1) 기증안구의 공막 및 사상판의 DNA methylation 분석 - 후극부 공막 및 사상판을 채취하여 DNA methylation pattern을 한국인과 서양인의 기증안구에서 비교분석 한다. 주로 공막과 사상판의 주 구성성분인 collagen과 elastin의 유전자의 promoter region을 대상으로 한다. 2) 만성 안압상승모델에서 망막신경절세포의 methylation 분석 - 만성 안압상승모델을 제작한 후 망막을 채취하여 DNA methyltransferase와 histone acetyltranferase/methyltransferase 발현 변화를 분석 kit를 이용하여 안압 상승 전과 후의 변화를 관찰한다. 또한 변화가 관찰된 DNA methyltransferase와 histone acetyltranferase/methyltransferase의 subtype을 western blot analysis와 immunohistochemistry 염색을 통해 분석하여 망막에서의 변화를 관찰한다. 3) 만성 안압상승모델에서 공막 및 사상판의 DNA methylation 분석 - 만성 안압상승 동물모델에서 안압 상승 전과 후의 공막과 사상판의 DNA methylation 패턴을 분석 비교하여 특성을 도출한다. 또한 만성 안압상승 동물모델에서 변화가 있는 epigenetic pattern을 western blot analysis와 immunohistochemistry 염색을 통해 확인해보고, 안압 상승 후 세포사 하는 망막신경절세포에서 변화가 되는지 TUNEL 염색과 망막신경절세포 특수 염색을 통해 함께 발현 변화를 본다. 4) Histone deacetylase/demethyltransferase 억제에 의한 망막신경절세포의 세포사 변화 관찰 - 망막신경절세포에서 안압 상승 전과 후로 유의한게 변한 epigenetic modification target을 억제하거나 촉진하는 물질의 적용 후 변화를 western blot analysis와 immunohistochemistry 염색을 통해 확인한다. 또한 변화가 망막신경절세포의 세포사에 어떻게 기여하는지 TUNEL 염색과 망막신경절세포 특수 염색을 통해 관찰한다. - 만성 안압상승모델의 공막과 사상판에서의 변화도 함께 관찰하고 지지구조물들의 변화가 망막신경절세포의 세포사에 관여하는지 확인한다. - 위의 결과들을 통해 공막과 사상판의 epigenetic modification이 녹내장의 발생에 어떤 방향으로 작용하는지 규명하고 치료에의 epigenetic target을 선정해본다.