| 번호 | 청구항 |
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| 1 | 인간 만능 줄기세포로부터 분화된 내피세포 계통의 세포주를 분화 배지로부터 수득하는 단계;수득된 상기 세포주를 필터를 이용하여 여과하는 단계;여과된 상기 세포주를 기질 상에 배양하는 단계, 및배양된 상기 세포주에서 기질 상에 부착된 동질성(homogenous)의 내피세포를 분리하는 단계를 포함하고,상기 필터는,공극 간격이 20 내지 40μm 범위인, 혈관 내피세포 순수 분리 방법. |
| 2 | 삭제 |
| 3 | 제 1 항에 있어서,상기 기질은,콜라겐, 피브린, 피브로넥틴, 비트로넥틴, 마트리겔, 젤라틴, 라미닌, 헤파린, 폴리리신 및 히알루론산 중 적어도 하나를 포함하는, 혈관 내피세포 순수 분리 방법. |
| 4 | 제 3 항에 있어서,상기 기질은, 콜라겐이고, 0.1 mg/ml의 상기 콜라겐을 포함하는, 혈관 내피세포 순수 분리 방법. |
| 5 | 제 1 항에 있어서,상기 배양하는 단계는,세포 성장인자 및 아스코르빅산을 포함하는 DMEM/F-12 배지에서 배양하는, 혈관 내피세포 순수 분리 방법. |
| 6 | 제 5 항에 있어서,상기 세포 성장인자는,FGF-1(fibroblast growth factor-1), FGF-2(bFGF), FGF-3, FGF-4, FGF-5, FGF-6, EGF(epidermal growth factor), KGF(keratinocyte growth factor), HGF(hepatocyte growth factor), TGF-α(transforming growth factor-α), TGF-βTGF-ββ엔지오포이에린 1(angipoietin 1), 엔지오포이에린 2, 에리트로포이에린(erythropoietin), 뉴로필린, IGF-1, 오스테오폴린, 플레이오트로핀, 액티빈, 엔도텔린01 및 VEGF-A(vascular endothelial growth factor-A) 중 적어도 하나를 포함하는, 혈관 내피세포 순수 분리 방법. |
| 7 | 제 1 항에 있어서,상기 배양하는 단계는,여과된 상기 세포주를 2개의 기질 상에 파종하는 단계를 포함하는, 혈관 내피세포 순수 분리 방법. |
| 8 | 제 1 항에 있어서,상기 배양하는 단계는,4시간 내지 20시간 동안 배양되는, 혈관 내피세포 순수 분리 방법. |
| 9 | 제 1 항에 있어서,상기 동질성의 내피세포는,CDH5 및 VWF를 발현하는, 혈관 내피세포 순수 분리 방법. |
| 10 | 제 9항에 있어서,상기 CDH5의 유전자 발현 수준은,분리되기 전 보다 12배 높은, 혈관 내피세포 순수 분리 방법. |
| 11 | 제 9항에 있어서,상기 VWF의 유전자 발현 수준은,분리되기 전 보다 2배 높은, 혈관 내피세포 순수 분리 방법. |
| 12 | 제 1 항 및 제 3항 내지 제 11 항 중 어느 한 항의 방법으로 분리되고,세포의 양적 증가 및 유지를 위한 계대배양이 가능하고,자성 세포 분류 및 유세포 분류와 같은 항원-항체 기반의 세포 분류가 사용되지 않고도,전체 세포에 대하여 CDH5 및 VWF를 발현하는 동질성(homogenous)의 내피세포를 98 % 이상 포함하는, 심혈관계 질환의 예방용 또는 치료용 혈관 내피세포 주. |
| 13 | 제 12 항에 기재된 상기 혈관 내피세포 주를 포함하는, 심혈관계 질환의 예방용 또는 치료용 세포 치료제 조성물. |
| 14 | 제 13 항에 있어서, 상기 심혈관계 질환은,허혈성 심장 질환, 심부전, 고혈압성 심장질환, 부정맥, 심장관막증, 심실중격결손, 선천성 심장질환, 심근중, 심낭질환, 뇌졸증, 말초혈관질환, 동맥류, 동맥경화증, 고혈압, 협심증 및 심근경색증 중 적어도 하나인, 심혈관계 질환의 예방용 또는 치료용 세포 치료제 조성물. |