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인용수 26
·2023
A dual gene-specific mutator system installs all transition mutations at similar frequencies in vivo
Daeje Seo, Bonghyun Koh, Ga-eul Eom, Hye Won Kim, Seokhee Kim
IF 16.6 (2023) Nucleic Acids Research
초록

표적화된 생체 내 과돌연변이 유도는 DNA의 동시적 다양화와 선택을 통해 단백질의 유도진화(directed evolution)를 가속한다. 염기 탈아미노화효소와 T7 RNA 중합효소를 융합한 단백질을 사용하는 시스템은 유전자 특이적 표적화를 제공하지만, 변이 스펙트럼은 C:G→T:A 돌연변이만을 단독 또는 우세하게 나타내는 것으로 제한되어 왔다. 여기서는 모든 전이(transition) 돌연변이(C:G→T:A 및 A:T→G:C)를 유사한 빈도로 도입하는 새로운 유전자 특이적 과돌연변이 시스템인 eMutaT7transition을 기술한다. 두 개의 변이원(mutator) 단백질을 사용하여, 효율적인 두 가지 탈아미노화효소인 PmCDA1과 TadA-8e를 각각 T7 RNA 중합효소에 별도로 융합함으로써, 80시간의 생체 내 변이 유도(in vivo mutagenesis) 동안 1.3 kb 유전자에서 충분히 높은 빈도(∼6.7개의 치환)로 C:G→T:A 및 A:T→G:C 치환이 유사한 수로 관찰되었다. eMutaT7transition 매개 TEM-1 진화(항생제 내성)를 통해 임상 분리주(clinical isolates)에서 발견되는 다수의 돌연변이를 생성하였다. 전반적으로 높은 돌연변이 빈도와 더 넓은 변이 스펙트럼을 바탕으로, eMutaT7transition은 유전자 특이적 생체 내 과돌연변이를 위한 잠재적인 1차(first-line) 방법이다.

*본 초록은 AI를 통해 원문을 번역한 내용입니다. 정확한 내용은 하기 원문에서 확인해주세요.

키워드
BiologySomatic hypermutationGeneticsMutagenesisGenePolymeraseMutationTransition (genetics)Molecular biologyRNA polymerase
타입
Article
IF / 인용수
16.6 / 26
게재 연도
2023