벤드로플루메티아지드(bendroflumethiazide), 부메타나이드(bumetanide), 클로르탈리돈(chlorthalidone)과 같은 이뇨제는 금지 약물의 존재를 은폐할 가능성, 체중 감량 유도, 공정성 저해, 말의 중대한 건강 위험을 초래할 수 있으므로 경마 산업에서 금지된 물질이다. 본 연구는 초고성능 액체크로마토그래피-사중극자-오비트랩 질량분석기(UHPLC-Q Exactive MS)를 이용하여 말의 혈장(equine plasma)에서 8종 이뇨제를 동시 검출하기 위한 방법의 개발을 제시한다. 이 방법은 스크리닝 검출 한계(SDL) 1 ng/mL, 총 분석 시간 4.6분 미만을 달성하였다. 시료 전처리는 비극성 탄소 수지를 포함한 NEXUS 카트리지를 사용한 고체상 추출(SPE)을 수행하였다. 크로마토그래피 분리는 Luna Omega HyperSil-High Strength (HSS) C18 컬럼에서 이루어졌으며, 용리 기울기는 증류수 중 5 mM 포름산암모늄(pH 3.0)과 아세토니트릴 중 0.1% 포름산을 0.4 mL/min의 유속으로 구성하였다. 이 방법은 기준선에서 분리된 피크와 반복성의 일관성(n = 10)으로 확인되어 특이성과 정확성을 보장하였다. 회수율은 토라세미드(torsemide) 9.3 ± 2.5%에서 트리암테렌(triamterene) 62.2 ± 8.3%까지였으며, SDL은 트리암테렌에 대해 0.1 ng/mL, 기타 분석물에 대해 1 ng/mL였다. 1 ng/mL의 농도에서 8개의 모든 시험 시료가 검출되었다. 본 방법은 경주 전 검사에 적용되었으며, 약물 남용을 탐지하고 경마에서의 공정한 경쟁을 보장하기 위한 예방적 조치로서의 실제적 적용 가능성을 보여주었다. 개발된 UHPLC-Q Exactive MS 방법은 말 스포츠에서의 도핑 통제를 위한 유용한 도구를 제공하며, 경주 및 수의 분야 모두에 대한 향후 약물검사 프로토콜에 구현될 수 있을 것으로 기대된다.

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