표적 물질에 의해 조절되는 핵산 중합효소 활성을 이용한 생체물질의 검출 및 정량 방법
Method of Detecting and Quantifying Biomolecules Using Target-Controlled Nucleic Acid Polymerase Activity
특허 요약
본 발명은 표적 물질에 의해 조절되는 핵산 중합효소 활성을 이용한 생체물질의 검출 및 정량방법에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 특정 핵산을 특이적 인식하는 단일가닥 DNA를 포함하도록 제조된 DNA 압터머(aptamer)와 복합체를 이루는 특정 핵산의 특이적인 결합 여부에 따른 DNA 중합효소(DNA polymerase)의 활성 변화를 통해, 핵산, 단백질, 소분자 물질, 생리활성 물질(효소 활성) 등을 고감도로 검출 및 정량할 수 있는 생체물질의 검출 또는 정량 방법에 관한 것이다. 본 발명에 따르면, 표적 물질에 의한 DNA 압터머(DNA aptamer) 구조 변화를 통해 중합효소의 활성을 조절함으로써, 표적 핵산, 표적 단백질, 표적 소분자 물질, 표적 효소 활성 등을 표지 없이(label-free) 민감하게 검출 및 정량할 수 있는 생체물질의 진단 방법을 제공할 수 있다.
청구항
번호청구항
13

제1항에 있어서, 상기 신호발생 물질은 방사성 동위원소, 형광물질, 염료, 나노입자, 효소, 효소기질, 발광성 물질 및 전기화학적 작용기(electrochemical functional group)를 함유하는 물질로 구성된 군에서 선택된 물질로 표지된 것을 특징으로 하는 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-오프 형(switch-off mode) 표적 핵산의 검출 또는 정량 방법.

49

제40항에 있어서, 상기 프라이머 신장반응의 온도는 20∼30℃인 것을 특징으로 하는 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-온 형(switch-on mode) 표적 BER(Base Excision Repair) 효소의 활성 검출 또는 정량 방법.

1

다음의 단계를 포함하는, 표적 핵산에 의해 조절되는 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-오프 형(switch-off mode) 표적 핵산의 검출 또는 정량방법으로,(a) 표적 핵산을 특이적으로 인식하는 단일가닥 핵산을 포함하는 압터머 및 상기 표적 핵산을 함유하는 것으로 추정되는 검출대상 시료를 함유하는 혼합물에 핵산 중합효소를 첨가하고, 반응시켜 핵산 중합효소와 압터머-표적 핵산 복합체를 결합시키는 단계;(b) 상기 (a) 단계의 반응생성물에 주형핵산(template); TaqMan 프로브; 및 신호발생 물질을 함유하는 혼합물과 상기 주형핵산에 결합하는 프라이머를 혼합하고, 프라이머 신장반응(primer extension)을 시키는 단계; 및(C) 상기 (b) 단계의 프라이머 신장반응을 분석하여 표적 핵산을 검출 또는 정량하는 단계:상기 압터머는 5' 말단 또는 3' 말단에 서열번호 21로 표시되는 보존된 부위(conserved region)를 가지는 것을 특징으로 하는, 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-오프 형 표적 핵산의 검출 또는 정량 방법.

2

제1항에 있어서, 상기 압터머의 단일가닥은 표적 핵산과 상보적 염기서열을 가지는 것을 특징으로 하는 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-오프 형(switch-off mode) 표적 핵산의 검출 또는 정량 방법.

3

제1항에 있어서, 상기 압터머는 표적 핵산과 결합 시 안정된 구조를 이룬 다음, 핵산 중합효소와 결합하여 상기 효소의 활성을 감소시키는 것을 특징으로 하는 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-오프 형(switch-off mode) 표적 핵산의 검출 또는 정량 방법.

4

삭제

5

제1항에 있어서, 상기 압터머는 서열번호 1, 서열번호 2, 서열번호 4, 서열번호 6, 서열번호 8, 서열번호 9 및 서열번호 12로 구성된 군에서 선택되는 염기서열을 가지는 것을 특징으로 하는 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-오프 형(switch-off mode) 표적 핵산의 검출 또는 정량 방법.

