디스토니아 치료 후보 약물의 신규 스크리닝 방법
A novel method for screening drug candidate for treating dystonia
특허 요약
본 발명은 신규 디스토니아 치료제 후보 물질의 스크니링 방법에 관한 것으로서, 보다 구체적으로는 시험관내 조건(in vitro), 인간을 제외한 실험동물의 생체내 조건(in vivo) 또는 가상환경내(in silico)에서 피검 화합물 또는 천연물이 세포토닌 수용체 5-HT 2A 의 기능을 선택적으로 저해하는지 여부를 관찰하는 단계; 상기 5-HT 2A 를 선택적으로 저해하는 것으로 확인된 피검 화합물 또는 천연물을 선별하는 단계; 5-HT 2A 를 저해하는 것을 확인된 피검 화합물 또는 천연물이 시험관내 조건(in vitro), 인간을 제외한 실험동물의 생체내 조건(in vivo) 또는 가상환경내(in silico)에서 5-HT 2A 를 제외한 세로토닌 수용체의 기능을 저해하는지 여부를 확인하는 단계; 및 상기 5-HT 2A 를 제외한 세로토닌 수용체의 기능을 저해하지 않는 피검 화합물 또는 천연물을 선별하는 단계(제4단계)를 포함하는 스트레스에 의해 유발되는 디스토니아 치료 후보물질의 스크리닝 방법이 제공된다.
청구항
번호청구항
1

세로토닌 수용체 5-HT2A, 그의 리간드 및 피검 화합물 또는 천연물을 반응시키고 상기 세로토닌 5-HT2A 및 그의 리간드의 결합을 저해한 피검 화합물 또는 천연물을 선별함으로써 시험관내 조건(in vitro)에서 피검 화합물 또는 천연물이 세포토닌 수용체 5-HT2A의 기능을 선택적으로 저해하는지 여부를 관찰하는 단계(제1단계); 상기 5-HT2A를 선택적으로 저해하는 것으로 확인된 피검 화합물 또는 천연물을 선별하는 단계(제2단계); 5-HT2A를 저해하는 것을 확인된 피검 화합물 또는 천연물이 시험관내 조건(in vitro)에서 5-HT2A를 제외한 세로토닌 수용체의 기능을 저해하는지 여부를 확인하는 단계(제3단계); 및 상기 5-HT2A를 제외한 세로토닌 수용체의 기능을 저해하지 않는 피검 화합물 또는 천연물을 선별하는 단계(제4단계)를 포함하는 스트레스에 의해 유발되는 디스토니아 치료 후보물질의 스크리닝 방법.

2

삭제

3

제1항에 있어서, 추가적으로, 인간을 제외한 P/Q 타입 칼슘채널에 돌연변이 유발된 불안정 동물(tottering animal)을 스트레스 조건에 방치하는 스트레스 유발 단계; 스트레스가 유발된 불안정 동물에 상기에서 선별된 피검 화합물 또는 천연물을 투여하는 단계; 및 상기 스트레스가 유발된 불안정 동물의 근이상긴장 지수를 유의하게 감소시킨 피검 화합물 또는 천연물을 선별하는 단계를 포함하는, 스트레스에 의해 유발되는 디스토니아 치료 후보물질의 스크리닝 방법.

4

제1항에 있어서,추가적으로, 인간을 제외한 P/Q 타입 칼슘채널에 돌연변이 유발된 불안정 동물(tottering animal)의 소뇌에 칼슘센서 단백질을 암호화하는 유전자를 국소적으로 형질도입하는 단계; 상기 칼슘센서 단백질을 암호화하는 유전자가 소뇌에 국소적으로 형질도입된 불안정 동물을 스트레스 조건에 방치하는 스트레스 유발단계; 상기 스트레스가 유발된 불안정 동물에 상기에서 선별된 피검 화합물 또는 천연물을 투여하는 단계; 상기 스트레스가 유발된 불안정 동물의 소뇌에서의 칼슘과 결합한 칼슘센서 단백질의 양을 측정하는 단계; 및 칼슘과 결합한 칼슘센서 단백질의 양을 유의하게 낮춘 피검 화합물 또는 천연물을 선별하는 단계를 포함하는, 스트레스에 의해 유발되는 디스토니아 치료 후보물질의 스크리닝 방법.

5

제4항에 있어서,상기 칼슘센서 단백질은 yellow cameleon(YC), Inverse-Pericam, Camgroo, TN-L15, SynapCam 또는 GCaMP인, 스트레스에 의해 유발되는 디스토니아 치료 후보물질의 스크리닝 방법.

6

제5항에 있어서,상기 GCaMP는 GCaMP1, GCamP2, GCaMP3, GCaMP4, GCaMP5 또는 GCaMP6인, 스트레스에 의해 유발되는 디스토니아 치료 후보물질의 스크리닝 방법.