인간 사이토메갈로바이러스(HCMV)는 Betaherpesvirinae 아과의 이중가닥 DNA 바이러스로서 신생아와 면역저하자에게 중대한 위험을 초래하며, 잠재적으로 중증의 신경발달 장애로 이어질 수 있다. 본 연구의 목적은 약물 재배치(drug repositioning) 접근법을 통해 HCMV 복제를 억제할 수 있는 FDA 승인 약물을 확인하는 것이었다. HCMV progeny assay를 사용한 결과, 광역학 치료에서 광감작제로 사용되는 약물인 베르테포르핀(verteporfin)이 농도 의존적으로 HCMV 생산을 억제하는 것으로 나타났으며, 항암 연구에서 사용된 농도의 약 1/20에 해당하는 0.5 µM에서부터 복제를 유의하게 감소시켰다. 추가 분석 결과, 베르테포르핀은 HCMV의 숙주 세포 진입 또는 핵 수송에는 영향을 주지 않았으나, HCMV 생애 주기의 즉시초기(immediate-early) 단계부터 전 과정에 걸쳐 바이러스 mRNA와 단백질 수준을 감소시켰다. 이러한 결과는 베르테포르핀이 HCMV 감염을 억제하는 재배치 약물로서 신속하고 안전하게 개발될 가능성이 있음을 시사한다.

예스-관련 단백질(YES-associated protein, YAP)은 포유류 Hippo 신호전달 경로의 핵심 조절인자로서 다양한 생물학적 사건에 관여하며, 바이러스 감염에 의해 조절되는 세포 인자로서 최근 들어 주목을 받아 왔다. 그러나 그 관계가 반대로, 즉 바이러스와의 상호관계에서 YAP이 어떤 영향을 미치는지에 대해서는 매우 소수의 연구만이 이루어졌다. 본 연구에서 우리는 YAP이 바이러스 유전자 발현 분석과 자손(progeny) 분석으로 평가한 바에 따라 HCMV 복제를 억제함을 보여주었고, 이 억제는 바이러스 생활사에서 지극히 초기 단계에서—최신으로는—발생함을 확인하였다. 핵 내 위치화에 필수적인 기능 도메인을 결여한 YAP 변이체와 TEAD에 대한 shRNA를 사용하여, HCMV 복제에 대한 YAP의 억제 효과가 핵 국소화 및 TEAD 보조인자(cofactor) 의존적임을 입증하였다. 정량적 실시간 PCR(qPCR) 및 세포 소기관 분획(subcellular fractionation) 분석 결과, YAP은 바이러스의 침입 과정에는 간섭하지 않으나 HCMV 게놈의 핵 내 전달을 억제함을 보여주었다. 무엇보다도, 최근 헤르페스바이러스 게놈의 핵 전달에 중요한 구성요소로 확인된 인터페론 자극 유전자(stimulator of interferon genes, STING) 발현이 YAP에 의해 유전자 전사 수준에서 심각하게 하향조절됨을 확인하였다. STING의 기능적 중요성은 STING 발현이 YAP에 의해 감소된 HCMV 게놈의 핵 내 수송, 바이러스 유전자 발현, 그리고 자손 바이러스 생산을 회복시킨다는 관찰로 추가로 확인되었다. 또한 HCMV에 의해 상향조절된 YAP이 STING의 발현을 감소시킨다는 사실도 보여주었다. 종합하면, 본 연구 결과는 YAP이 감염의 서로 다른 단계에서 HCMV 복제에 대해 직접적 및 간접적 조절 역할을 모두 가진다는 것을 시사한다.