6

제1항에 있어서, 상기 표적 핵산은 A20-target(A20-타깃), 랜덤1-타깃(Random1-target), 랜덤2-타깃(Random2-target), 상보적 유레아-타깃 1(Complementary Urea-target 1), 비-상보적 Chlamydia-타깃 1(Non-complementary Chlamydia-target 1) 및 상보적 Chlamydia-타깃2(Complementary Chlamydia-target2)로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-오프 형(switch-off mode) 표적 핵산의 검출 또는 정량 방법.

7

제1항에 있어서, 상기 핵산 중합효소는 Taq DNA 중합효소인 것을 특징으로 하는 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-오프 형(switch-off mode) 표적 핵산의 검출 또는 정량 방법.

8

청구항 8은(는) 설정등록료 납부시 포기되었습니다.제1항에 있어서, 상기 (a) 단계의 혼합물을 약 90℃에서 약 5분간 가열한 후 약 25℃로 서서히 냉각시킨 다음, 핵산 중합효소를 첨가하고, 반응시키는 것을 특징으로 하는 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-오프 형(switch-off mode) 표적 핵산의 검출 또는 정량 방법.

9

삭제

10

청구항 10은(는) 설정등록료 납부시 포기되었습니다.제1항에 있어서, 상기 (b) 단계의 신호발생 물질을 함유하는 혼합물을 약 90℃에서 약 5분간 가열한 후 약 25℃로 서서히 냉각시킨 다음, 주형핵산(template)에 프라이머 및 TaqMan 프로브를 결합시키는 반응을 수행한 다음, 상기 (a) 단계의 반응생성물과 혼합하는 것을 특징으로 하는 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-오프 형(switch-off mode) 표적 핵산의 검출 또는 정량 방법.

11

제1항에 있어서, 상기 (c) 단계는 (b) 단계의 프라이머 신장반응에서 유래하는 신호를 검출 또는 정량함으로써 표적 핵산의 존재 여부를 분석하는 것을 특징으로 하는 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-오프 형(switch-off mode) 표적 핵산의 검출 또는 정량 방법.

12

제1항에 있어서, 상기 프라이머 신장반응의 온도는 20∼30℃인 것을 특징으로 하는 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-오프 형(switch-off mode) 표적 핵산의 검출 또는 정량 방법.

45

청구항 45은(는) 설정등록료 납부시 포기되었습니다.제40항에 있어서, 상기 블로커 핵산은 BER 효소의 기질로서 사용되는 DNA인 것을 특징으로 하는 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-온 형(switch-on mode) 표적 BER(Base Excision Repair) 효소의 활성 검출 또는 정량 방법.

14

다음의 단계를 포함하는, 표적 핵산에 의해 조절되는 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-온 형(switch-on mode) 표적 핵산의 검출 또는 정량 방법으로,(a) 블로커 핵산(blocker nucleic acid)에 상보적인 단일가닥 핵산을 포함하는 압터머 및 표적 핵산과 상보적인 염기서열을 가지는 블로커 핵산을 함유하는 혼합물에 표적 핵산을 함유하는 것으로 추정되는 검출대상 시료와 핵산 중합효소를 첨가하고, 반응시켜 핵산 중합효소와 압터머-블로커 핵산 복합체를 결합시키는 단계;(b) 상기 (a) 단계의 반응생성물에 주형핵산(template); TaqMan 프로브; 및 신호발생 물질을 함유하는 혼합물과 상기 주형핵산에 결합하는 프라이머를 혼합하고, 프라이머 신장반응(primer extension)을 시키는 단계; 및 (C) 상기 (b) 단계의 프라이머 신장반응을 분석하여 표적 핵산을 검출 또는 정량하는 단계:상기 압터머는 5' 말단 또는 3' 말단에 서열번호 21로 표시되는 보존된 부위(conserved region)를 가지는 것을 특징으로 하는, 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-온 형 표적 핵산의 검출 또는 정량 방법.

15

제14항에 있어서, 상기 압터머의 단일가닥은 블로커 핵산과 상보적 염기서열을 가지는 것을 특징으로 하는 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-온 형(switch-on mode) 표적 핵산의 검출 또는 정량 방법.

