B7-H3는 간세포암종(HCC)을 포함한 다양한 암에서 이질성이 제한적인 상태로 매우 높게 발현되지만, 정상 조직에서는 발현이 낮다. 우리는 인간 배아줄기세포(hESCs)의 표면 분자에 대한 단클론 항체(MAbs)를 생성하였고, 그중 NPB40이 HCC 세포에 결합하나 1차 간세포에는 약하게만 결합함을 확인하였다. 질량분석을 동반한 면역침강법으로 NPB40이 B7-H3를 인식함을 확인하였다. 종양구(스피어) 배양에서는 NPB40과 결합하는 B7-H3의 발현이 유의하게 증가하였으며, 알려진 암줄기세포(CSC) 마커들도 함께 증가하였다. NPB40로 세포를 분주한 결과, NPB40-high HCC 세포는 NPB40-low HCC 세포보다 더 높은 클론형성 생존을 보였는데, 이는 B7-H3가 HCC 세포의 잠재적 CSC 마커일 수 있음을 시사한다. NPB40 및 Chi-NPB40(동일 항체의 키메라 형태)은 B7-H3의 내재화를 유도하였고, 항-인간 이차 항체 약물접합체(ADCs)를 통한 독성 전달로 HCC 세포의 증식을 억제했으며, Chi-NPB40는 체외에서 HCC 세포에 대해 항체의존성 세포매개 세포독성(ADCC)을 유도할 수 있었다. 또한 NPB40과 Chi-NPB40의 주사는 HCC의 이종이식 누드 마우스 모델에서 종양 성장을 억제하였다. 이러한 결과는 NPB40이 HCC 환자에서의 치료용 항체로 개발될 수 있음을 시사한다.

CD98는 SLC3A2로도 알려져 있으며, 아미노산 수송체로 구성된 다기능 세포 표면 분자이다. CD98는 여러 유형의 조직에서 광범위하게 발현되지만, 정상 조직에 비해 암성 조직에서 더 높은 수준으로 발현된다. 또한 CD98는 대부분의 간세포암(HCC) 환자에서 상향 조절되지만, HCC 세포에서의 CD98의 기능은 거의 연구되지 않았다. 본 연구에서는 인간 배아줄기세포(hESC)에서의 표면 단백질에 대한 단일클론항체(MAb) 패널을 생성하였다. 그중 NPB15는 hESC 및 HCC 세포를 포함한 다양한 암세포에 결합했으나, 말초혈액 단핵세포(PBMC)와 원발성 간세포에는 결합하지 않았다. 면역침강 및 질량분석을 통해 NPB15의 표적 항원을 CD98로 동정하였다. CD98의 결핍은 HCC 세포에서 세포 증식, 클론 형성 생존, 이동성을 감소시키고, 아폽토시스를 유도하였다. 아울러 CD98 결핍은 HCC 세포에서 암 줄기세포(CSC) 마커의 발현을 감소시켰다. 종양구스페어(tumorsphere) 배양에서는 NPB15와 결합하는 CD98의 발현이 유의하게 증가했으며, 알려진 CSC 마커들도 함께 증가하였다. NPB15로 세포를 분류한 결과, CD98 발현이 높은 세포(CD98-high)는 HCC 세포에서 CD98 발현이 낮은 세포(CD98-low)에 비해 더 높은 클론 형성 생존을 보였는데, 이는 HCC 세포에서 CD98가 잠재적인 CSC 마커일 수 있음을 시사한다. NPB15의 키메라(chimeric) 버전은 시험관 내에서 HCC 세포에 대해 항체의존성 세포매개 세포독성(ADCC)을 유도할 수 있었다. 또한 NPB15의 주사는 HCC 이종이식 마우스 모델에서 항종양 활성을 보였다. 이러한 결과는 NPB15가 HCC 환자를 위한 치료용 항체로 개발될 수 있음을 시사한다.

B7-H3는 간세포암종(HCC)을 포함한 다양한 암에서 이질성이 제한적인 상태로 매우 높게 발현되지만, 정상 조직에서는 발현이 낮다. 우리는 인간 배아줄기세포(hESCs)의 표면 분자에 대한 단클론 항체(MAbs)를 생성하였고, 그중 NPB40이 HCC 세포에 결합하나 1차 간세포에는 약하게만 결합함을 확인하였다. 질량분석을 동반한 면역침강법으로 NPB40이 B7-H3를 인식함을 확인하였다. 종양구(스피어) 배양에서는 NPB40과 결합하는 B7-H3의 발현이 유의하게 증가하였으며, 알려진 암줄기세포(CSC) 마커들도 함께 증가하였다. NPB40로 세포를 분주한 결과, NPB40-high HCC 세포는 NPB40-low HCC 세포보다 더 높은 클론형성 생존을 보였는데, 이는 B7-H3가 HCC 세포의 잠재적 CSC 마커일 수 있음을 시사한다. NPB40 및 Chi-NPB40(동일 항체의 키메라 형태)은 B7-H3의 내재화를 유도하였고, 항-인간 이차 항체 약물접합체(ADCs)를 통한 독성 전달로 HCC 세포의 증식을 억제했으며, Chi-NPB40는 체외에서 HCC 세포에 대해 항체의존성 세포매개 세포독성(ADCC)을 유도할 수 있었다. 또한 NPB40과 Chi-NPB40의 주사는 HCC의 이종이식 누드 마우스 모델에서 종양 성장을 억제하였다. 이러한 결과는 NPB40이 HCC 환자에서의 치료용 항체로 개발될 수 있음을 시사한다.

