생쥐 Tas2r108의 생리적 기능 및 다양한 질환과의 상관관계를 밝히기 위하여 다음의 연구방법을 사용한다.
* Tas2r108 유도 발현 세포에서 Ca²⁺활성도 확인
Tas2r108을 발현시킨 CHO 세포에서 다양한 쓴맛 물질로 유발된 세포 내 칼슘 이온 농도의 변화를 칼슘의 농도에 반응하여 형광을 내는fura-2 AM를 이용하여 측정한다. 쓴맛 물질로 cycloheximide, denatonium, PTU, sucrose octaacetate, chloroquine, colchicine, quinine, chloramphenicol, ofloxacin, strychnine, caffeine, dapsone 등을 사용한다.
* 장기별 Tas2r108의 발현 양상을 확인한다.
섭식과 깊은 관련이 있으므로 미각과 관련이 깊을 것으로 생각하는 전신질환인 고혈압, 당뇨병, 비만, 거식증 등 관련질환과 관계가 깊은 장기인 췌장, 신장, 시상하부, 등의 장기에서 in situ hybridization과 정량적 PCR을 사용하여 미각 유전자와 질환 관련 유전자의 발현을 확인한다. 또한 Tas2r108제거 생쥐의 같은 장기에서도 관련 유전자의 발현을 확인하여 정상 생쥐와 비교한다.
* 장기적인 Tas2r108 제거 효과를 확인한다.
본 연구진의 연구로 Tas2r108 미각 유전자제거로 인한 임신 중 태아가 사망이나 성장 초기에 사망 또는 성장 지연 등의 효과는 관찰되지 않는 것이 확인되었다. 그러나 미각의 이상은 장기적인 섭식 행동의 변화를 일으킬 수 있고, 이는 만성 질환의 발병과 연관될 수 있다. 그러므로 평균 수명이 1-3년인 생쥐의 수명 주기를 따라 고혈압, 당뇨병, 비만 등의 만성질환의 유병률이 달라지는 지 관찰 확인한다.
생쥐 Tas2r108의 생리적 기능 및 다양한 질환과의 상관관계를 밝히기 위하여 다음의 연구방법을 사용한다.
* Tas2r108 유도 발현 세포에서 Ca²⁺활성도 확인
Tas2r108을 발현시킨 CHO 세포에서 다양한 쓴맛 물질로 유발된 세포 내 칼슘 이온 농도의 변화를 칼슘의 농도에 반응하여 형광을 내는fura-2 AM를 이용하여 측정한다. 쓴맛 물질로 cycloheximide, denatonium, PTU, sucrose octaacetate, chloroquine, colchicine, quinine, chloramphenicol, ofloxacin, strychnine, caffeine, dapsone 등을 사용한다.
* 장기별 Tas2r108의 발현 양상을 확인한다.
섭식과 깊은 관련이 있으므로 미각과 관련이 깊을 것으로 생각하는 전신질환인 고혈압, 당뇨병, 비만, 거식증 등 관련질환과 관계가 깊은 장기인 췌장, 신장, 시상하부, 등의 장기에서 in situ hybridization과 정량적 PCR을 사용하여 미각 유전자와 질환 관련 유전자의 발현을 확인한다. 또한 Tas2r108제거 생쥐의 같은 장기에서도 관련 유전자의 발현을 확인하여 정상 생쥐와 비교한다.
* 장기적인 Tas2r108 제거 효과를 확인한다.
본 연구진의 연구로 Tas2r108 미각 유전자제거로 인한 임신 중 태아가 사망이나 성장 초기에 사망 또는 성장 지연 등의 효과는 관찰되지 않는 것이 확인되었다. 그러나 미각의 이상은 장기적인 섭식 행동의 변화를 일으킬 수 있고, 이는 만성 질환의 발병과 연관될 수 있다. 그러므로 평균 수명이 1-3년인 생쥐의 수명 주기를 따라 고혈압, 당뇨병, 비만 등의 만성질환의 유병률이 달라지는 지 관찰 확인한다.
본 과제는 쓴맛 미각 감수기 유전자의 발현 불균등성이 구강질환과 연관되는지 규명하고, 특정 쓴맛 감수기 Tas2r108의 생리적 기능을 구명하려는 연구임.
연구목표는 미각 유전자 발현 또는 변이 양상과 구강질환 발생률의 상관관계를 파악하고, Tas2r108의 생리적 기능을 규명하는 데 있음. 핵심 연구내용은 Tas2r108의 장기별 발현 양상 확인, 감수기 분자의 리간드 확인, Tas2r108 knock-out mouse 개발 및 in situ hybridization, RT-PCR, quantitative PCR, calcium imaging(fura-2 acetoxymethyl ester, MeraFluor version 6.0) 수행과 유치열 아동의 치아우식증 유병률, 40세 이상 대상 치주질환 유병률과의 관련성 검증임. 기대효과는 치아우식증·치주질환 예방법 마련 단서 및 미각 생리학의 새로운 지평 제시 가능성임.
본 과제는 쓴맛 감수기 유전자 발현 불균등이 구강질환과 어떤 연관이 있는지 밝히기 위한 연구임.
연구 목표는 Tas2r108 쓴맛 감수기의 생리적 기능을 구명하고, 미각 유전자 발현·변이와 구강질환 발생률의 상관관계를 찾는 데 있음. 핵심 연구 내용은 Tas2r108 장기별 발현 양상 확인, 감수기 분자 리간드 확인, Tas2r108 knock-out mouse 개발을 통한 기능 검증, Tas2r108과 상동인 사람 TAS2R4 단일 유전자 변이 발현 확인임. 기대 효과는 치아우식증·치주질환 예방법 마련과 미각 생리의 새로운 이해 제공으로 이어짐.
최근 본연구진의 연구로 흰쥐와 생쥐의 타액선 선포세포에서 일부 미각 감수기가 발현하고 기능을 발휘하고 있다는 증거가 처음으로 제시되었으나, 흰쥐의 유전자 정보의 부족과 생쥐 악하선의 연구만으로는 기능의 확인 등 발전적인 연구가 어려운 실정이다. 그러므로 본 연구에서는 미각 감수기의 유전자 정보가 잘 확립되어 있는 생쥐(mouse)와 사람을 대상으로 3대 타액선인 악하선, 설하선, 이하선과 미각과 밀접한 관련이 있는 von Ebner 타액선의 선포세포에 존재하는 미각 감수기의 발현 양상을 확인하고, 그 생리적 기능을 확인하고자 한다. 본 연구의 목적을 달성하기 위하여 생쥐의 3대 타액선과 von Ebner 타액선에서 다양한 분자생물학적, 생화학적, 생리학적인 방법을 사용하여 아래와 같은 연구를 시행하며, 또한 사람 타액선에서도 분자생물학적 방법으로 미각 감수기 유전자를 탐색한다.
1) 악하선, 설하선, 이하선 및 von Ebner 타액선의 선포세포에서 미각 감수기 발현을 탐색, 확인한다
2) 타액선에 따른 미각 감수기 발현량이 차이를 확인한다.
3) 타액선에 따라 미각 물질에 반응하여 타액의 분비와 관련된 활동 양상을 단일 선포세포를 분리하여 확인한다.
4) 각 타액선이 다양한 미각 물질에 반응하여 타액 분비를 일으키는지 확인한다.
5) 사람 타액선에서 미각 감수기가 발현하는지 확인한다.
6) 맛봉오리 세포에 발현하는 분자를 탐색하고 타액선에서도 발현하는지 확인한다.
7) 타액선에 분포하는 미각 감수기의 생리적 기능을 확인한다.