16

제14항에 있어서, 상기 압터머는 블로커 핵산(blocker nucleic acid)과 결합 시 안정된 구조를 이룬 다음, 핵산 중합효소와 결합하여 상기 효소의 활성을 감소시키는 것을 특징으로 하는 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-온 형(switch-on mode) 표적 핵산의 검출 또는 정량 방법.

17

삭제

18

제14항에 있어서, 상기 압터머는 서열번호 14로 표시되는 염기서열을 가지는 것을 특징으로 하는 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-온 형(switch-on mode) 표적 핵산의 검출 또는 정량 방법.

19

제14항에 있어서, 상기 표적 핵산은 상보적 유레아-타깃 2(Complementary Urea-target 2) 또는 비-상보적 Chlamydia-타깃 2(Non-complementary Chlamydia-target 2)인 것을 특징으로 하는 핵산 중합효소 활성을 이용한 스위치-온 형(switch-on mode) 표적 핵산의 검출 또는 정량 방법.

20

제14항에 있어서, 상기 핵산 중합효소는 Taq DNA 중합효소인 것을 특징으로 하는 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-온 형(switch-on mode) 표적 핵산의 검출 또는 정량 방법.

21

제14항에 있어서, 상기 프라이머 신장반응의 온도는 20∼30℃인 것을 특징으로 하는 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-온 형(switch-on mode) 표적 핵산의 검출 또는 정량 방법.

22

청구항 22은(는) 설정등록료 납부시 포기되었습니다.제14항에 있어서, 상기 (a) 단계의 혼합물을 약 90℃에서 약 5분간 가열한 후 약 25℃로 서서히 냉각시킨 다음, 핵산 중합효소를 첨가하고, 반응시키는 것을 특징으로 하는 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-온 형(switch-on mode) 표적 핵산의 검출 또는 정량 방법.

23

삭제

24

청구항 24은(는) 설정등록료 납부시 포기되었습니다.제14항에 있어서, 상기 (b) 단계의 신호발생 물질을 함유하는 혼합물을 약 90℃에서 약 5분간 가열한 후 약 25℃로 서서히 냉각시킨 다음, 주형핵산(template)에 프라이머 및 TaqMan 프로브를 결합시키는 반응을 수행한 다음, 상기 (a) 단계의 반응생성물과 혼합하는 것을 특징으로 하는 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-온 형(switch-on mode) 표적 핵산의 검출 또는 정량 방법.

25

제14항에 있어서, 상기 신호발생 물질은 방사성 동위원소, 형광물질, 염료, 나노입자, 효소, 효소기질, 발광성 물질 및 전기화학적 작용기(electrochemical functional group)를 함유하는 물질로 구성된 군에서 선택된 물질로 표지된 것을 특징으로 하는 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-온 형(switch-on mode) 표적 핵산의 검출 또는 정량 방법.

26

제14항에 있어서, 상기 (c) 단계는 (b) 단계의 프라이머 신장반응에서 유래하는 신호를 검출 또는 정량함으로써 표적 핵산의 존재 여부를 분석하는 것을 특징으로 하는 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-온 형(switch-on mode) 표적 핵산의 검출 또는 정량 방법.

27

청구항 27은(는) 설정등록료 납부시 포기되었습니다.제14항에 있어서, 상기 블로커 핵산은 블로커 DNA(blocker DNA) 또는 블로커 RNA(blocker RNA)인 것을 특징으로 하는 중합효소 활성을 이용한 스위치-온 형(switch-on mode) 표적 핵산의 검출 또는 정량 방법.

28

제14항에 있어서, 상기 블로커 핵산은 서열번호 15로 표시되는 염기서열을 가지는 유레아-특이적 블로커(Urea-specific blocker)인 것을 특징으로 하는 중합효소 활성을 이용한 스위치-온 형(switch-on mode) 표적 핵산의 검출 또는 정량 방법.

46

제40항에 있어서, 상기 블로커 핵산은 BER 효소의 기질로서 사용되는 서열번호 19로 표시되는 염기서열을 가지는 UDG 블로커(UDG(uracil DNA glycosylase) blocker)인 것을 특징으로 하는 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-온 형(switch-on mode) 표적 BER(Base Excision Repair) 효소의 활성 검출 또는 정량 방법.

