1. 특이환경의 미생물 소재 확보 및 동정
▸ 특이환경 시료채집
- 바이오매스 및 특이환경 퇴적물 등 확보
▸ 특이환경 유래 미생물의 배양 및 분리 분리
▸ 유전자 분석을 통한 분리된 미생물 동정
2. 생리활성 미생물 소재 선정
▸ 특이환경 유래 미생물의 소량배양
▸ 미생물 배양액 추출물 및 분획물 제조
▸ 제조된 분획물의 생리활성(항염활성 및 항생활성) 검색
▸ 분획물에 대한 융합적 대사체 분석 및 정밀연구 대상 미생물 선정
- LC-DAD-ELSD/MS 데이터기반 dereplication
- Bioactivity & Feature based molecular networking 기반 잠재적 생리활성 천연물 도출
▸ 선정된 미생물의 대량배양 및 추출물 제조
3. 천연물 구조 결정
▸ 잠재적 생리활성 천연물의 분리 및 정제
▸ 정제된 천연물의 평명구조 결정
- Small Molecule Accurate Recognition Technique을 이용한 구조 결정
- 각종 분광정보 분석을 통한 평면 구조 결정
▸ 정제된 천연물의 입체구조 결정
- 정밀 NMR 데이터 분석(NOESY, JBCA)을 통한 상대입체구조 결정
- 유도체화 법(Mosher 법, Marfey 법, PGME법 등)을 통한 절대 입체구조 결정
- 분광정보 (NMR data, ECD data, VCD data, optical rotation 등) 계산을 통한 절대 입체구조 결정
▸ 정제된 천연물의 in vitro 생리활성 확인
▸ 생리활성 천연물의 세포독성 확인
4. 생리활성 천연물 대량 확보
▸ 활성 천연물 생산 미생물의 배양법 최적화
▸ 활성 천연물 대량정제법 또는 합성법 확립
▸ in vivo 실험을 위한 천연물의 대량 확보
5. 천연물의 정밀활성 검정
▸ 활성 천연물의 in vivo 활성 검정
▸ 활성 천연물의 작용기전 연구
▸ 활성 천연물의 대사 안정성 연구
▸ 융합적 대사체 분석기법을 이용한 생리활성 천연물의 대사과정 연구