인간 사이토메갈로바이러스(HCMV)는 Betaherpesvirinae 아과의 이중가닥 DNA 바이러스로서 신생아와 면역저하자에게 중대한 위험을 초래하며, 잠재적으로 중증의 신경발달 장애로 이어질 수 있다. 본 연구의 목적은 약물 재배치(drug repositioning) 접근법을 통해 HCMV 복제를 억제할 수 있는 FDA 승인 약물을 확인하는 것이었다. HCMV progeny assay를 사용한 결과, 광역학 치료에서 광감작제로 사용되는 약물인 베르테포르핀(verteporfin)이 농도 의존적으로 HCMV 생산을 억제하는 것으로 나타났으며, 항암 연구에서 사용된 농도의 약 1/20에 해당하는 0.5 µM에서부터 복제를 유의하게 감소시켰다. 추가 분석 결과, 베르테포르핀은 HCMV의 숙주 세포 진입 또는 핵 수송에는 영향을 주지 않았으나, HCMV 생애 주기의 즉시초기(immediate-early) 단계부터 전 과정에 걸쳐 바이러스 mRNA와 단백질 수준을 감소시켰다. 이러한 결과는 베르테포르핀이 HCMV 감염을 억제하는 재배치 약물로서 신속하고 안전하게 개발될 가능성이 있음을 시사한다.

예스-관련 단백질(YES-associated protein, YAP)은 포유류 Hippo 신호전달 경로의 핵심 조절인자로서 다양한 생물학적 사건에 관여하며, 바이러스 감염에 의해 조절되는 세포 인자로서 최근 들어 주목을 받아 왔다. 그러나 그 관계가 반대로, 즉 바이러스와의 상호관계에서 YAP이 어떤 영향을 미치는지에 대해서는 매우 소수의 연구만이 이루어졌다. 본 연구에서 우리는 YAP이 바이러스 유전자 발현 분석과 자손(progeny) 분석으로 평가한 바에 따라 HCMV 복제를 억제함을 보여주었고, 이 억제는 바이러스 생활사에서 지극히 초기 단계에서—최신으로는—발생함을 확인하였다. 핵 내 위치화에 필수적인 기능 도메인을 결여한 YAP 변이체와 TEAD에 대한 shRNA를 사용하여, HCMV 복제에 대한 YAP의 억제 효과가 핵 국소화 및 TEAD 보조인자(cofactor) 의존적임을 입증하였다. 정량적 실시간 PCR(qPCR) 및 세포 소기관 분획(subcellular fractionation) 분석 결과, YAP은 바이러스의 침입 과정에는 간섭하지 않으나 HCMV 게놈의 핵 내 전달을 억제함을 보여주었다. 무엇보다도, 최근 헤르페스바이러스 게놈의 핵 전달에 중요한 구성요소로 확인된 인터페론 자극 유전자(stimulator of interferon genes, STING) 발현이 YAP에 의해 유전자 전사 수준에서 심각하게 하향조절됨을 확인하였다. STING의 기능적 중요성은 STING 발현이 YAP에 의해 감소된 HCMV 게놈의 핵 내 수송, 바이러스 유전자 발현, 그리고 자손 바이러스 생산을 회복시킨다는 관찰로 추가로 확인되었다. 또한 HCMV에 의해 상향조절된 YAP이 STING의 발현을 감소시킨다는 사실도 보여주었다. 종합하면, 본 연구 결과는 YAP이 감염의 서로 다른 단계에서 HCMV 복제에 대해 직접적 및 간접적 조절 역할을 모두 가진다는 것을 시사한다.

