| 번호 | 청구항 |
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| 35 | 제22항 또는 제 23항의 탄화수소 생성능을 가지는 변이 대장균을 배양하여 알칸, 알켄, 알킨 및 방향족 탄화수소로 구성된 군에서 선택되는 탄화수소를 생성시킨 다음, 배양액으로부터 탄화수소를 회수하는 것을 특징으로 하는 알칸, 알켄, 알킨 및 방향족 탄화수소로 구성된 군에서 선택되는 탄화수소의 제조방법. |
| 36 | 제35항에 있어서, 상기 탄화수소는 펜타데칸, 헵타데칸, 옥테인, 노네인 및 노닌으로 이루어진 군에서 선택된 것을 특징으로 하는 탄화수소의 제조방법. |
| 1 | 당으로부터 지방 아실-acp(fatty acyl-acp) 합성 대사회로를 가지는 미생물에서, (a) 아실 코엔자임 A 디하이드로게나제(acyl coenzyme A dehydrogenase)를 코딩하는 유전자 및 DNA-바인딩 전사 듀얼 조절자(DNA-binding transcriptional dual regulator)를 코딩하는 유전자가 결실 또는 약화되어 있고, (b) (i) 지방 아실-acp(fatty acyl-acp)를 유리 지방산(free fatty acid)으로 전환시키는 효소(acyl-CoA thioesterase)를 코딩하는 유전자, (ii) 유리 지방산(free fatty acid)을 지방 아실-CoA(fatty acyl-CoA)로 전환시키는 효소(acetyl-CoA:acetoacetyl-CoA transferase 또는 acyl-coA synthetase)를 코딩하는 유전자, (iii) 지방 아실-CoA(fatty acyl-CoA)를 지방 알데하이드(fatty aldehyde)로 전환시키는 효소(fatty acyl-CoA reductase)를 코딩하는 유전자 및 (iv) 지방 알데하이드(fatty aldehyde)를 알칸(alkane)으로 전환시키는 효소(fatty aldehyde decarbonylase)를 코딩하는 유전자가 도입 또는 증폭되어 있는 것을 특징으로 하는 알칸, 알켄, 알킨 및 방향족 탄화수소로 구성된 군에서 선택되는 탄화수소 생성능을 가지는 변이 미생물. |
| 2 | 제1항에 있어서, 아실-CoA 신세타제(acyl-CoA synthetase)를 코딩하는 유전자의 네이티브 프로모터(native promoter) 및 롱-체인 지방산 외막 트랜스포터(long-chain fatty acid outer membrane transporter)를 코딩하는 유전자의 어테뉴에이터(attenuator)를 포함하는 네이티브 프로모터(native promoter)가 강력한 프로모터(strong promoter)로 추가적으로 치환되어 있고, 쇼트-체인 지방산 외막 트랜스포터(short-chain fatty acid outer membrane transporter)를 코딩하는 유전자가 추가적으로 도입되어 있는 것을 특징으로 하는 탄화수소 생성능을 가지는 변이 미생물. |
| 3 | 제1항에 있어서, fabDHG 오페론(operon)의 네이티브 프로모터(native promoter) 및 fabA 오페론(operon)의 네이티브 프로모터(native promoter)가 강력한 프로모터(strong promoter)로 추가적으로 치환되어 있는 것을 특징으로 하는 탄화수소 생성능을 가지는 변이 미생물. |
| 4 | 제1항에 있어서, 아세테이트 키나제 A(acetate kinase A) 효소를 코딩하는 유전자(ackA)가 추가적으로 결실되어 있는 것을 특징으로 하는 탄화수소 생성능을 가지는 변이 미생물. |
| 5 | 제1항에 있어서, 상기 미생물은 박테리아, 효모 및 곰팡이로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 탄화수소 생성능을 가지는 변이 미생물. |
| 6 | 제5항에 있어서, 상기 박테리아는 지방산 대사회로를 갖는 박테리아인 것을 특징으로 하는 탄화수소 생성능을 가지는 변이 미생물. |