CD98는 SLC3A2로도 알려져 있으며, 아미노산 수송체로 구성된 다기능 세포 표면 분자이다. CD98는 여러 유형의 조직에서 광범위하게 발현되지만, 정상 조직에 비해 암성 조직에서 더 높은 수준으로 발현된다. 또한 CD98는 대부분의 간세포암(HCC) 환자에서 상향 조절되지만, HCC 세포에서의 CD98의 기능은 거의 연구되지 않았다. 본 연구에서는 인간 배아줄기세포(hESC)에서의 표면 단백질에 대한 단일클론항체(MAb) 패널을 생성하였다. 그중 NPB15는 hESC 및 HCC 세포를 포함한 다양한 암세포에 결합했으나, 말초혈액 단핵세포(PBMC)와 원발성 간세포에는 결합하지 않았다. 면역침강 및 질량분석을 통해 NPB15의 표적 항원을 CD98로 동정하였다. CD98의 결핍은 HCC 세포에서 세포 증식, 클론 형성 생존, 이동성을 감소시키고, 아폽토시스를 유도하였다. 아울러 CD98 결핍은 HCC 세포에서 암 줄기세포(CSC) 마커의 발현을 감소시켰다. 종양구스페어(tumorsphere) 배양에서는 NPB15와 결합하는 CD98의 발현이 유의하게 증가했으며, 알려진 CSC 마커들도 함께 증가하였다. NPB15로 세포를 분류한 결과, CD98 발현이 높은 세포(CD98-high)는 HCC 세포에서 CD98 발현이 낮은 세포(CD98-low)에 비해 더 높은 클론 형성 생존을 보였는데, 이는 HCC 세포에서 CD98가 잠재적인 CSC 마커일 수 있음을 시사한다. NPB15의 키메라(chimeric) 버전은 시험관 내에서 HCC 세포에 대해 항체의존성 세포매개 세포독성(ADCC)을 유도할 수 있었다. 또한 NPB15의 주사는 HCC 이종이식 마우스 모델에서 항종양 활성을 보였다. 이러한 결과는 NPB15가 HCC 환자를 위한 치료용 항체로 개발될 수 있음을 시사한다.

인간 만능줄기세포(hPSCs)는 포유류에서 적어도 두 가지 서로 다른 상태로 존재한다. 하나는 착상 전 상피(epiblast)에서 나타나는 여러 분자적 특징을 반영하는 ‘미분화(naïve) 만능성’이고, 다른 하나는 착상 후 상피에서 분화에 대비된 세포에 해당하는 ‘분화전(primed) 만능성’이다. 미분화 상태의 hPSC를 유지하는 데 필요한 표면 분자를 규명하고 특성화하기 위해, 우리는 미분화 상태의 hPSCs에 특이적인 마우스 단일클론항체(MAbs) 패널을 제작하였다. 유세포분석 결과, MAbs 중 하나인 N1-A4는 분화전 hPSCs에는 결합하지 않으나 미분화 hPSCs에는 결합함을 확인하였다. 세포 표면 비오틴화 및 면역침강 분석을 통해 N1-A4가 미분화 hPSCs의 표면에 발현되는 열충격단백질 60(heat shock protein 60, HSP60)을 인식함을 확인하였다. 정량 중합효소연쇄반응(qPCR) 분석에서는 HSP60의 발현이 분화전 hPSCs의 배아체(embryoid body, EB) 분화 동안 빠르게 하향조절됨을 보여주었다. HSP60의 knockdown은 분화전 hPSCs에서 만능성 유전자의 발현을 감소시켰다. 또한 HSP60의 고갈은 미분화 hPSCs에서 만능성 유전자 및 대표적인 미분화-특이 유전자의 발현을 감소시켰다. 종합하면, 본 연구 결과는 HSP60이 hPSC의 분화 동안 하향조절되며, 분화전 및 미분화 hPSCs 모두에서 만능성 유전자의 유지를 위해 필요하다는 점을 시사한다. 이는 HSP60이 hPSC의 만능성 및 분화를 조절하는 인자일 수 있음을 의미한다.

인간화 항-TM4SF4 항체인 Hz2B7-1.2는 종양세포에 대한 강력한 항종양 활성을 여러 기전을 통해 나타내며, 여기에는 종양유전자 신호전달 경로의 억제, EMT(상피-간엽 전이) 관련 줄기성 감소, 면역 반응의 조절이 포함된다. 이러한 결과는 Hz2B7-1.2가 TM4SF4 양성 암종을 위한 유망한 치료 후보임을 지지하며, 추가적인 임상 연구가 필요함을 시사한다.

L1 세포 부착 분자는 간내 담관암에서 새로운 치료 표적이다