면역세포-면역사이토카인(immunocytokine)은 항-PD-1 항체를 인터루킨-2(IL-2)와 융합한 형태로, PD-(L)1 억제제에 대한 내성을 극복하는 임상적 치료 잠재력이 입증되었다. 그러나 임상 반응률은 다양하게 나타나, 특히 PD-1 차단에 대한 1차 저항성을 보이면서 LAG-3의 높은 발현을 동반하는 종양에서 향상된 효능이 요구된다. 축적되는 증거에 따르면 주요 면역 체크포인트인 LAG-3는 PD-1과 상승적으로 작용하여 T 세포의 소진(exhaustion)을 촉진하며, LAG-3와 PD-1의 동시 차단은 CD8+ T 세포 및 Tregs를 재프로그래밍하여 항종양 면역을 강화할 수 있다. 여기에서 우리는 Fc-음소거(Fc-silencing)를 포함하는 새로운 설계를 가진 삼특이(tri-specific) 면역사이토카인인 AR166을 제시한다. AR166은 PD-1 및 LAG-3의 이중 차단을 제공하는 동시에 최적화된 IL-2 변이체(IL-2v)를 통해 PD-1 표적 CD8+ T 세포 활성을 유도하도록 설계되었다. 환자 유래 샘플은 유세포분석(flow cytometry)과 IHC로 프로파일링하였다. PD-1×LAG-3 이중특이(bispecific) 활성 및 IL-2v의 cis-작용은 PD-1/PD-L1 및 LAG-3/MHC II 차단 분석과, PD-1 및/또는 LAG-3 의존적 CD8+ T 세포 pSTAT5 신호전달을 통해 평가하였다. Fc-음소거는 ADCC, ADCP 및 CDC 분석을 사용하여 평가하였다. 반복적으로 자극된 PBMC를 종양 세포와 공동 배양하여 AR166 존재 하에서 T 세포 증식과 활성화를 확인하였다. 환자 유래 샘플에 AR166을 처리한 후 면역세포 프로파일링을 수행하였다. 항종양 효능은 종양 보유(≥300 mm3) 인간화 동계(humanized syngeneic) 마우스 모델에서 평가하였으며, 종양 침윤 림프구를 프로파일링하였다. 완전 반응자를 종양 세포로 재도전(rechallenge)하여 기억 반응을 평가하였다. 약동학 및 안전성 프로파일은 hIL-2Rαβγ knock-in 마우스와 cynomolgus 원숭이에서 분석하였다. 환자 유래 종양 샘플에서 PD-1 및 LAG-3 발현을 확인하였다. AR166은 IL-2v가 PD-1 및/또는 LAG-3에 고정(anchored)되었을 때에만 cis-활성을 보이는 가운데, PD-1/PD-L1 및 LAG-3/MHC II 경로를 효과적으로 억제하였다. Fc-음소거 평가는 Fc 의존적 효과 기능이 최소함을 보여주었다. AR166은 시험관 내 T 세포 소진 모델에서 PD-1xIL-2v 경쟁자(competer) 대비 더 강한 T 세포 증식과 활성을 유도하였고, 환자 유래 CD8+ T 세포에서도 유사한 결과가 관찰되었다. AR166은 높은 LAG-3 발현을 동반한 PD-1 내성을 재현하는 인간화 마우스 모델에서 항-PD-1 및 PD-1xIL-2v 경쟁자에 비해 현저한 종양 성장 억제를 보였으며, 면역 프로파일링에서는 PD-1+TCF1+CD8+ 줄기양(stem-like) T 세포의 신속한 확장을 확인하였다. AR166은 종양 재도전 모델에서 지속적인 종양 퇴행을 유도하여 종양-특이적 면역 기억을 시사하였다. AR166은 마우스와 cynomolgus 원숭이 모두에서 유리한 안전성과 약동학 프로파일을 달성하여 넓은 치료 창을 뒷받침하였다. 본 연구 결과는, PD-1xLAG-3xIL-2v 삼특이 면역사이토카인인 AR166이 우수한 안전성과 함께 PD-1 억제제 및 PD-1xIL-2v 모두의 효능을 능가할 수 있음을 보여준다. 참고문헌 형식: Jaeho Song, Seon-mi Yu, Jae-Seok Lee, Jinkeol Mok, WooJeong Lee, Seo-Young Koo, Ye Rim Gu, Min-Young Park, Seoyun Yang, Juhan Yoon, Young Woo Park, Wooick Jang, Su-Hyung Park. AR166, Cis-acting IL-2v를 전달하는 최초 계열(first-in-class) PD-1xLAG-3xIL-2v 삼특이 면역사이토카인으로 면역 체크포인트 억제제 내성을 극복 [abstract]. In: Proceedings of the American Association for Cancer Research Annual Meeting 2026; Part 1 (Regular Abstracts); 2026 Apr 17-22; San Diego, CA. Philadelphia (PA): AACR; Cancer Res 2026;86(7 Suppl):Abstract nr 4332.