47

제40항에 있어서, 상기 표적 BER 효소는 UDG(uracil DNA glycosylase)인 것을 특징으로 하는 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-온 형(switch-on mode) 표적 BER(Base Excision Repair) 효소의 활성 검출 또는 정량 방법.

48

제40항에 있어서, 상기 핵산 중합효소는 Taq DNA 중합효소인 것을 특징으로 하는 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-온 형(switch-on mode) 표적 BER(Base Excision Repair) 효소의 활성 검출 또는 정량 방법.

29

다음의 단계를 포함하는, 표적 물질에 의해 조절되는 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-온 형(switch-on mode) 표적 물질의 검출 또는 정량 방법으로,(a) 블로커 핵산(blocker nucleic acid)에 상보적인 단일가닥 핵산을 포함하는 압터머 및 표적 물질을 특이적으로 인식하고 결합하는 염기서열을 가지는 블로커 핵산을 함유하는 혼합물에 표적 물질을 함유하는 것으로 추정되는 검출대상 시료와 핵산 중합효소를 첨가하고, 반응시켜 핵산 중합효소와 압터머-블로커 핵산 복합체를 결합시키는 단계;(b) 상기 (a) 단계의 반응생성물에 주형핵산(template); TaqMan 프로브; 및 신호발생 물질을 함유하는 혼합물과 상기 주형핵산에 결합하는 프라이머를 혼합하고, 프라이머 신장반응(primer extension)을 시키는 단계; 및(C) 상기 (b) 단계의 프라이머 신장반응물을 분석하여 표적 물질을 검출 또는 정량하는 단계:상기 압터머는 5' 말단 또는 3' 말단에 서열번호 21로 표시되는 보존된 부위(conserved region)를 가지는 것을 특징으로 하는, 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-온 형 표적 물질의 검출 또는 정량 방법.

30

제29항에 있어서, 상기 압터머의 단일가닥은 블로커 핵산과 상보적 염기서열을 가지는 것을 특징으로 하는 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-온 형(switch-on mode) 표적 물질의 검출 또는 정량 방법.

31

제29항에 있어서, 상기 압터머는 블로커 핵산(blocker nucleic acid)과 결합 시 안정된 구조를 이룬 다음, 핵산 중합효소와 결합하여 상기 효소의 활성을 감소시키는 것을 특징으로 하는 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-온 형(switch-on mode) 표적 물질의 검출 또는 정량 방법.

32

삭제

33

청구항 33은(는) 설정등록료 납부시 포기되었습니다.제29항에 있어서, 상기 블로커 핵산은 표적 물질을 특이적으로 인식하고, 이에 결합하는 DNA 또는 RNA인 것을 특징으로 하는 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-온 형(switch-on mode) 표적 물질의 검출 또는 정량 방법.

34

제29항에 있어서, 상기 표적 물질은 핵산, 탄수화물(carbohydrate), 지질(lipid), 단백질, 펩타이드, 항원, 항체, 효소, 합텐(hapten), 저분자 물질, 거대분자 복합체(macromolecular complex), 세포, 약학제제(pharmaceutical agent), 유기화합물 및 무기화합물로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-온 형(switch-on mode) 표적 물질의 검출 또는 정량 방법.

35

제29항에 있어서, 상기 핵산 중합효소는 Taq DNA 중합효소인 것을 특징으로 하는 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-온 형(switch-on mode) 표적 물질의 검출 또는 정량 방법.

36

제29항에 있어서, 상기 프라이머 신장반응의 온도는 20∼30℃인 것을 특징으로 하는 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-온 형(switch-on mode) 표적 물질의 검출 또는 정량 방법.

37

제29항에 있어서, 상기 신호발생 물질은 방사성 동위원소, 형광물질, 염료, 나노입자, 효소, 효소기질, 발광성 물질 및 전기화학적 작용기(electrochemical functional group)를 함유하는 물질로 구성된 군에서 선택된 물질로 표지된 것을 특징으로 하는 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-온 형(switch-on mode) 표적 물질의 검출 또는 정량 방법.

