)는 ELP 응집을 유도하여 비드(beads) 사이에 표적 단백질을 물리적으로 가둔다. 이어지는 강한 세척(고염/이미다졸)은 잔류 오염물을 제거한다. 마지막으로 저염의 차가운 완충액을 이용해 냉각하면 응집이 역전되어, 정제된 표적 단백질이 용출된다. 이 방법은 고급 크로마토그래피 시스템이 필요 없으면서도 이중 기전에 의해 높은 순도를 달성한다: (1) IMAC 친화성 및 (2) 온도 의존적 물리적 포획. ELP의 가역적 상전이는 단순하면서도 효율적인 정제 플랫폼을 제공하며, 특히 다루기 어려운 단백질의 실험실 규모 생산에 유용하다. 핵심 특징 • 본 프로토콜은 표적 단백질의 C-말단에 엘라스틴 유사 폴리펩타이드 태그(elastin-like polypeptide tag)가 필요하다. • 본 프로토콜은 표적 단백질의 N-말단에 His-Tag이 필요하다. • 본 프로토콜은 크로마토그래피 진행을 실시간으로 시각적으로 모니터링할 수 있도록 색을 띠거나(chromogenic) 발색하는 단백질을 사용해야 한다. • 본 프로토콜은 두 가지 서로 다른 온도에서 Ni 결합 레진을 수동으로 조작함으로써 고도로 순수한 단백질을 산출한다.

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