| 7 | 제6항에 있어서, 상기 지방산 대사회로를 갖는 박테리아는 코리네박테리움 (Corynebacterium) 속, 브레비박테리움(Brevibacterium) 속 및 대장균으로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 탄화수소 생성능을 가지는 변이 미생물. |
| 8 | 제1항에 있어서, 상기 아실 코엔자임 A 디하이드로게나제(acyl coenzyme A dehydrogenase)를 코딩하는 유전자는 fadE 유전자인 것을 특징으로 하는 탄화수소 생성능을 가지는 변이 미생물. |
| 9 | 제1항에 있어서, 상기 DNA-바인딩 전사 듀얼 조절자(DNA-binding transcriptional dual regulator)를 코딩하는 유전자는 fadR 유전자인 것을 특징으로 하는 탄화수소 생성능을 가지는 변이 미생물. |
| 10 | 삭제 |
| 11 | 삭제 |
| 12 | 삭제 |
| 13 | 삭제 |
| 14 | 제2항에 있어서, 상기 아실-CoA 신세타제(acyl-CoA synthetase)를 코딩하는 유전자는 fadD이고, 쇼트-체인 지방산 외막 트랜스포터(short-chain fatty acid outer membrane transporter)를 코딩하는 유전자는 atoE인 것을 특징으로 하는 탄화수소 생성능을 가지는 변이 미생물. |
| 15 | 제2항에 있어서, 상기 롱-체인 지방산 외막 트랜스포터(long-chain fatty acid outer membrane transporter)를 코딩하는 유전자는 fadL인 것을 특징으로 하는 탄화수소 생성능을 가지는 변이 미생물. |
| 16 | 제1항에 있어서, 상기 지방 아실-acp(fatty acyl-acp)를 유리 지방산(free fatty acid)으로 전환시키는 효소를 코딩하는 유전자는 tesA(acyl-CoA thioesterase를 코딩하는 유전자)인 것을 특징으로 하는 탄화수소 생성능을 가지는 변이 미생물. |
| 17 | 제1항에 있어서, 상기 유리 지방산(free fatty acid)을 지방 아실-CoA(fatty acyl-CoA)로 전환시키는 효소를 코딩하는 유전자는 atoDA(acetyl-CoA : acetoacetyl-CoA transferase를 코딩하는 유전자) 또는 fadD(acyl-CoA synthetase를 코딩하는 유전자)인 것을 특징으로 하는 탄화수소 생성능을 가지는 변이 미생물. |
| 18 | 제1항에 있어서, 상기 지방 아실-CoA(fatty acyl-CoA)를 지방 알데하이드(fatty aldehyde)로 전환시키는 효소를 코딩하는 유전자는 luxC(fatty acyl-CoA reductase를 코딩하는 유전자)인 것을 특징으로 하는 탄화수소 생성능을 가지는 변이 미생물. |
| 19 | 제1항에 있어서, 상기 지방 알데하이드(fatty aldehyde)를 알칸(alkane)으로 전환시키는 효소를 코딩하는 유전자는 CER1(fatty aldehyde decarbonylase 1을 코딩하는 유전자)인 것을 특징으로 하는 탄화수소 생성능을 가지는 변이 미생물. |
| 20 | 제1항 내지 제9항 및 제14항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 탄화수소는 펜타데칸, 헵타데칸, 옥테인, 노네인 및 노닌으로 이루어진 군에서 선택된 것을 특징으로 하는, 탄화수소 생성능을 가지는 변이 미생물. |
| 21 | 제2항 또는 제3항에 있어서, 상기 강력한 프로모터(strong promoter)는 trc 프로모터(trc promoter), tac 프로모터(tac promoter), T7 프로모터(T7 promoter), lac 프로모터(lac promoter) 및 trp 프로모터(trp promoter)로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 탄화수소 생성능을 가지는 변이 미생물. |
| 33 | 제1항 내지 제9항 및 제14항 내지 제19항 중 어느 한 항의 탄화수소 생성능을 가지는 변이 미생물을 배양하여 알칸, 알켄, 알킨 및 방향족 탄화수소로 구성된 군에서 선택되는 탄화수소를 생성시킨 다음, 배양액으로부터 탄화수소를 회수하는 것을 특징으로 하는 알칸, 알켄, 알킨 및 방향족 탄화수소로 구성된 군에서 선택되는 탄화수소의 제조방법. |
