본 연구는 Lysophospholipid 수용체(LPLR) 간 이량체 형성이 단량체 수용체의 신호전달과 대장암 병리기전에 미치는 영향을 in vitro 및 in vivo 모델을 통해 규명하는 것을 최종 목표함.

1. 1단계 스크리닝 단계에서 본 연구팀은 단백질간의 상호작용을 살아있는 세포에서 실시간으로 분석할 수 있는 연구기법인 BRET을 이용하고자함. - 단계목표: 11종의 LPsR, 8종의 Gα 그리고 7종의 RGS를 대상으로 이들 중 LPsR-(Gα)-RGS의 결합양상을 보이는 조합을 선별함. - 주요연구방법: BRET기법을 이용한 LPsR-(Gα)-RGS의 결합 스크리닝 및 결합특성 분석 2. 2단계 결합재확인 및 결합특성 분석 단계(총5종 이상의 조합을 대상으로 실시) - 단계목표: 스크리닝 완료된 LPsR-(Gα)-RGS의 결합 여부 재확인 및 결합 특성을 다양한 생화학적 실험방법을 통해 분석함. - 주요연구방법: BRET, GST-pulldown, Co-IP, 면역조직화학염색, RGS 세포내 위치변화 분석 등 3. 3단계 RGS에 의한 LPsR의 활성제어효과 분석 단계(총3종 이상의 조합 대상) - 단계목표: RGS에 의해 LPsR-매개 하위신호전달 기전 제어 효과를 분석함. - 주요연구방법: LPsR은 각각의 G-단백질 coupling 특성을 가지고 있으며, 내재적으로 각 조합을 발현하는 세포를 대상으로 다음을 조사함. 수용체 활성 시, 나타나는 Gα 단백질의 활성을 Gα활성분석시스템을 적용하여 측정하고 RGS에 의한 활성제어 효과를 조사함. 또한 LPsR은 세포내에서 다양한 약리학적 효과를 보이므로, RGS에 의한 그 활성제어 효과를 조사함.