폐렴구균 결합백신(pneumococcal conjugate vaccines, PCV7 및 PCV13) 도입 이후 Streptococcus pneumoniae에 의한 침습성 질환의 보고는 감소해 왔다. 그러나 백신이 다루지 않는 S. pneumoniae 침습성 질환의 발생률은 소아와 성인에서 증가하여 전 세계적인 공중보건 문제가 되고 있다. 이전에 우리는 PCV13 혈청형 특이적 분석법을 위해 루프매개 등온증폭(loop-mediated isothermal amplification, LAMP) 방법을 확립하였다. 본 연구에서는 LAMP 방법을 이용하여 23가 폐렴구균 다당백신(23-valent pneumococcal polysaccharide vaccine, PPSV23)에서 혈청형을 검출하는 신속하고 단순하며 비용효과적인 분석법을 개발하였다. 본 연구에서는 S. pneumoniae의 혈청형 2, 8, 9N, 10A, 11A, 12F, 15B, 17F, 20, 22F, 33F에 대한 LAMP 프라이머 세트를 개발하였다. LAMP 분석법의 반응성, 특이성 및 민감도는 기존 PCR 분석법과 비교하여 결정하였다. 침습성 폐렴구균 질환 환자에서의 임상 적용 가능성은 세균 유전체 DNA를 첨가한 혈액 시료를 사용하여 LAMP 분석법의 검출한계를 설정함으로써 검증하였다. 각 LAMP 분석법의 특이성은 폐렴구균 균주의 44개 혈청형을 이용하여 결정하였다. 민감도는 LAMP 분석법이 반응당 100 copies인 반면 PCR 분석법은 반응당 103~106 copies였다. DNA를 첨가한 혈액 시료를 사용하되 혈청형 22F를 표적하는 LAMP 분석법(반응당 103 copies)을 제외했을 때, LAMP 분석법의 검출한계는 주형으로 정제 DNA를 사용했을 때와 유사하게 반응당 102 copies였다. 이는 PCR 분석법에서의 반응당 103~>106 copies와 비교된다. 결론적으로, 여러 국가에서 사용하기 위한 PPSV23 표적 혈청형 검출용 신속하고 단순한 LAMP 기반 분석법을 개발하였다. 본 연구는 PPSV23 혈청형을 식별하기 위한 LAMP 기반 분석법에 대한 최초 보고이다. 감시 및 백신 효능 연구를 통해 본 분석법에 대한 추가 평가가 필요하다.

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