38

제29항에 있어서, 상기 (c) 단계는 (b) 단계의 프라이머 신장반응에서 유래하는 신호를 검출 또는 정량함으로써 표적 물질의 존재 여부를 분석하는 것을 특징으로 하는 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-온 형(switch-on mode) 표적 물질의 검출 또는 정량 방법.

39

삭제

40

다음의 단계를 포함하는, 표적 BER(Base Excision Repair) 효소에 의해 조절되는 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-온 형(switch-on mode) 표적 BER(Base Excision Repair) 효소의 활성 검출 또는 정량 방법으로,(a) 블로커 핵산(blocker nucleic acid)에 상보적인 단일가닥 핵산을 포함하는 압터머 및 표적 BER 효소에 특이적인 염기서열을 가지는 블로커 핵산을 함유하는 혼합물에 표적 BER 효소를 함유하는 것으로 추정되는 검출대상 시료와 핵산 중합효소를 첨가하고, 반응시켜 핵산 중합효소와 압터머-블로커 핵산 복합체를 결합시키는 단계;(b) 상기 (a) 단계의 반응생성물에 주형핵산(template); TaqMan 프로브; 및 신호발생 물질을 함유하는 혼합물과 상기 주형핵산에 결합하는 프라이머를 혼합하고, 프라이머 신장반응을(primer extension)을 시키는 단계; 및(C) 상기 (b) 단계의 프라이머 신장반응물을 분석하여 표적 BER(Base Excision Repair) 효소의 활성을 검출 또는 정량하는 단계:상기 압터머는 5' 말단 또는 3' 말단에 서열번호 21로 표시되는 보존된 부위(conserved region)를 가지는 것을 특징으로 하는, 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-온 형 표적 BER 효소의 활성 검출 또는 정량 방법.

41

제40항에 있어서, 상기 압터머의 단일가닥은 블로커 핵산과 상보적 염기서열을 가지는 것을 특징으로 하는 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-온 형(switch-on mode) 표적 BER(Base Excision Repair) 효소의 활성 검출 또는 정량 방법.

42

제40항에 있어서, 상기 압터머는 블로커 핵산(blocker nucleic acid)과 결합 시 안정된 구조를 이룬 다음, 핵산 중합효소와 결합하여 상기 효소의 활성을 감소시키는 것을 특징으로 하는 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-온 형(switch-on mode) 표적 BER(Base Excision Repair) 효소의 활성 검출 또는 정량 방법.

43

삭제

44

제40항에 있어서, 상기 압터머는 서열번호 18로 표시되는 염기서열을 가지는 것을 특징으로 하는 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-온 형(switch-on mode) 표적 BER(Base Excision Repair) 효소의 활성 검출 또는 정량 방법.

50

청구항 50은(는) 설정등록료 납부시 포기되었습니다.제40항에 있어서, 상기 (a) 단계의 혼합물을 약 90℃에서 약 5분간 가열한 후 약 37℃로 서서히 냉각시킨 다음, BER(Base Excision Repair) 효소를 함유하는 것으로 추정되는 검출대상 시료를 첨가하고, 약 25℃로 서서히 냉각시킨 다음, 표적 핵산 중합효소를 첨가하고, 반응시키는 것을 특징으로 하는 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-온 형(switch-on mode) 표적 BER(Base Excision Repair) 효소의 활성 검출 또는 정량 방법.

51

삭제

52

청구항 52은(는) 설정등록료 납부시 포기되었습니다.제40항에 있어서, 상기 (b) 단계의 신호발생 물질을 함유하는 혼합물을 약 90℃에서 약 5분간 가열한 후 약 25℃로 서서히 냉각시킨 다음, 주형핵산(template)에 프라이머 및 TaqMan 프로브를 결합시키는 반응을 수행한 다음, 상기 (a) 단계의 반응생성물과 혼합하는 것을 특징으로 하는 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-온 형(switch-on mode) 표적 BER(Base Excision Repair) 효소의 활성 검출 또는 정량 방법.

53

제40항에 있어서, 상기 신호발생 물질은 방사성 동위원소, 형광물질, 염료, 나노입자, 효소, 효소기질, 발광성 물질 및 전기화학적 작용기(electrochemical functional group)를 함유하는 물질로 구성된 군에서 선택된 물질로 표지된 것을 특징으로 하는 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-온 형(switch-on mode) 표적 BER(Base Excision Repair) 효소의 활성 검출 또는 정량 방법.

