발효 연어 태반 단백질(F-Sal).

약물 전달 시스템은 약물 방출의 시점과 위치를 제어함으로써 세포독성 약물을 전달할 수 있는 가능성을 지닌다. 그러나 기존의 전달 메커니즘은 약물의 효능을 보장하고 주변 조직에 대한 영향을 최소화하는 데 필수적인, 시공간적으로 제어되면서도 지속적인 방출을 달성하기에는 종종 한계가 있다. 본 연구에서는 전기적 퍼텐셜에 의해 제어되며 나노그램에서 마이크로그램에 이르는 규모로 약물을 방출할 수 있는, 이온 다이오드 기반 약물 전달 시스템을 보고한다. 이 시스템에서 이동한 약물은 하이드로겔을 통해 병변 부위로 원하는 속도로 느리지만 연속적으로 확산된다. 이온 다이오드는 장기간 동안 의도치 않은 약물 누출을 최소화하면서도 무유동(흐름 없는) 약물 전달을 제공한다. 종양을 가진 마우스 모델(자유롭게 움직일 수 있는 모델)에 이 시스템을 이식한 결과, 독소루비신을 채운 시스템은 유리 독소루비신을 종양 내 주사한 경우에 비해 더 우수한 항종양 효능과 최소한의 비표적 면역 독성을 보였다. 기계적으로 순응적인 구성요소와 생체적합성 구성요소를 갖춘 이 시스템은 수술적으로 절제할 수 없는 종양 환자에게 적용 가능한 안전하고 신속하게 임상으로 전환 가능한 접근법을 제공한다.

초록 배경: 종양 미세환경의 골수계 구획에서 CD244 신호전달은 단핵구의 면역억제성 표현형과 관련되는 것으로 시사되어 왔다. 그러나 림프계 세포에서 CD244가 공존 발현하기 때문에, 단핵구/대식세포에서의 종양 면역에서 CD244의 정확한 분자 기전과 기여는 아직 불분명하다. 방법: 종양 관련 대식세포에서의 CD244 역할을 직접적으로 평가하기 위해, cre-lox 재조합을 이용하여 단핵구 계통 특이 CD244 결손 마우스를 제작하고 B16F10 흑색종에 노출시켰다. 종양 침윤 대식세포의 표현형과 기능, 그리고 항원 특이 CD8 T 세포를 유세포분석과 단일세포 RNA 서열분석 자료 분석으로 평가하였으며, 항종양형 대식세포 분화, 항원 제시, 탐식에 대한 분자 기전을 체외(ex vivo)에서 조사하였다. 마지막으로, 흑색종에서 치료 양식으로서 CD244 음성 단핵구의 임상적 실행 가능성을 입양전이 실험으로 확인하였다. 결과: CD244fl/fl LysMcre 마우스는 종양 이식 후 14일째에 종양 부피가 CD244fl/fl 대조군에 비해 유의하게 감소(61%)하였다. 종양 조직 내에서 CD244fl/fl LysMcre 마우스는 Ly6Clow 대식세포의 비율이 더 높았고, 더불어 gp100+IFN-γ+ CD8 T 세포가 증가해 있었다. 유세포분석 및 RNA 서열분석 자료는 ER 스트레스가 단핵구에서 CD244 발현을 증가시킨다는 것을 보여주었다. 이는 차례로 자가포식(autophagy) 경로를 억제함으로써 항종양형 Ly6Clow 대식세포의 생성, 탐식 및 MHC-I 항원 제시를 저해하였다. 항-PD-L1 항체와 CD244-/- 골수유래 대식세포를 병용하면, 항-PD-L1 항체 단독 또는 야생형 대식세포와의 병용에 비해 종양 거부(tumor rejection)가 현저히 향상되었다. 이러한 결과는 마우스 자료와 일관되게, 인간 흑색종 조직의 단일세포 RNA 서열분석 데이터에서 CD244와 대식세포 성숙 및 기능 억제 간의 밀접한 연관성이 전사체 분석을 통해 확인되었다. 또한 CD244 음성 단핵구/대식세포의 존재는 1차 및 전이성 종양에서 환자 생존을 유의하게 증가시켰다. 결론: 본 연구는 흑색종에서 종양 항원 특이 T 세포 반응과 항종양형 대식세포 생성의 억제에 관여하는 단핵구/대식세포에서의 CD244의 새로운 역할을 강조한다. 특히, 본 연구 결과는 CD244 결핍 대식세포가 면역 체크포인트 억제제와 병용하여 치료제로 활용될 수 있음을 시사한다. 더불어 단핵구 계통 세포에서의 CD244 발현은 암 환자에서 예후 예측 지표로 기능할 수 있다. 참고문헌 형식: Jeongsoo Kim, Tae-Jin Kim, Sehyun Chae, Hyojeong Ha, Yejin Park, Seon Ah Lim, Hyemin Lee, Younji Sim, Seyoung Oh, Geon Mo Koo, Minkyung Jo, Daehee Hwang, Kyung-Mi Lee. 단핵구에서의 CD244 표적 결손은 항종양형 대식세포로의 분화를 촉진하고 흑색종에서 PD-L1 차단의 효과를 증대시킨다 [abstract]. In: Proceedings of the American Association for Cancer Research Annual Meeting 2024; Part 2 (Late-Breaking, Clinical Trial, and Invited Abstracts); 2024 Apr 5-10; San Diego, CA. Philadelphia (PA): AACR; Cancer Res 2024;84(7_Suppl):Abstract nr LB338.