주요 본문(Cell Reports 19, 351–363; 2017년 4월 11일) 이 논문의 원래 출판본에서는 보충 정보 PDF 파일에서 그림 S6 및 S7이 부주의로 누락되었습니다. 그림 S6 및 S7은 이제 아래에 게재되어 있습니다. 그림 S7 RPE에서 노치( Notch ) 활성은 정상적인 안구 발달을 위해 억제되어야 한다—그림 5 및 6과 관련됨 전체 캡션 보기 구성적으로 활성화된 Notch 세포내 도메인(NICD)이 R26+/NICD;TRP1-Cre 및 R26+/NICD;MART1-Cre 마우스의 마우스 RPE에서 선택적으로 발현되었다. (A 및 D) 마우스 배아 안구의 측면 보기에서 R26+/NICD;TRP1-Cre 및 R26+/NICD;MART1-Cre 마우스의 안구에서 구순(콜로보마, 화살촉은 시신경열(optic fissure)을 지시)을 확인하였다. (B 및 E) E14.5 TRP1-Cre 및 R26+/NICD;TRP1-Cre 형제 또는 MART1-Cre 및 R26+/NICD;MART1-Cre 형제 마우스의 안구 절편에 대한 H&E 염색 이미지를 제시하였다. 오른쪽 열은 왼쪽의 점선 상자 영역을 확대한 이미지이다. (C 및 F) IRES로 연결되어 있으며 Cre 재조합효소에 의한 loxP-STOP-loxP 카세트의 R26NICD 유전자좌에서의 절제 이후 발현되는 NICD와 nEGFP의 공발현을 관찰하고, 안구에서 RPE, RPC, PMN의 분포를 RPE의 표지자(Mitf), RPC의 표지자(Vsx2), PMN의 표지자(Tuj1)를 검출하는 항체를 이용한 면역염색으로 분석하였다. 큰 이미지 보기 고해상도 이미지 다운로드 (PPT) 주요 본문(Cell Reports 19, 351–363; 2017년 4월 11일) 이 논문의 원래 출판본에서는 보충 정보 PDF 파일에서 그림 S6 및 S7이 부주의로 누락되었습니다. 그림 S6 및 S7은 이제 아래에 게재되어 있습니다. (Cell Reports 19, 351–363; 2017년 4월 11일) 이 논문의 원래 출판본에서는 보충 정보 PDF 파일에서 그림 S6 및 S7이 부주의로 누락되었습니다. 그림 S6 및 S7은 이제 아래에 게재되어 있습니다. 망막 색소상피(RPE)는 마우스 망막에서 Notch 신호전달 니치를 형성한다 Ha et al. Cell Reports 2017년 4월 11일 요약( In Brief ) Ha 등은 마우스 망막에서 망막 색소상피(retinal pigment epithelium, RPE)가 Notch 신호전달 니치의 역할을 한다는 점을 규명하였다. RPE로부터 유래하는 추가적인 Notch 신호는 특히, 자매 세포들로부터 충분하지 않은 Notch 신호를 받는 세포들의 RPC 운명을 유지하는 데 결정적으로 중요하다. 전체 텍스트 PDF 오픈 액세스

비정상적인 신피질 전구세포의 분화를 방지하기 위해 발현되었다. 이러한 연구는 특정 신피질 뉴런 계통의 생성에 대한 분자적 기전을 규명하는 데 있어 우리의 지식을 진전시키며, 신경발달 질환에서의 함의를 제시하고, 전구세포를 뇌 손상 복구(brain repair)에 어떻게 활용할 수 있는지에 관한 향후 연구를 안내할 수 있다.

기저형 유방암(BLBC)은 선양성( luminal ) 전구세포 유전자 시그니처를 발현한다. Notch 수용체 신호전달은 유선에서 선양성 세포 운명( fate )의 지정은 촉진하는 한편, 줄기세포 자기재생(self-renewal )은 억제한다. 여기에서는 Jagged 리간드에 의한 Notch 활성화를 차단하는 당 전이효소인 Lfng의 삭제가 줄기/전구세포 증식을 강화함을 보인다. 유선 특이적 Lfng의 결손은 Notch 세포질 내 도메인(Notch intracellular domain) 단편이 축적되고, 증식 관련 Notch 표적의 발현이 증가하며, Met/Caveolin 좌위가 증폭되고, Met 및 Igf-1R 신호전달이 상승하는 기저형 및 claudin-low 종양을 유도한다. JAGGED 발현과 흔히 연관되고, MET 신호전달이 증가하며, CAVEOLIN이 축적된 인간 BL 유방 종양은 LFNG의 낮은 수준을 발현한다. 따라서 LFNG 발현 감소는 JAG/NOTCH 선양성 전구세포 신호전달을 촉진하고, MET/CAVEOLIN 기저형 신호전달과 협력하여 BLBC의 발생을 촉진한다.