 자성 나노 입자 및 고분자 나노 프로브의 특성을 이용하여 바이러스를 검출하는 MVP(Magnetic nanoparticles-Virus-Polymeric nanoprobes) assay를 설계함으로써, 동시에 여러 종류의 표적(단백질 또는 바이러스)을 동시에 진단 가능한 간단하고 신속한 바이러스 검출 및 모니터링이 가능한 바이러스 검출법에 관한 것이다.
청구항
번호청구항
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제1항에 있어서, 양친성 고분자는 소수성 분율이 0.28 이하인, 나노 프로브.

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제1항에 있어서, 상기 양친성 고분자는 폴리에틸렌글리콜(PEG), 폴리아크릴릭애시드(PAA), 폴리에틸렌옥사이드(PEO), 및폴리비닐아세테이트(PVA)로 이루어진 그룹에서 선택되는 1종 이상인 친수성 고분자를 포함하는, 나노 프로브.

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이중층 막 구조의 양친성 고분자 나노입자; 상기 양친성 고분자 막의 소수성 부분에 담지되는 1종의 소수성 형광 분자; 및상기 양친성 고분자 나노입자 표면에 부착되는 항체를 포함하고,�처 없이 자기 소광 상태를 유지하는, 나노 프로브.

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제1항에 있어서, 상기 양친성 고분자는 폴리락트산(PLA), 폴리(L-류신)(poly(L-Leucine)), 및 이들의 혼합물인 소수성 고분자를 포함하는, 나노 프로브.

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제1항에 있어서, 상기 형광 분자는 6.45Ev 이하의 오비탈을 갖는 소수성 형광 분자인, 나노 프로브.

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제1항에 있어서, 상기 형광 분자는 3,3-디옥타데실옥사카보시아닌 퍼클로레이트(3,3-Dioctadecyloxacarbocyanine Perchlorate; Dio; Dioc), 1,1-디옥타데실-3,3,3,3-테트라메틸인도카보시아닌 퍼클로레이트(1,1-dioctadecyl-3,3,3,3-tetramethylindocarbocyanine perchlorate; DiI), 4,4-디이소티오시아나토스틸벤-2,2-디설폰산 디소듐염(4,4-diisothiocyanatostilbene-2,2-disulfonicacid disodium salt; DID, DIDS), 4-(4-(디헥사데실아미노)스티릴)-N-메틸피리디늄 이오다이드(4-(4-(dihexadecylamino)styryl)-Nmethylpyridiniumiodide; DiA; 4-Di-16-ASP), 및 1,1-디옥타데실-3,3,3,3-테트라메틸인도트리카보시아닌 이오다이드(1,1 -dioctadecyl-3,3,3,3-tetramethylindotricarbocyanine iodide; DiR)로 이루어진 그룹에서 선택되는 1종인, 나노 프로브.

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제1항에 있어서,상기 형광 분자는 양친성 고분자 나노입자 개당 50개 이상의 분자수로 담지되는, 나노 프로브.

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제1항에 있어서,상기 고분자 나노입자는 80 내지 120nm 입자 크기를 갖는, 나노 프로브.

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시료에 제1항에 따른 나노 프로브 및 항체 결합 자성 나노입자를 처리하여 반응시키는 단계;자석을 이용하여 자성 분리하며 세척하는 단계; 형광단 방출을 유도하는 단계; 및형광 신호를 검출하여 바이러스 유무를 확인하는 단계를 포함하는, 바이러스 검출 방법.

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제10항에 있어서,상기 나노 프로브는 타겟 바이러스와 결합이 가능한 항체로 개질되는, 바이러스 검출 방법.

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제10항에 있어서,상기 나노 프로브는 항체 종류에 따라 다른 형광 분자가 담지되는, 바이러스 검출 방법.

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제10항에 있어서,바이러스 다중 검출을 위하여 항체가 서로 다른 2종 이상의 나노 프로브를 사용하는, 바이러스 검출 방법.

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제10항에 있어서,상기 자성 나노입자는 200nm 이하의 금속 산화물인, 바이러스 검출 방법.

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제10항에 있어서,상기 자성 나노입자는 철 산화물인, 바이러스 검출 방법.

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제10항에 있어서,상기 반응시키는 단계는 나노 프로브를 기준으로 자성 나노입자를 1:1의 부피비로 처리하는 단계를 포함하는, 바이러스 검출 방법.