| 34 | 제33항에 있어서, 상기 탄화수소는 펜타데칸, 헵타데칸, 옥테인, 노네인 및 노닌으로 이루어진 군에서 선택된 것을 특징으로 하는 탄화수소의 제조방법. |
| 22 | 당으로부터 지방 아실-acp(fatty acyl-acp) 합성 대사회로를 가지는 대장균에서, (a) 아실 코엔자임 A 디하이드로게나제(acyl coenzyme A dehydrogenase)를 코딩하는 유전자(fadE) 및 DNA-바인딩 전사 듀얼 조절자(DNA-binding transcriptional dual regulator)를 코딩하는 유전자(fadR)가 결실 또는 약화되어 있고, (b) 아실-CoA 신세타제(acyl-CoA synthetase)를 코딩하는 유전자(fadD)의 네이티브 프로모터(native promoter) 및 롱-체인 지방산 외막 트랜스포터(long-chain fatty acid outer membrane transporter)를 코딩하는 유전자(fadL)의 에테뉴에이터(attenuator)를 포함하는 네이티브 프로모터(native promoter)가 강력한 프로모터(strong promoter)로 치환되어 있으며, (c) (i) 지방 아실-acp(fatty acyl-acp)를 유리 지방산(free fatty acid)으로 전환시키는 효소(acyl-CoA thioesterase), (ii) 유리 지방산(free fatty acid)를 지방 아실-CoA(fatty acyl-CoA)로 전환시키는 효소(acetyl-CoA:acetoacetyl-CoA transferase 또는 acyl-coA synthetase), (iii) 지방 아실-CoA(fatty acyl-CoA)를 지방 알데하이드(fatty aldehyde)로 전환시키는 효소(fatty acyl-CoA reductase) 및 (iv) 지방 알데하이드(fatty aldehyde)를 알칸(alkane)으로 전환시키는 효소(fatty aldehyde decarbonylase)를 코딩하는 유전자가 도입 또는 증폭되어 있는 알칸, 알켄, 알킨 및 방향족 탄화수소로 구성된 군에서 선택되는 탄화수소 생성능을 가지는 변이 대장균. |
| 23 | 당으로부터 지방 아실-acp(fatty acyl-acp) 합성 대사회로를 가지는 대장균에서, (a) 아실 코엔자임 A 디하이드로게나제(acyl coenzyme A dehydrogenase)를 코딩하는 유전자 (fadE) 및 DNA-바인딩 전사 듀얼 조절자(DNA-binding transcriptional dual regulator)를 코딩하는 유전자(fadR)가 결실 또는 약화되어 있고, (b) fabDHG 오페론(operon)의 네이티브 프로모터(native promoter) 및 fabA 오페론(operon)의 네이티브 프로모터(native promoter)가 강력한 프로모터(strong promoter)로 치환되어 있으며, (c) (i) 지방 아실-acp(fatty acyl-acp)를 유리 지방산(free fatty acid)으로 전환시키는 효소(acyl-CoA thioesterase), (ii) 유리 지방산(free fatty acid)을 지방 아실-CoA(fatty acyl-CoA)로 전환시키는 효소(acetyl-CoA:acetoacetyl-CoA transferase 또는 acyl-coA synthetase), (iii) 지방 아실 CoA(fatty acyl-CoA)를 지방 알데하이드(fatty aldehyde)로 전환시키는 효소(fatty acyl-CoA reductase) 및 (iv) 지방 알데하이드(fatty aldehyde)를 알칸(alkane)으로 전환시키는 효소(fatty aldehyde decarbonylase)를 코딩하는 유전자가 도입 또는 증폭되어 있는 알칸, 알켄, 알킨 및 방향족 탄화수소로 구성된 군에서 선택되는 탄화수소 생성능을 가지는 변이 대장균. |