배경: 종양 미세환경의 골수성 구획에서 CD244 신호전달은 단핵구의 면역억제성 표현형과 연관되는 것으로 시사되어 왔다. 그러나 CD244가 단핵구/대식세포에서 종양 면역에 기여하는 정밀한 분자적 기전은, CD244를 발현하는 림프구성 세포들이 공존함에 따라 아직 명확하지 않다. 방법: 종양관련 대식세포에서 CD244의 역할을 직접 평가하기 위해, cre-lox 재조합을 이용하여 단핵구 계열 특이적 CD244 결손 마우스를 생성하고 B16F10 흑색종에 노출시켰다. 유세포분석 및 단일세포 RNA 염기서열분석 데이터 분석을 통해 종양 침윤 대식세포의 표현형과 기능, 그리고 항원특이적 CD8 T 세포를 평가하였으며, 항종양성 대식세포 분화, 항원제시, 식작용을 유발하는 분자적 기전을 체외(ex vivo)에서 조사하였다. 마지막으로, 흑색종에서 CD244 음성 단핵구를 치료 양식으로 활용할 임상적 타당성은 입양이식(adoptive transfer) 실험으로 확인하였다. 결과: 골수 유래 대식세포는 항-PD-L1 항체 단독 또는 야생형 대식세포와의 병용에 비해 종양 거부를 현저히 개선하였다. 마우스 데이터와 일치하게, 인간 흑색종 조직의 단일세포 RNA 염기서열분석 데이터셋에서 전사체 분석 결과 CD244와 대식세포의 성숙 및 기능 억제 간의 긴밀한 연관성이 확인되었다. 또한 CD244 음성 단핵구/대식세포의 존재는 원발성 및 전이성 종양에서 환자의 생존을 유의하게 증가시켰다. 결론: 본 연구는 흑색종에서 항종양성 대식세포 생성과 종양 항원 특이적 T 세포 반응을 억제하는 데 있어 단핵구/대식세포에서 CD244이 가지는 새롭고도 중요한 역할을 부각한다. 특히, 본 연구 결과는 CD244 결손 대식세포가 면역관문억제제와 병용하여 치료제의 한 가지로 활용될 가능성이 있음을 시사한다. 아울러, 단핵구 계열 세포에서의 CD244 발현은 암 환자에서 예후 지표로서의 역할을 수행한다.

발효 연어 태반 단백질(F-Sal).

약물 전달 시스템은 약물 방출의 시점과 위치를 제어함으로써 세포독성 약물을 전달할 수 있는 가능성을 지닌다. 그러나 기존의 전달 메커니즘은 약물의 효능을 보장하고 주변 조직에 대한 영향을 최소화하는 데 필수적인, 시공간적으로 제어되면서도 지속적인 방출을 달성하기에는 종종 한계가 있다. 본 연구에서는 전기적 퍼텐셜에 의해 제어되며 나노그램에서 마이크로그램에 이르는 규모로 약물을 방출할 수 있는, 이온 다이오드 기반 약물 전달 시스템을 보고한다. 이 시스템에서 이동한 약물은 하이드로겔을 통해 병변 부위로 원하는 속도로 느리지만 연속적으로 확산된다. 이온 다이오드는 장기간 동안 의도치 않은 약물 누출을 최소화하면서도 무유동(흐름 없는) 약물 전달을 제공한다. 종양을 가진 마우스 모델(자유롭게 움직일 수 있는 모델)에 이 시스템을 이식한 결과, 독소루비신을 채운 시스템은 유리 독소루비신을 종양 내 주사한 경우에 비해 더 우수한 항종양 효능과 최소한의 비표적 면역 독성을 보였다. 기계적으로 순응적인 구성요소와 생체적합성 구성요소를 갖춘 이 시스템은 수술적으로 절제할 수 없는 종양 환자에게 적용 가능한 안전하고 신속하게 임상으로 전환 가능한 접근법을 제공한다.

