PDF 파일 - 1.8MB, GSH는 STC로 유도된 중성 SMase 활성화를 억제하지만, 사람 백혈병 및 대장암 세포에서 STC에 의한 Fas 및 산성 SMase의 활성화는 억제하지 않는다. (A) HL-60 세포를 GSH 유무 하에 STC(0.3 μM)로 2시간 처리하였다. 투과화(permeabilization) 후, 각각 PE-anti-acid SMase, PE-anti-neutral SMase 또는 PE-anti-Fas 및 FITC-anti-ceramide 항체로 염색하였다. (B) K562 세포를 GSH 유무 하에 STC(0.5 μM)로 2시간 처리하였다. 투과화 후, 각각 PE-anti-neutral SMase, PE-anti-acid SMase 또는 PE-anti-Fas 및 FITC-anti-ceramide 항체로 염색하였다. (C) SNU-C4 세포를 GSH 유무 하에 STC로 24시간 처리하였다. 투과화 후, 각각 PE-anti-neutral SMase, PE-anti-acid SMase 또는 PE-anti-Fas 및 FITC-anti-ceramide 항체로 염색하였다. (D) 아울러, GSH 유무 하에 STC로 6시간 처리한 HL-60 및 K562 세포의 전체 용해물(whole lysates)을 준비하고, 상기와 같이 Western blot으로 분석하였다. 각 경우에 단백질 30 μg을 SDS-PAGE로 분리한 후, 해당 항체로 블롯을 프로빙하였다. 이후 블롯을 스트립(strip)한 다음 동일한 로딩 및 전이를 확인하기 위해 beta-actin을 표적으로 하는 항체로 재프로빙하였다.
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