본 연구의 목적은 관상 및 허혈성 심장질환에서 심근경색 치료를 위한 천연 플라보노이드인 피세틴이 제브라피시 심장에서 가지는 보호 기능을 평가하는 데 있다. 이를 위해 H2O2로 산화 스트레스를 유도한 제브라피시(Danio rerio) Tg(cmlc2: egfp)에 피세틴을 투여하였고, 피세틴의 보호 효과는 투여 후 심박수를 측정하여 확인하였다. 피세틴의 독성을 시험한 결과, 심박수는 농도의존적으로 증가하였으나, 배아와 성체 간에는 심박수 차이가 없었다. 개선된 심박수는 피세틴의 심장보호 효과를 보여주었다. 결과적으로, H2O2 단독 처리에 비해 피세틴을 3 및 5 M 농도로 투여한 군에서 심박수가 유의하게 증가하였다. 이는 피세틴이 허혈/재관류로 인해 발생하는 산화 스트레스에 의한 심장 손상의 예방 및 심혈관 질환 치료에서 중요한 역할을 한다는 것을 시사한다.

INH₂BP(5-iodo-6-amino-1,2-benzopyrone)는 poly-ADP ribose polymerase 억제제로서 항암, 항바이러스 및 항염증 특성을 지니는 것으로 알려져 있다. 본 연구의 목적은 H9c2 심근모세포에서 산화 스트레스 유발 아폽토시스에 대한 INH₂BP의 보호 효과를 규명하는 것이었다. H9c2 심근모세포를 과산화수소(H₂O₂)로 처리하면 세포 생존율이 감소하고 아폽토시스 세포 수가 증가하였으나, INH₂BP는 어떤 세포독성도 없이 H₂O₂로 유도된 세포사멸로부터 세포를 유의하게 보호하였다. 또한 본 데이터는 INH₂BP가 세포 내 반응성 산소종(ROS)을 유의하게 제거(scavenged)하고, Mn-SOD(superoxide)와 Cu/Zn-SOD 및 heme oxygenase-1과 같은 항산화 효소의 발현을 현저히 증가시켰음을 보여준다. 이는 H9c2 세포에서 extracellular regulated kinase 1/2(ERK1/2) 및 p38 mitogen-activated protein kinase(MAPK) 인산화의 동반 활성화와 함께 나타났다. ERK1/2 억제제인 PD98059 및 p38 억제제인 SB203580에 의해 INH₂BP의 ERK1/2와 p38 MAPK 인산화에 대한 효과는 모두 소실되었다. 더 나아가, 이들 억제제에 의한 ERK1/2 및 p38 MAPK 억제는 INH₂BP 매개 H9c2 생존율 및 caspase-3, Bax, Bcl-2 절단(활성화)을 유의하게 약화시켰다. 종합하면, 본 결과는 INH₂BP가 세포 내 ROS 생성 감소, 아폽토시스 관련 단백질 조절 및 ERK1/2와 p38 MAPK의 활성화를 통해 H9c2 세포에서 H₂O₂로 유도된 아폽토시스를 억제함을 시사한다.

최근 효과적인 피부과적 탈색(impigmenting) 화합물을 개발하기 위한 많은 노력이 이루어지고 있다. 본 연구에서는 새 후보 화합물인 AP736(아다만틸 벤질벤즈아마이드 유도체)과 그 이가 B16F10 흑색종 세포에서 멜라닌 생성에 미치는 영향, 그리고 관련된 기전을 조사하였다. AP736은 시험관 내 멜라노사이트와 인공 피부 등가물에서, 주요 멜라닌 생성 효소의 억제 및 cAMP-단백질 키나아제 A (PKA)-cAMP 반응 원소 결합 단백질 (CREB) 신호 전달 경로의 억제를 통해 항(anti)-멜라닌 생성 효과를 나타내는 것으로 보고되어 있다. 이에 따라, AP736이 당원질 합성 키나아제 3β (glycogen synthesis kinase 3β, GSK3β) 경로에 미치는 영향과 연관된 멜라닌 생성의 또 다른 경로를 확인하고자 하였다. AP736을 처리한 후 세포의 멜라닌 함량과 티로시나아제 활성을 분광광도계를 이용해 측정하였다. AP736에 의해 유도되는 신호 전달 경로의 활성화는 웨스턴 블롯 분석으로 확인하였다. 그 결과 AP736은 농도 의존적으로 멜라닌 생성을 감소시키는 것을 확인했으나, 속도 제한(rate-limiting) 멜라닌 생성 효소인 티로시나아제를 직접적으로 억제하지는 못했다. 또한 미세안구증(microphthalmia)-관련 전사인자, 티로시나아제 및 관련 신호 전달 경로의 발현도 조사하였다. Wnt 신호 전달 경로는 멜라닌 생성에 깊이 관여하므로, AP736 처리 후 GSK3β에 의한 인산화를 평가하였다. AP736은 GSK3β의 인산화(불활성화)를 유도하였으나, β-catenin의 수준은 변화시키지 않았다. 더 나아가 α-melanocyte-stimulating hormone 유도 티로시나아제의 발현은 AP736에 의해 하향 조절되었다. 본 데이터는 AP736이 GSK3β 인산화를 통해 티로시나아제를 하향 조절함으로써 저색소침착(hypopigmentary) 효과를 나타낸다는 것을 시사한다.

배경/목적: Artemisinin(AT)은 Artemisia annua의 활성 성분으로, 항말라리아 약물로 잘 알려져 있다. 또한 항산화, 항염증 및 항암 작용을 포함한 여러 효과를 갖는 것으로 알려져 있다. 현재까지 AT가 혈관 질환에 미치는 영향은 연구되지 않았다. 본 연구에서는 혈소판유래 성장인자 BB(platelet-derived growth factor BB, PDGF-BB)로 자극한 혈관 평활근세포(vascular smooth muscle cells, VSMC)의 이동과 증식에 대한 AT의 효과를 조사하였다. 재료/방법: Sprague-Dawley 랫트에서 대동맥 평활근세포를 분리하였다. PDGF-BB로 자극한 VSMC의 이동은 scratch wound healing assay 및 Boyden chamber assay로 측정하였다. 세포 생존성은 EZ-Cytox Cell Viability Assay Kit를 사용하여 결정하였다. PDGF-BB로 자극한 VSMC에서의 반응성 산소종(reactive oxygen species, ROS) 생성은 H2DCF-DA 염색을 통해 측정하였다. 또한 RT-PCR로 측정한 matrix metalloproteinase(MMP) 9와, western blot 분석으로 측정한 extracellular signal-regulated kinase(ERK) 1/2를 포함하여 ROS 관련 신호 단백질의 발현 수준을 확인하였다. 결과: AT(10 µM 및 30 µM)는 PDGF-BB로 자극한 VSMC의 증식과 이동을 용량 의존적으로 유의하게 감소시켰다. PDGF-BB에 의해 일반적으로 유도되는 ROS 생성은 두 농도 모두에서 AT 처리에 의해 감소하였다. AT(10 µM 및 30 µM) 처리된 PDGF-BB 자극 VSMC는 무처리 PDGF-BB 자극 VSMC에 비해 ERK1/2의 인산화가 감소하였고 MMP9 발현이 억제되었다. 결론: 본 연구 결과를 바탕으로, AT는 ERK1/2 및 MMP9 인산화의 하향 조절을 통해 PDGF-BB 자극 VSMC의 증식과 이동을 억제함으로써 항죽상경화증 효과를 나타낼 수 있음을 시사한다.