초록 배경: 종양 미세환경의 골수계 구획에서 CD244 신호전달은 단핵구의 면역억제성 표현형과 관련되는 것으로 시사되어 왔다. 그러나 림프계 세포에서 CD244가 공존 발현하기 때문에, 단핵구/대식세포에서의 종양 면역에서 CD244의 정확한 분자 기전과 기여는 아직 불분명하다. 방법: 종양 관련 대식세포에서의 CD244 역할을 직접적으로 평가하기 위해, cre-lox 재조합을 이용하여 단핵구 계통 특이 CD244 결손 마우스를 제작하고 B16F10 흑색종에 노출시켰다. 종양 침윤 대식세포의 표현형과 기능, 그리고 항원 특이 CD8 T 세포를 유세포분석과 단일세포 RNA 서열분석 자료 분석으로 평가하였으며, 항종양형 대식세포 분화, 항원 제시, 탐식에 대한 분자 기전을 체외(ex vivo)에서 조사하였다. 마지막으로, 흑색종에서 치료 양식으로서 CD244 음성 단핵구의 임상적 실행 가능성을 입양전이 실험으로 확인하였다. 결과: CD244fl/fl LysMcre 마우스는 종양 이식 후 14일째에 종양 부피가 CD244fl/fl 대조군에 비해 유의하게 감소(61%)하였다. 종양 조직 내에서 CD244fl/fl LysMcre 마우스는 Ly6Clow 대식세포의 비율이 더 높았고, 더불어 gp100+IFN-γ+ CD8 T 세포가 증가해 있었다. 유세포분석 및 RNA 서열분석 자료는 ER 스트레스가 단핵구에서 CD244 발현을 증가시킨다는 것을 보여주었다. 이는 차례로 자가포식(autophagy) 경로를 억제함으로써 항종양형 Ly6Clow 대식세포의 생성, 탐식 및 MHC-I 항원 제시를 저해하였다. 항-PD-L1 항체와 CD244-/- 골수유래 대식세포를 병용하면, 항-PD-L1 항체 단독 또는 야생형 대식세포와의 병용에 비해 종양 거부(tumor rejection)가 현저히 향상되었다. 이러한 결과는 마우스 자료와 일관되게, 인간 흑색종 조직의 단일세포 RNA 서열분석 데이터에서 CD244와 대식세포 성숙 및 기능 억제 간의 밀접한 연관성이 전사체 분석을 통해 확인되었다. 또한 CD244 음성 단핵구/대식세포의 존재는 1차 및 전이성 종양에서 환자 생존을 유의하게 증가시켰다. 결론: 본 연구는 흑색종에서 종양 항원 특이 T 세포 반응과 항종양형 대식세포 생성의 억제에 관여하는 단핵구/대식세포에서의 CD244의 새로운 역할을 강조한다. 특히, 본 연구 결과는 CD244 결핍 대식세포가 면역 체크포인트 억제제와 병용하여 치료제로 활용될 수 있음을 시사한다. 더불어 단핵구 계통 세포에서의 CD244 발현은 암 환자에서 예후 예측 지표로 기능할 수 있다. 참고문헌 형식: Jeongsoo Kim, Tae-Jin Kim, Sehyun Chae, Hyojeong Ha, Yejin Park, Seon Ah Lim, Hyemin Lee, Younji Sim, Seyoung Oh, Geon Mo Koo, Minkyung Jo, Daehee Hwang, Kyung-Mi Lee. 단핵구에서의 CD244 표적 결손은 항종양형 대식세포로의 분화를 촉진하고 흑색종에서 PD-L1 차단의 효과를 증대시킨다 [abstract]. In: Proceedings of the American Association for Cancer Research Annual Meeting 2024; Part 2 (Late-Breaking, Clinical Trial, and Invited Abstracts); 2024 Apr 5-10; San Diego, CA. Philadelphia (PA): AACR; Cancer Res 2024;84(7_Suppl):Abstract nr LB338.

