서론: 결핵(TB)의 신속하고 정확한 진단은 이환율과 사망률을 감소시키고 전파 위험을 줄이는 데 중요하다. 따라서 Mycobacterium tuberculosis(MTB)에 대한 실시간 PCR 기반 검사와 같은 분자 진단 방법이 TB 진단에 널리 사용되어 왔다. 루프 매개 등온 증폭(loop-mediated isothermal amplification, LAMP) 검사는 감염성 질환에 대한 단순하고 빠르며 비용 효율적인 등온 핵산 증폭 진단 검사로 여겨져 왔다. 본 연구에서는 MTB와 비결핵성 마이코박테리아(non-tuberculosis mycobacterium, NTM)의 감별 검출을 위한 자체 개발(in-house) 다중(multiplex) LAMP 검사를 설계하고, 임상 검체를 이용하여 해당 검사를 평가하였다. 재료 및 방법: 다중 LAMP 검사에는 두 세트의 특이적 프라이머를 설계하였다. 첫 번째 세트는 MTB의 IS6110 유전자에 특이적이었고, 두 번째 세트는 NTM을 포함한 마이코박테리아 종의 rpoB 유전자에 대해 범용적이었다. MTB는 두 프라이머 세트 모두에서 양성 반응을 보일 때 확인하였고, NTM은 MTB 특이 반응 없이 두 번째 프라이머 세트에서만 양성 반응을 보일 때 동정하였다. 다중 LAMP 검사를 평가하기 위해 총 333개의 임상 검체를 분석하였다. 임상 검체는 195개의 양성 검체(72 MTB 및 123 NTM)와 138개의 음성 검체로 구성되었다. 모든 검체는 MTB 및 NTM에 대해 실시간 PCR로 양성 또는 음성을 확인하였다. 다중 LAMP 검사에 대한 분석적 민감도와 특이도는 항산균 염색 및 배양 방법과 비교하여 평가하였다. 결과: 123개의 NTM 검체 중 121개가 NTM으로 동정되었으며, 다중 LAMP 검사에서 72/72 MTB가 MTB로 동정되었다. 위음성 반응은 Candida spp.의 동시 감염을 동반한 NTM 양성 검체 2개에서만 관찰되었다. 138개의 모든 음성 검체는 MTB 및 NTM 모두에 대해 음성으로 동정되었다. 다중 LAMP 검사의 분석적 민감도는 MTB에 대해 100%(72/72)였고 NTM에 대해 98.4%(121/123)였다. 또한 검사의 특이도는 전체에 대해 100%(138/138)였다. 결론: 새로 설계한 MTB 및 NTM 다중 LAMP 검사는 분리된 MTB를 검출하기 위한 기존에 발표된 자료와 비교할 때 상대적으로 양호한 민감도를 보였다. 본 다중 LAMP 검사는 수용 가능한 민감도 범위 내에서 MTB와 NTM을 신속하게 검출하고 감별하는 데 유용한 도구가 될 것으로 기대된다.

인플루엔자는 인플루엔자 바이러스에 의해 유발되는 급성 호흡기 질환으로, 계절성 유행과 팬데믹으로 인해 상당한 이환율과 사망률이 발생함에 따라 전 세계적인 보건 및 경제적 문제를 야기한다. 인플루엔자 바이러스를 검출하기 위한 민감하고 편리한 방법론은 임상적 치료 및 감염관리뿐만 아니라 역학 조사에도 중요하다. 본 연구에서는 5' 역방향 루프( LF 또는 LB ) 프라이머로 연결된 quencher/형광 올리고뉴클레오타이드를 이용하는 다중(reverse transcription loop-mediated isothermal amplification; RT-LAMP) 방법을 개발하여, 인플루엔자 바이러스의 두 아형(인플루엔자 A [A/H1 및 A/H3]와 인플루엔자 B)을 검출하고자 하였다. 다중 RT-LAMP 분석의 검출 한계는 인플루엔자 A의 경우 RNA 10^3 copies, 인플루엔자 B의 경우 RNA 10^2 copies였다. 다중 인플루엔자 A/B/IC RT-LAMP 분석의 민감도는 임상 검체에서 각각 인플루엔자 A 94.62%, 인플루엔자 B 97.50%였다. 다중 인플루엔자 A/B/IC RT-LAMP 분석의 특이도는 인플루엔자 A, 인플루엔자 B 및 건강한 임상 검체에서 각각 100%였다. 또한, 다중 인플루엔자 A/B/IC RT-LAMP 분석은 다른 호흡기 바이러스와의 교차반응을 보이지 않았다.