아플라톡신 G1에 특이적으로 결합하는 DNA 앱타머 및 이의 용도

TRL 4
2023 등록

아플라톡신 G1이라는 곰팡이독소만 골라 붙잡는 DNA 앱타머를 이용해, 식품·사료·환경 시료 속 독소를 색 변화로 확인하거나 분리할 수 있는 기술입니다. 금 나노입자 기반 비색 분석과 앱타머 고정 비드·컬럼 구성을 통해 복잡한 분석 장비 의존도를 낮춘 선택적 검출·제거 수단을 제공하는 특허입니다.

특허 개요

본 특허는 식품과 사료 등에 포함될 수 있는 아플라톡신 G1을 선택적으로 찾아내거나 분리하는 DNA 앱타머 기반 검출·분리 기술입니다. 변형 GO-SELEX로 AFG1에 결합하는 DNA 서열을 선별하고, 이를 금 나노입자 표면에 고정해 표적 결합에 따른 응집·색 변화로 검출하거나 자성비드 및 비드 컬럼에 적용해 표적을 포획·분리합니다. 선별된 앱타머는 서열번호 2 또는 서열번호 3을 포함하며, 금 나노입자 비색센서와 앱타머 고정 비드 컬럼으로 구현할 수 있습니다.

  • 핵심 기능

그래핀 옥사이드와 AFG1의 비특이 결합을 이용하는 변형 GO-SELEX로 AFG1 결합 DNA를 선별하고, AFB1·AFB2를 카운터 타깃으로 도입해 선택성을 평가합니다. 선별 앱타머는 금 나노입자 응집에 따른 색도·UV 흡광도 변화로 AFG1을 검출하거나, 고정화 비드가 충진된 컬럼에서 시료 내 AFG1을 포획·분리합니다.

  • 차별 강점

기존 ELISA, 크로마토그래피 및 분광 분석은 장비가 갖춰진 실험실, 숙련 인력, 분석 시간 또는 유해 용매가 필요할 수 있습니다. 본 기술은 시험관 내 합성이 가능한 DNA 앱타머를 인식물질로 사용하고 금 나노입자 색도 신호를 결합해 간편한 현장 선별검사 가능성을 제시하며, AFG1-3은 공지 앱타머 A26·A34과 비교 시 AFG1에 대한 민감도와 특이도에서 차이를 보였습니다.

  • 활용 범위

기술·연구 측면에서는 식품·사료 안전성 검사, 농산물·견과류의 곰팡이독소 선별, 환경 시료·폐기물 모니터링, 앱타머 기반 바이오센서 연구에 활용 가능하며, AFG1 선택적 분리 공정으로도 확장할 수 있습니다. 사업 측면에서는 금 나노입자 비색 진단 키트, 현장형 식품안전 검사 제품, 사료 품질관리 솔루션, 앱타머 고정 비드·컬럼 기반 정제 제품으로 확장할 수 있습니다.

연구 개발 단계

TRL 1
기초 원리
TRL 2
개념 정립
TRL 3
개념 검증
TRL 4
실험실 검증
TRL 5
유사 환경
TRL 6
시제품
TRL 7
실증
TRL 8
인증완료
TRL 9
사업화
TRL4선별 앱타머와 금 나노입자 기반 색도·UV 흡광도 분석으로 AFG1 검출 가능성과 표적 선택성을 확인한 단계입니다.
현재 검증 내용

변형 GO-SELEX로 확보한 AFG1-1~AFG1-7 중 AFG1-2와 AFG1-3의 결합력을 평가하고, 금 나노입자 기반 색도·UV 흡광도 분석으로 AFG1 검출 가능성을 확인했습니다. AFG1-3은 AFB1·AFB2 및 공지 앱타머 A26·A34와의 비교에서 AFG1 선택 반응을 보였으나, 실제 식품·사료 복합 시료에서의 정량 성능과 현장 적용성은 추가 확인이 필요합니다.

검증 환경

- 분석 시료: 변형 GO-SELEX로 선별한 AFG1-1~AFG1-7, AFG1-2 및 AFG1-3
- 비교 항목: AFB1·AFB2 및 공지 앱타머 A26·A34

- 분석 조건: 금 나노입자 2.2nM, 앱타머 1uM, 상온 각 30분 반응, NaCl 1M 응집 유도, 표적별 20nM 특이도 시험

현재 성과

성능·효과
금 나노입자 기반 AFG1 검출 가능성

AFG1-2 및 AFG1-3과 금 나노입자를 이용해 AFG1을 검출할 수 있음을 확인했습니다. 앱타머와 표적의 결합에 따른 금 나노입자 응집 및 색 변화, UV 흡광도 변화를 검출 신호로 활용하는 방식입니다. 실제 식품·사료 시료에서의 정량 성능은 PoC로 확인이 필요합니다.

검증·신뢰
표적·비표적 및 공지 앱타머 비교 검증

총 8회의 선별과정과 클로닝·염기분석을 통해 7종의 AFG1 특이 핵산 구조체를 확보했습니다. 금 나노입자 기반 UV 흡광도·색도 분석에서 AFB1·AFB2를 비교 항목으로 두고, AFG1-3과 공지 앱타머 A26·A34의 민감도 및 특이도를 비교 평가했습니다.

차별성·독창성
AFG1 선택성을 높인 앱타머 선별 및 적용 구성

AFG1-3은 AFG1에만 특이적으로 반응했으며, 비교된 A26 및 A34은 AFB1과 AFB2에도 반응했습니다. 그래핀 옥사이드 기반 변형 GO-SELEX로 앱타머를 선별하고, 이를 금 나노입자 비색 검출과 앱타머 고정 비드 컬럼 분리에 함께 적용하도록 구성한 점이 차별성입니다.

상용화까지 남은 부분

1

실제 식품·사료 등 복합 매트릭스에서의 정량 성능과 간섭 영향 검증

2

시료별 회수율·재현성 및 앱타머·금 나노입자 시약의 저장 안정성 평가

3

현장 사용을 위한 키트 제형·판독 방식·사용 절차의 표준화 및 실증

기술 이전 형태·도입 과정

기술양도
전용실시권
통상실시권
공동 과제 수행
기술지도·자문

도입은 이렇게 진행됩니다.

1

검토 미팅

귀사 상황·데이터 구조 기준으로 적합성을 논의합니다. 자료 검토만으로 끝나도 됩니다.

2

PoC 공동 검증

연구팀 동행 하에 귀사 데이터 기준 재학습·성능을 확인합니다.

3

라이센싱 계약

PoC 결과를 기반으로 희망 형태(실시권·공동연구 등)를 협의합니다.

4

기술지도·후속

도입 초기 기술지도, 필요 시 후속 공동연구·정부과제 연계까지 진행합니다.

특허 정보

발명의 명칭(KR)

아플라톡신 G1에 특이적으로 결합하는 DNA 앱타머 및 이의 용도

발명의 명칭(EN)

DNA aptamer specifically binding to Aflatoxin G1 and use thereof

출원번호

10-2020-0091838 (2020.07.23)

공개번호

1020220014363 (2022.02.07)

등록번호

1025030210000 (2023.02.20)

발명자

구만복, 토아 트란 티 탄

권리자

고려대학교 산학협력단

출원인

고려대학교 산학협력단

문의

담당자이준구
이메일jg.lee@rndcircle.io
연락처010-8978-6417