배경: 종양 미세환경의 골수성 구획에서 CD244 신호전달은 단핵구의 면역억제성 표현형과 연관되는 것으로 시사되어 왔다. 그러나 CD244가 단핵구/대식세포에서 종양 면역에 기여하는 정밀한 분자적 기전은, CD244를 발현하는 림프구성 세포들이 공존함에 따라 아직 명확하지 않다. 방법: 종양관련 대식세포에서 CD244의 역할을 직접 평가하기 위해, cre-lox 재조합을 이용하여 단핵구 계열 특이적 CD244 결손 마우스를 생성하고 B16F10 흑색종에 노출시켰다. 유세포분석 및 단일세포 RNA 염기서열분석 데이터 분석을 통해 종양 침윤 대식세포의 표현형과 기능, 그리고 항원특이적 CD8 T 세포를 평가하였으며, 항종양성 대식세포 분화, 항원제시, 식작용을 유발하는 분자적 기전을 체외(ex vivo)에서 조사하였다. 마지막으로, 흑색종에서 CD244 음성 단핵구를 치료 양식으로 활용할 임상적 타당성은 입양이식(adoptive transfer) 실험으로 확인하였다. 결과: 골수 유래 대식세포는 항-PD-L1 항체 단독 또는 야생형 대식세포와의 병용에 비해 종양 거부를 현저히 개선하였다. 마우스 데이터와 일치하게, 인간 흑색종 조직의 단일세포 RNA 염기서열분석 데이터셋에서 전사체 분석 결과 CD244와 대식세포의 성숙 및 기능 억제 간의 긴밀한 연관성이 확인되었다. 또한 CD244 음성 단핵구/대식세포의 존재는 원발성 및 전이성 종양에서 환자의 생존을 유의하게 증가시켰다. 결론: 본 연구는 흑색종에서 항종양성 대식세포 생성과 종양 항원 특이적 T 세포 반응을 억제하는 데 있어 단핵구/대식세포에서 CD244이 가지는 새롭고도 중요한 역할을 부각한다. 특히, 본 연구 결과는 CD244 결손 대식세포가 면역관문억제제와 병용하여 치료제의 한 가지로 활용될 가능성이 있음을 시사한다. 아울러, 단핵구 계열 세포에서의 CD244 발현은 암 환자에서 예후 지표로서의 역할을 수행한다.

면역치료의 장벽을 극복하기 위해, 합성 비타민 D 유사체인 칼시포트리올이 면역 반응을 조절하고 면역억제적인 종양 미세환경을 변화시킴으로써 교모세포종(GBM)의 면역 회피를 극복할 수 있는지 조사하였다. 칼시포트리올의 투여는 종양 성장을 상당히 감소시켰다. 생체 내 및 체외 연구 모두에서 CD8+T 및 자연살해(NK) 세포 유전자 시그니처가 풍부해지고 활성화되었으며, IFN-γ와 그랜자임 B가 높은 수준으로 생성되었다. 반면 조절 T 세포(Treg)는 칼시포트리올 처리군에서 유의하게 감소하였다. 흉선 기질 림프구 형성 인자(TSLP)의 수용체인 CD127의 발현은 CD4+T 세포에서 상승되어 잠재적으로 T-세포 프라이밍을 지지할 수 있다. NK 또는 CD8+T 세포를 고갈시키는 경우가 아니라, CD4+T 세포를 고갈시키면 칼시포트리올의 항종양 효능이 완전히 소실되었다. 이러한 결과는 칼시포트리올/TSLP/CD4+T 축이 GBM에서 Treg의 수를 감소시키는 동시에 CD8+T 및 NK 세포를 활성화할 수 있음을 시사한다. 따라서 칼시포트리올은 면역학적으로 ‘콜드(cold)’ 종양을 ‘핫(hot)’ 종양으로 전환함으로써 GBM의 면역 저항성을 극복하기 위한 새로운 치료 양식이 될 수 있다. 데이터 가용성: 데이터는 정당한 요청이 있을 경우 이용 가능하다. 대조군과 칼시포트리올 처리 GL261 종양의 전사체(transcriptome)를 비교한 RNA-seq 데이터세트는 요청 시 해당 책임 저자로부터 제공받을 수 있다.

암 면역편집(cancer immunoediting) 과정에서 암세포는 면역치료 유도 항종양 면역으로부터 도피하기 위해 세포사멸 실행자(executioner) 기전의 조절을 비정상적으로 변화시킨다. 지질 과산화(lipid peroxidation)에 의해 유발되는 조절된 괴사(regulated necrosis)의 한 유형인 페롭토시스(ferroptosis)는 T 세포 기반 면역치료의 항종양 활성에서 중추적인 역할을 수행하지만, 면역불응성 종양세포에서 페롭토시스를 조절하는 기전은 불명확하다. 본 연구에서는 PD-1 차단 및 입양 T 세포 치료(adoptive T cell therapy, ACT)를 통해 면역편집의 경과 후 획득한 면역불응성 종양의 전임상 모델을 사용하여, T 세포 기반 면역치료가 종양세포의 페롭토시스 내성 발달을 유도함을 확인하였다. 이 과정에서 면역치료에 의해 E2F1이 상향조절되며, E2F1은 차례로 HMGCR 유전자의 프로모터(promoter)에 결합하여 HMGCR을 상향조절함으로써 페롭토시스에 대한 내성에 기여한다. 특히 HMGCR 억제는 면역불응성 종양세포를 ACT 및 PD-1 차단에 민감하게 만든다. 따라서 본 연구 결과는 암세포가 면역치료에 대한 내성을 획득하기 위해 페롭토시스를 조절하는 기전을 규명하며, 면역불응성 암에서 페롭토시스 내성을 제어하기 위한 중심 분자 표적으로서 E2F1-HMGCR 축을 시사한다.

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