, 단백질 정제 및 재접힘(refolding), 그리고 이러한 최적화 기법을 EDIII ferritin 나노입자의 정제에 적용하였다. 그 결과, 정제된 DENV2 EDIII 및 EDIII 인간 ferritin heavy chain 나노입자를 무첨가제(adjuvant) 없이 BALB/c 마우스에 근육 내(intramuscularly) 면역화하였으며, 면역원성은 IgG ELISA 및 혈청 중화(serum-neutralizing) 분석으로 평가하였다. 정제되고 적절히 재접힘되었으며 응집체가 없는 EDIII 및 EDIII ferritin 단백질을 얻었고, 전자현미경을 이용하여 ferritin 나노입자를 확인하였다. 마우스 혈청의 면역원성을 분석한 결과, EDIII ferritin은 EDIII 면역화 마우스에 비해 유의하게 더 높은 IgG 반응과 중화 활성을 유도하였다. IgG ELISA 결과는 EDIII ferritin이 EDIII보다 유의하게 높은 IgG 역가(O.D.: 1.8)를 유도할 수 있음을 확인하였는데, EDIII는 O.D.: 0.05였다. 또한 EDIII ferritin은 중화 역가 1:68을 생성한 반면, EDIII 단백질은 평균 역가 1:16을 생성하였으며, 이는 바이러스를 90% 억제한 혈청 희석 배수이다. 최종 면역화 후 2개월째에 채취한 혈청을 이용하여 면역 반응의 지속성을 분석하였고, 그 결과 EDIII ferritin이 해당 기간 전반에 걸쳐 일정한 면역성을 유도함을 확인하였다.

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