| 24 | 제22항 또는 제23항에 있어서, 상기 탄화수소는 펜타데칸, 헵타데칸,옥테인, 노네인 및 노닌으로 이루어진 군에서 선택된 것을 특징으로 하는, 탄화수소 생성능을 가지는 변이 대장균. |
| 25 | 당으로부터 지방 아실-acp(fatty acyl-acp) 합성 대사회로를 가지는 미생물에서, (a) 아실 코엔자임 A 디하이드로게나제(acyl coenzyme A dehydrogenase)를 코딩하는 유전자 및 DNA-바인딩 전사 듀얼 조절자(DNA-binding transcriptional dual regulator)를 코딩하는 유전자를 결실 또는 약화시키고, (b) (i) 지방 아실-acp(fatty acyl-acp)를 유리 지방산(free fatty acid)으로 전환시키는 효소(acyl-CoA thioesterase)를 코딩하는 유전자, (ii) 유리 지방산(free fatty acid)를 지방 아실-CoA(fatty acyl-CoA)로 전환시키는 효소(acetyl-CoA:acetoacetyl-CoA transferase 또는 acyl-coA synthetase)를 코딩하는 유전자, (iii) 지방 아실-CoA(fatty acyl-CoA)를 지방 알데하이드(fatty aldehyde)로 전환시키는 효소(fatty acyl-CoA reductase)를 코딩하는 유전자 및 (iv) 지방 알데하이드(fatty aldehyde)를 알칸(alkane)으로 전환시키는 효소(fatty aldehyde decarbonylase)를 코딩하는 유전자를 도입 또는 증폭시키는 것을 특징으로 하는 알칸, 알켄, 알킨 및 방향족 탄화수소로 구성된 군에서 선택되는 탄화수소 생성능을 가지는 지방산 대사회로를 갖는 변이 미생물의 제조방법. |
| 26 | 제25항에 있어서, 아실-CoA 신세타제(acyl-CoA synthetase)를 코딩하는 유전자의 네이티브 프로모터(native promoter) 및 롱-체인 지방산 외막 트랜스포터(long-chain fatty acid outer membrane transporter)를 코딩하는 유전자의 에테뉴에이터(attenuator)를 포함하는 네이티브 프로모터(native promoter)를 강력한 프로모터(strong promoter)로 추가적으로 치환시키고, 쇼트-체인 지방산 외막 트랜스포터(short-chain fatty acid outer membrane transporter)를 코딩하는 유전자를 추가적으로 도입시키는 것을 특징으로 하는 탄화수소 생성능을 가지는 변이 미생물의 제조방법. |
| 27 | 제25항에 있어서, fabDHG 오페론(operon)의 네이티브 프로모터(native promoter) 및 fabA 오페론(operon)의 네이티브 프로모터(native promoter)를 강력한 프로모터(strong promoter)로 추가적으로 치환시키는 것을 특징으로 하는 탄화수소 생성능을 가지는 변이 미생물의 제조방법. |
| 28 | 제25항에 있어서, 아세테이트 키나제 A(acetate kinase A) 효소를 코딩하는 유전자(ackA)를 추가적으로 결실시키는 것을 특징으로 하는 탄화수소 생성능을 가지는 변이 미생물의 제조방법. |
| 29 | 제25항에 있어서, 상기 미생물은 박테리아, 효모 및 곰팡이로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 탄화수소 생성능을 가지는 변이 미생물의 제조방법. |
| 30 | 제29항에 있어서, 상기 박테리아는 지방산 대사회로를 갖는 박테리아인 것을 특징으로 하는 탄화수소 생성능을 가지는 변이 미생물의 제조방법. |
| 31 | 제30항에 있어서, 상기 지방산 대사회로를 갖는 박테리아는 코리네박테리움 (Corynebacterium) 속, 브레비박테리움(Brevibacterium) 속 및 대장균으로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 탄화수소 생성능을 가지는 변이 미생물의 제조방법. |
| 32 | 제25항에 있어서, 상기 탄화수소는 펜타데칸, 헵타데칸, 옥테인, 노네인 및 노닌으로 이루어진 군에서 선택된 것을 특징으로 하는 탄화수소 생성능을 가지는 변이 미생물의 제조방법. |