1. 전분화능줄기세포로부터 삼배엽 세포로의 분화 프로토콜 수립 신경세포 분화 프로토콜 수립 -간세포 분화 프로토콜 수립 -심근세포 분화 프로토콜 수립2. 8종의 전분화능줄기세포로부터 분화된 신경세포, 간세포, 심근세포를 분화 전, 분화 중간, 분화 후 단계에서 유전체 안정성 확인을 위하여 발주부서로 전달3. 전분화능줄기세포 유래 신경세포의 생쥐 뇌로의 이식 프로토콜 수립● 이식을 위한 분화세포의 품질 평가● 정확하고 효율적인 이식수술법의 수립● 투여용량의 설정4. 확립된 프로토콜을 기반으로 생쥐의 뇌로 8종의 전분화능 줄기세포 유래 신경세포 이식● 마우스의 일반적인 상태, 체중, 음식섭취, 무게 모니터링5. 유전체 안정성 평가 프로토콜 및 기준 수립 ● Karyotype 분석● 유전체 안정성 평가를 위하여 이식후 1개월, 10개월에 세포 이식부위 및 종양전이부위 조직을 체취하여 발주부서로 전달6. 종양원성 평가 프로토콜 및 기준 수립● hematoxylin-eosin 염색: 종양형성 확인● 면역화학염색: OCT3/4(iPSC marker), CD44(cancer stem cell marker) 면역화학염색을 통해 미분화된 줄기세포 및 종양 형성 확인● 세포 특이적인 종양마커를 통하여 종양형성 확인7. 연구데이터를 통해 발주부서로부터 제공받은 8종의 전분화능줄기세포 유래 신경세포, 간세포, 심근세포의 유전체 안전성 및 종양원성을 평가함.
- 1차년도 : 생체시계 돌연변이 줄기세포주 및 분화 프로토콜 확립
- 2~3차년도 : 표적 뇌 영역 10종 이상에 대해 일주기성 유전자 발현 지도 확립, 줄기세포주 대상 생체시계 표적 유전자군 발굴 및 기능 연구, 대뇌피질/중뇌의 일주기성 유전자 전사 조절 네트워크 기전 규명
- 4차년도 : 대뇌피질/중뇌의 일주기성 유전자 전사 조절 네트워크 기전 규명, 뇌 질환 전사체 발현 데이터베이스와의 비교분석을 통한 일주기성 유전자군 유효성 평가
- 5차년도 : 기분장애 특이적 일주기 전사 네트워크 교란 양상 규명 및 진단편가 플랫폼 개념 안 제시
세포접합 물리력이 전분화능줄기세포의 분화에 미치는 영향 분석
세포접합 물리력 조절을 위한 균일자기장 시스템 개발
마이크로 패터닝을 이용한 미세유세칩 제작
세포-기질 및 세포-세포 물리력 분석, 군집이동성 평가
전분화능줄기세포의 세포접합 물리력이 분화능에 미치는 영향 분석
Crispr/Cas9을 이용한 세포접합유전자 제거 전분화능줄기세포 생산