54

제40항에 있어서, 상기 (c) 단계는 (b) 단계의 프라이머 신장반응에서 유래하는 신호를 검출 또는 정량함으로써 표적 BER(Base Excision Repair) 효소의 활성을 분석하는 것을 특징으로 하는 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-온 형(switch-on mode) 표적 BER(Base Excision Repair) 효소의 활성 검출 또는 정량 방법.

55

다음의 단계를 포함하는, 표적 핵산 효소에 의해 조절되는 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-온 형(switch-on mode) 표적 핵산 효소의 활성 검출 또는 정량 방법으로,(a) 블로커 핵산(blocker nucleic acid)에 상보적인 단일가닥 핵산을 포함하는 압터머 및 상기 표적 핵산 효소에 특이적인 염기서열을 가지는 블로커 핵산을 함유하는 혼합물에 표적 핵산 효소를 함유하는 것으로 추정되는 검출대상 시료와 핵산 중합효소를 첨가하고, 반응시켜 핵산 중합효소와 압터머-블로커 핵산 복합체를 결합시키는 단계;(b) 상기 (a) 단계의 반응생성물에 주형핵산(template); TaqMan 프로브; 및 신호발생 물질을 함유하는 혼합물과 상기 주형핵산에 결합하는 프라이머를 혼합하고, 프라이머 신장반응(primer extension)을 시키는 단계; 및(C) 상기 (b) 단계의 프라이머 신장반응을 분석하여 표적 핵산 효소의 활성을 검출 또는 정량하는 단계:상기 압터머는 5' 말단 또는 3' 말단에 서열번호 21로 표시되는 보존된 부위(conserved region)를 가지는 것을 특징으로 하는, 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-온 형 표적 핵산 효소의 활성 검출 또는 정량 방법.

56

제55항에 있어서, 상기 압터머의 단일가닥은 블로커 핵산과 상보적 염기서열을 가지는 것을 특징으로 하는 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-온 형(switch-on mode) 표적 핵산 효소의 활성 검출 또는 정량 방법.

57

제55항에 있어서, 상기 압터머는 블로커 핵산(blocker nucleic acid)과 결합 시 안정된 구조를 이룬 다음, 핵산 중합효소와 결합하여 상기 효소의 활성을 감소시키는 것을 특징으로 하는 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-온 형(switch-on mode) 표적 핵산 효소의 활성 검출 또는 정량 방법.

58

삭제

59

청구항 59은(는) 설정등록료 납부시 포기되었습니다.제55항에 있어서, 상기 블로커 핵산은 표적 핵산 효소의 기질로서 사용되는 DNA 또는 RNA인 것을 특징으로 하는 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-온 형(switch-on mode) 표적 핵산 효소의 활성 검출 또는 정량 방법.

60

제55항에 있어서, 상기 핵산 중합효소는 Taq DNA 중합효소인 것을 특징으로 하는 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-온 형(switch-on mode) 표적 핵산 효소의 활성 검출 또는 정량 방법.

61

제55항에 있어서, 상기 프라이머 신장반응의 온도는 20∼30℃인 것을 특징으로 하는 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-온 형(switch-on mode) 표적 핵산 효소의 활성 검출 또는 정량 방법.

62

제55항에 있어서, 상기 신호발생 물질은 방사성 동위원소, 형광물질, 염료, 나노입자, 효소, 효소기질, 발광성 물질 및 전기화학적 작용기(electrochemical functional group)를 함유하는 물질로 구성된 군에서 선택된 물질로 표지된 것을 특징으로 하는 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-온 형(switch-on mode) 표적 핵산 효소의 활성 검출 또는 정량 방법.

63

제55항에 있어서, 상기 (c) 단계는 (b) 단계의 프라이머 신장반응에서 유래하는 신호를 검출 또는 정량함으로써 표적 핵산 효소의 활성을 분석하는 것을 특징으로 하는 핵산 중합효소의 활성을 이용한 스위치-온 형(switch-on mode) 표적 핵산 효소의 활성 검출 또는 정량 방법.

64

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